目的討論子癇前期患者胎盤組織中miR-10b和HOXD10的表達情況、相關性及其在疾病發(fā)生發(fā)展中的意義。方法1選取63例于2017.11-2018.07在唐山市工人醫(yī)院產(chǎn)科住院的患者,其中29例組成正常妊娠組、14例組成子癇前期組、20例組成子癇前期重度組,所選患者的分娩方式均為剖宮產(chǎn)。2采用RT-PCR技術檢測miR-10b在正常妊娠組、子癇前期組及子癇前期重度組胎盤組織中的表達差異情況;采用Western blot技術檢測HOXD10蛋白在正常妊娠組、子癇前期組及子癇前期重度組胎盤組織中的表達差異情況;培養(yǎng)JEG-3細胞,通過細胞轉(zhuǎn)染技術將miR-10b mimics轉(zhuǎn)入JEG-3細胞內(nèi),使miR-10b過表達,采用RT-PCR方法檢測JEG-3細胞轉(zhuǎn)染情況;細胞模型構(gòu)建成功后,采用RT-PCR及Western blot技術檢測各組細胞內(nèi)HOXD10 mRNA及HOXD10蛋白的表達差異情況;采用CCK-8實驗及劃痕實驗檢測各組細胞增殖能力及侵襲能力的差異。3各實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學分析采用SPSS17.0軟件,單因素方差分析用于多樣本之間的比較,SNK及LSD分析用于兩樣本之間的比較,雙變量相關分析用于相關性分析。結(jié)果1 miR-10b在子癇前期組及子癇前期重度組患者胎盤組織中呈低表達,與正常妊娠組相比較差異有統(tǒng)計學意義(F=1527.224,P0.05),miR-10b在子癇前期重度組患者胎盤組織中的表達明顯低于子癇前期組,差異有統(tǒng)計學意義(LSDt=27.312,P0.05);在子癇前期組與子癇前期重度組的患者胎盤組織中的HOXD10蛋白呈高表達,與正常妊娠組相比差異有統(tǒng)計學意義(F=277.302,P0.05),且HOXD10蛋白在子癇前期重度組比子癇前期組的胎盤組織中高表達(LSD-t=10.308,P0.05);miR-10b與HOXD10的表達表現(xiàn)為負相關,差異具有統(tǒng)計學意義(r=-0.961,P0.05)。2 has-miR-10b-mimics轉(zhuǎn)染JEG-3細胞使其過表達,應用RT-PCR進行檢測,結(jié)果顯示實驗組細胞中的miR-10b的表達水平顯著高于空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組(F=370.429,P0.05),而miR-10b的表達在空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組之間無顯著性差異(P0.05);細胞轉(zhuǎn)染完成后,實驗組細胞中的HOXD10 mRNA的表達水平顯著低于空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組(F=208.196,P0.05),而空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組的HOXD10mRNA的表達水平無顯著性差異(P0.05);細胞轉(zhuǎn)染完成后,實驗組細胞中的HOXD10蛋白的表達水平顯著低于空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組(F=105.443,P0.05),而HOXD10蛋白的表達在空白對照組、轉(zhuǎn)染試劑組及陰性組之間無明顯差異性(P0.05);細胞轉(zhuǎn)染完成后,實驗組細胞的增殖能力顯著高于空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組(F=1985.701,P0.05),而增殖能力在空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組細胞之間的沒有明顯的差異性(P0.05);細胞轉(zhuǎn)染完成后,實驗組細胞的侵襲能力顯著高于空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組(F=112.800,P0.05),而侵襲能力在空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組細胞間的差異性不明顯(P0.05)。結(jié)論1在孕婦胎盤中HOXD10是miR-10b的靶基因,且二者呈負向調(diào)控關系;2在子癇前期患者胎盤中miR-10b表達明顯下降,且通過負向調(diào)節(jié)使HOXD10蛋白表達明顯增加,隨著疾病的發(fā)展變化愈發(fā)明顯;3在JEG-3細胞中過表達miR-10b可以使HOXD10 mRNA及HOXD10蛋白的表達明顯下降和使JEG-3細胞的增殖能力與侵襲能力的增強;4 miR-10b及HOXD10可能會成為子癇前期疾病早期預防及診斷的靶向目標。圖14幅;表11個;參62篇。
【學位單位】：華北理工大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R714.244
【部分圖文】：

rrelation正常妊娠組 子癇前期組子癇前期重度組0.00.51.01.5HOXD10蛋白miR-10bmiR-10b與HOXD10蛋白的相對表達量圖 4 miR-10b 與 HOXD10 蛋白相對表達量的折線圖e graph of the relative expression of miR-10b and HOXD生長形態(tài)細胞呈貼壁生長，多數(shù)細胞形態(tài)表現(xiàn)為上皮細后幾乎全部貼壁，成片成長，如圖 5 所示，細

華北理工大學碩士學位論文mRNA 在空白對照組、脂質(zhì)體組、陰性組、實驗組的細胞中的相對表達量是（1.008±0.011）、（1.057±0.033）、（1.060±0.007）、（0.542±0.048），可見實驗組和空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組之間相比，HOXD10 mRNA 表達顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義（F=208.196，P=0.000），空白對照組、脂質(zhì)體組及陰性組之間差異無統(tǒng)計學意義（P 值分別為 0.078、0.067、0.927），表明 miR-10b 在轉(zhuǎn)錄水平抑制 HOXD10 的表達。

空白對照組 脂質(zhì)體組 陰性組 實驗組圖 13 細胞劃痕圖（×400）Fig.13 Cell scratch map（×400）表 11 細胞劃痕后 0 h、48 h 的劃痕面積及侵襲率（ x s）Table 11 Scratch area at 0h and 48h after cell scratch and invasive rate ( )組別 例數(shù) 0 h 劃痕面積（Sb） 48 h 劃痕面積（Sa） 侵襲率（%）空白對照組 3 862.282±51.579 660.673±25.372 23.253±4.223脂質(zhì)體組 3 878.731±47.601 608.380±14.569 30.686±2.252陰性組 3 842.195±3.298 604.173±56.829 28.205±7.095實驗組 3 872.169±53.361 201.850±27.085abc76.659±4.686abcF 0.392 112.800 77.718P 0.763 0.000 0.000注：P 值：One-Way ANOVA test；兩組之間比較采用 LSD 及 SNK 檢驗；a 表示實驗組與空白對照組相比，P<0.05，b 表示實驗組與脂質(zhì)體組相比，P<0.05，c 表示實驗組與陰性組相比，P<0.05。

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 鐘玉祥;劉寧;;Has-miR-10b與腫瘤侵襲性關系的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2010年10期

本文編號：2815147