目的:初步探索化合物苯并噻唑類衍生物a10抗人卵巢癌SKOV3細(xì)胞株的活性,為治療卵巢癌新藥的研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:①將14種合成的苯并噻唑衍生物對(duì)人卵巢癌SKOV3細(xì)胞株進(jìn)行24小時(shí)的MTT細(xì)胞活性影響實(shí)驗(yàn)(順鉑作為陽(yáng)性對(duì)照),計(jì)算14種苯并噻唑類衍生物作用于SKVO3細(xì)胞24小時(shí)后的IC50,將IC50值最低的化合物a10用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。②通過(guò)流式細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)a10對(duì)人卵巢癌SKOV3腫瘤細(xì)胞株凋亡率的影響。實(shí)驗(yàn)組(化合物a10濃度分別25/50/75μmol/L)、陽(yáng)性對(duì)照組(順鉑0.66μmol/L),陰性對(duì)照組(等量高糖培養(yǎng)基/0.9%生理鹽水)。③通過(guò)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)化合物a10對(duì)人卵巢癌SKOV3腫瘤細(xì)胞株的遷移能力的影響。④利用熒光定量PCR(Real-Time qPCR)檢測(cè)化合物a10抗人卵巢癌SKOV3腫瘤細(xì)胞株8小時(shí)及12小時(shí)后BCL-2和Bax的mRNA表達(dá)量。⑤制作雞胚尿囊膜(CAM)腫瘤模型,以此模型檢測(cè)化合物a10對(duì)人卵巢癌SKOV3腫瘤細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用。⑥利用3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)檢測(cè)a10抗人卵巢癌SKOV3腫瘤細(xì)胞株生長(zhǎng)的遠(yuǎn)期毒性。結(jié)果:在14種苯并噻唑衍生物中,化合物a10抗人卵巢癌SKOV3腫瘤細(xì)胞株效果突出,其72h IC50值為57.38μmol/L;流式細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示高濃度的化合物a10(實(shí)驗(yàn)組)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡明顯;化合物a10抑制人卵巢癌SKOV3腫瘤細(xì)胞株遷移力的作用具有時(shí)間依賴性和濃度依賴性;通過(guò)q-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)出化合物a10同時(shí)促進(jìn)Bcl-2和Bax的mRNA表達(dá)量增高;人卵巢癌SKOV3腫瘤細(xì)胞株濃縮液種植在孵育8天的雞胚尿囊膜上3-5天就能夠順利的長(zhǎng)出腫瘤,建模成瘤率最佳的SKOV3細(xì)胞量為4*10~6個(gè),腫瘤組織切片HE染色后鏡下觀具有和卵巢癌腫瘤組織相同的生理特性,通過(guò)雞胚尿囊膜腫瘤模型觀察a10具有抗人卵巢癌SKOV3細(xì)胞腫瘤生長(zhǎng)的作用;3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)觀察化合物a10對(duì)腫瘤細(xì)胞的遠(yuǎn)期毒性隨濃度增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng)。結(jié)論:苯并噻唑衍生物a10有較好的抗人卵巢癌SKOV3細(xì)胞株活性可能成為一種新型的抗卵巢癌的化合物,為解決復(fù)發(fā)和耐藥卵巢癌患者化療提供一個(gè)新的研究方向。
【學(xué)位單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R737.31
【部分圖文】：

自動(dòng)翻蛋孵箱

雞胚尿囊膜制作過(guò)程圖

雞胚發(fā)育過(guò)程

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 覃利菊;;卵巢癌診斷和治療的現(xiàn)狀及進(jìn)展[J];中外醫(yī)學(xué)研究;2013年19期

2 張斌;阮喜云;陳杰;張士寶;劉雙慶;王全穎;楊廣笑;劉慶勇;;人腎癌雞胚模型的建立及其腫瘤生物學(xué)特性的研究[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2012年01期

3 王恒;殷慧群;章孝榮;;雞胚模型在生物研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J];生命科學(xué);2009年02期

4 楊麗華,王凱峰,周軼萍,李瑪琳;人卵巢癌雞胚尿囊膜血管生成模型的建立[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展;2003年06期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 劉大川;7-烷氧基[1，2，4]三唑并[3，4-b]苯并噻唑-3（2H）-酮系列衍生物的合成及抗驚厥活性研究[D];延邊大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2822206