【摘要】：第一部分檢測脂聯(lián)素及其受體在PCOS小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢及胚胎組織中的表達(dá)情況目的:通過檢測脂聯(lián)素及其受體在多囊卵巢綜合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)小鼠子宮內(nèi)膜組織、卵巢及胚胎組織中的表達(dá)情況,觀察PCOS小鼠與正常小鼠子宮內(nèi)膜組織、卵巢及胚胎組織中脂聯(lián)素及其受體在胚胎著床窗口期的表達(dá)的變化,探討脂聯(lián)素對PCOS小鼠對受孕率影響。方法:1.采用脫氫表雄酮皮下注射的方法構(gòu)建PCOS小鼠模型,造模成功后將小鼠隨機(jī)分為4組,分別為:正常未孕組(正常未處理小鼠)10只、正常受孕組(正常小鼠促排卵處理后進(jìn)行交配)20只、PCOS未孕組(PCOS造模成功后未處理小鼠)10只、PCOS受孕組(PCOS造模成功后促排卵處理后進(jìn)行交配)20只。2.受孕4d時(shí)提取各組小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢組織及孕鼠胚胎,通過用免疫組化方法測定各組小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢組織及免疫熒光方法測定胚胎中脂聯(lián)素及其受體1和2的表達(dá)。3.受孕4d時(shí)提取各組小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢組織及孕鼠胚胎RNA,采用Real-time PCR的方法檢測脂聯(lián)素及其受體1和2 mRNA在小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢組織及胚胎中的表達(dá)。4.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,應(yīng)用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用t檢驗(yàn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.對照組小鼠發(fā)情周期基本正常,PCOS組小鼠發(fā)情周期紊亂。對照組小鼠子宮、卵巢表面鮮紅,卵巢表面未見明顯擴(kuò)張卵泡;PCOS組小鼠子宮表面血管擴(kuò)張充血,卵巢表面蒼白且可見多個(gè)大小不等擴(kuò)張卵泡。2.正常受孕組胚胎著床數(shù)量明顯多于PCOS受孕組(P0.05)。3.免疫組化結(jié)果顯示,脂聯(lián)素(Adiponectin,AdipoQ)、脂聯(lián)素受體1(Adiponectin receptor 1,AdipoR1)、脂聯(lián)素受體2(Adiponectin receptor 2,AdipoR2)均可在小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢及胚胎組織中表達(dá)。PCOS組子宮內(nèi)膜、卵巢AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2表達(dá)均低于對照組(P0.05);PCOS未孕組與受孕組間AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2在子宮內(nèi)膜、卵巢表達(dá)無顯著差異(P0.05)。A2免疫熒光結(jié)果顯示,PCOS組胚胎AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2表達(dá)均低于正常受孕組(P0.05)。4.AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2 m RNA均可在小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢及胚胎組織中特異性表達(dá)。PCOS受孕組子宮內(nèi)膜AdipoQ mRNA表達(dá)顯著低于正常受孕組(P0.05),而AdipoR1及AdipoR2 mRNA表達(dá)顯著高于正常受孕組(P0.05)。PCOS受孕組及未孕組卵巢AdipoR1、AdipoR2 mRNA表達(dá)均高于正常對照組(P0.05);AdipoR1、AdipoR2 mRNA在PCOS受孕組胚胎組織中表達(dá)高于正常受孕組(P0.05)。結(jié)論:脂聯(lián)素及其受體在PCOS小鼠子宮內(nèi)膜組織、卵巢組織、胚胎組織中表達(dá)低于正常小鼠,脂聯(lián)素可能是通過脂聯(lián)素受體1、2表達(dá)的變化調(diào)控小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢功能,從而影響PCOS小鼠受孕率。第二部分不同濃度外源性脂聯(lián)素對PCOS小鼠受孕率影響的初步觀察目的:通過檢測PCOS小鼠皮下注射不同濃度脂聯(lián)素后子宮內(nèi)膜、卵巢及胚胎中脂聯(lián)素及其受體的表達(dá)情況,初步探究脂聯(lián)素對PCOS小鼠受孕率的影響。方法:1.用脫氫表雄酮皮下注射法構(gòu)建PCOS模型,造模成功并確認(rèn)小鼠受孕后將其隨機(jī)分為4組,分別為:A組(對照組,注射生理鹽水)5只、B組(注射脂聯(lián)素1μg/kg·d~(-1))10只、C組(注射脂聯(lián)素10μg/kg·d~(-1))10只、D組(注射脂聯(lián)素100μg/kg·d~(-1))10只,每只小鼠皮下注射1次/天,共4天。2.受孕4d時(shí)提取各組小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢組織及胚胎,通過用免疫組化方法測定各組小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢組織及免疫熒光方法測定胚胎中脂聯(lián)素及其受體1和2的表達(dá)。3.受孕4d時(shí)提取各組小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢組織及胚胎RNA,采用Real-time PCR的方法檢測脂聯(lián)素及其受體1和2 mRNA在小鼠子宮內(nèi)膜、卵巢組織及胚胎中的表達(dá)。4.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,應(yīng)用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用t檢驗(yàn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.C組(注射脂聯(lián)素10μg/kg·d~(-1))胚胎著床數(shù)量明顯多于A組(對照組)、B組(注射脂聯(lián)素1μg/kg·d~(-1))、D組(注射脂聯(lián)素100μg/kg·d~(-1))(P0.05)。2.AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2在B組(注射脂聯(lián)素1μg/kg·d~(-1))、C組(注射脂聯(lián)素10μg/kg·d~(-1))、D組(注射脂聯(lián)素100μg/kg·d~(-1))子宮內(nèi)膜表達(dá)高于A組(對照組)(P0.05)。C組AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2在子宮內(nèi)膜、卵巢中表達(dá)顯著高于其他組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2均可在小鼠胚胎組織中表達(dá)。各組間無顯著性差異(P0.05)。3.A組(對照組)子宮內(nèi)膜、卵巢及胚胎組織中AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2mRNA表達(dá)明顯低于其他各組(P0.05)。C組(注射脂聯(lián)素10μg/kg·d~(-1))AdipoQ、AdipoR1及AdipoR2 m RNA在子宮內(nèi)膜、卵巢及胚胎組織表達(dá)顯著高于B組(注射脂聯(lián)素1μg/kg·d~(-1))、D組(注射脂聯(lián)素100μg/kg·d~(-1)),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。D組AdipoQ、AdipoR1、AdipoR2 mRNA在胚胎組織表達(dá)明顯低于對照組(P0.05)。結(jié)論:適當(dāng)濃度外源性脂聯(lián)素可增加PCOS小鼠脂聯(lián)素及其受體1、2子宮內(nèi)膜組織、卵巢組織及胚胎中的表達(dá),有利于提高PCOS小鼠受孕率。高濃度外源性脂聯(lián)素可降低脂聯(lián)素及其受體1、2在PCOS小鼠子宮內(nèi)膜組織、卵巢組織及胚胎中表達(dá),從而降低PCOS小鼠受孕率。
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R711.75
【圖文】：

發(fā)情前期

發(fā)情期

發(fā)情后期

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2783616