【摘要】：背景:子癇前期是一種妊娠特有的疾病,表現(xiàn)為妊娠20周后出現(xiàn)高血壓和蛋白尿,有時(shí)會引起多個(gè)臟器功能障礙。是圍產(chǎn)期母嬰死亡的主要原因之一。子癇前期的確切病因仍然是未知的,然而許多理論表明,早孕異常胎盤發(fā)育會引發(fā)系統(tǒng)性炎癥、氧化應(yīng)激和內(nèi)皮功能障礙,從而導(dǎo)致其臨床表現(xiàn)。因?yàn)樘ケP血液供應(yīng)不足,子癇前期孕婦的胎兒暴露在宮內(nèi)不良的環(huán)境中,在胎兒發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期,可能會發(fā)生永久性的組織調(diào)整,從而導(dǎo)致器官功能的長期變化。胎兒必須適應(yīng)潛在不利的子宮內(nèi)環(huán)境,而這種適應(yīng)可能在以后的生活中增加發(fā)生慢性非傳染性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。那些子癇前期孕婦的子代在以后生活中發(fā)生高血壓、心血管疾病、代謝性疾病和認(rèn)知障礙等風(fēng)險(xiǎn)增加。潛在的分子機(jī)制仍不清楚。表觀遺傳修飾被認(rèn)為在調(diào)節(jié)生命早期環(huán)境暴露對未來疾病風(fēng)險(xiǎn)的影響中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。在子宮內(nèi)引起的印跡基因的持續(xù)變化可能是導(dǎo)致成人疾病高風(fēng)險(xiǎn)的機(jī)制之一。印跡基因是調(diào)節(jié)胎兒和胎盤生長發(fā)育的調(diào)解劑,它們的表達(dá)和功能受到攜帶著親代等位基因特異性甲基化譜的差異甲基化調(diào)控區(qū)(DMRs)的控制。DNA甲基化是哺乳動物一種最穩(wěn)定的表觀遺傳修飾,宮內(nèi)暴露引起的DNA甲基化改變可以改變基因表達(dá)和生理功能。MEST和DLK1均為印跡基因,已被報(bào)道作用于調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞分化,并可能參與肥胖、高血壓和糖尿病。中胚葉特異性轉(zhuǎn)錄子(MEST)是位于染色體7q32.2的印記基因,可能與α/β水解酶折疊家族有關(guān)。它是一種父系表達(dá)的基因,僅從父系等位基因中被轉(zhuǎn)錄,它的缺失導(dǎo)致宮內(nèi)生長遲緩。MEST被認(rèn)為與脂肪細(xì)胞分化和肥胖有關(guān)。同樣,DLK1是一種位于人類染色體14q32上父系表達(dá)的印記基因,該基因編碼了一種名為前脂肪細(xì)胞因子1的跨膜蛋白質(zhì)(pref-1),其中包含多個(gè)表皮生長因子,是作為細(xì)胞生長的調(diào)節(jié)因子。pref-1是一種脂肪細(xì)胞分化的抑制劑,被認(rèn)為是決定肥胖和與成年期代謝疾病高風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的一個(gè)因素。最近,在子癇前期患者的胎兒中發(fā)現(xiàn)了血清pref-1的增加,這可能是在成年期導(dǎo)致代謝疾病風(fēng)險(xiǎn)增高的一個(gè)中介。有作者還觀察到由妊娠期糖尿病誘導(dǎo)的MEST差異甲基化區(qū)域的低甲基化反應(yīng),它的特征表現(xiàn)為巨大胎兒。然而,子癇前期對胎兒MEST差異性甲基化區(qū)域的甲基化水平的影響尚未見報(bào)道。由此我們推測子癇前期和正常妊娠胎兒MEST和DLK1差異甲基化區(qū)的甲基化水平可能不同。為了驗(yàn)證我們的假設(shè),我們選取了子癇前期孕婦及正常妊娠婦女新生兒出生時(shí)臍血樣本測定MEST和DLK1的甲基化水平。目的:闡明子癇前期患者胎兒的MEST和DLK1基因DNA甲基化水平的變化,并探討子癇前期子代發(fā)生成人疾病高風(fēng)險(xiǎn)的可能機(jī)制。方法:從78例子癇前期和95例正常妊娠婦女胎兒臍血中分離出來胎兒淋巴細(xì)胞。提取基因組DNA,然后通過MassARRAY分析儀行定量甲基化分析,確定MEST和DLK1差異性甲基化區(qū)域的DNA甲基化水平。結(jié)果:在MEST基因的20個(gè)CpG位點(diǎn)和DLK1基因的16個(gè)CpG位點(diǎn)檢測到甲基化水平。在子癇前期和正常妊娠對照組之間,MEST基因CPG1、3、4、7.8、15、18.19 和 20 中甲基化水平有顯著性差異(p=0.014,0.001,0.001,0.001,=0.001,=0.005,=0.003),同樣在DLK1基因的CPG3和9中也觀察到甲基化水平的顯著差異(p=0.002,0.027)。然而,這些差異甲基化區(qū)域的平均甲基化水平并沒有明顯差別。在輕度子癇前期組和重度子癇前期組之間,MEST或DLK1的任何CpG位點(diǎn)均未觀察到甲基化水平的顯著性差異(p0.05)。相關(guān)性分析顯示,MEST或DLK1甲基化水平與母親年齡、新生兒出生體重及性別無顯著相關(guān)性(p0.05)。結(jié)論:我們推斷在子癇前期組的MEST和DLK基因的某些位點(diǎn)上,甲基化水平發(fā)生改變。這可能是導(dǎo)致子癇前期子代在未來生活中罹患成人疾病高風(fēng)險(xiǎn)的機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R714.244
【圖文】：

圖３．２顯示了檢測的ＤＬＫ１邋１６個(gè)ＣｐＧ位點(diǎn)的甲基化水平。在子癇前期組和正常逡逑妊娠組的ＣｐＧ位點(diǎn)３和９的甲基化水平上有顯著差異（ｐ＝０．００２，邋０．０２７）。但在ＣｐＧ逡逑位點(diǎn)邋１．２，邋４，邋５，７，８，邋１０．１１，１３，１４．１５，邋１８，邋１９和２０甲基化水平?jīng)]有顯著差異（ｐ＞０．０５）。逡逑１．２邋：逡逑１邋ｌｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉ逡逑ｉｊｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉ逡逑

0３邋■邋■邋■邋■邐■邋Ｐｒｅｏｃｌａｍｐｓｉｏ逡逑ｌｌｌｌｌｌｉｉｉｌｍｉｉｉ逡逑圖３．１子癇前期組和正常妊娠組ＭＥＳＴＣｐＧ位點(diǎn)甲基化水平的比較逡逑圖３．２顯示了檢測的ＤＬＫ１邋１６個(gè)ＣｐＧ位點(diǎn)的甲基化水平。在子癇前期組和正常逡逑妊娠組的ＣｐＧ位點(diǎn)３和９的甲基化水平上有顯著差異（ｐ＝０．００２，邋０．０２７）。但在ＣｐＧ逡逑位點(diǎn)邋１．２，邋４，邋５，７，８，邋１０．１１，１３，１４．１５，邋１８，邋１９和２０甲基化水平?jīng)]有顯著差異（ｐ＞０．０５）。逡逑１．２邋：逡逑１邋ｌｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉ逡逑ｉｊｉｉｉｉｉｉｉｉｉｉ逡逑0＾ｖ逡逑圖３．２子癇前期組和正常妊娠組ＤＬＫＩＣｐＧ位點(diǎn)甲基化水平的比較逡逑１４逡逑

浙江大學(xué)碩上學(xué)位論文邐逡逑３．５輕度子癇前期組與重度子癇前期組胎兒臍血ＭＥＳＴ和ＤＬＫ１基因逡逑ＣｐＧ位點(diǎn)甲基化水平的比較（見圖３．３、３．４）逡逑圖３．３、３．４顯示了在輕度子癇前期組和重度子癇前期組之間，ＭＥＳＴ或ＤＬＫ１逡逑的任何ＣｐＧ位點(diǎn)均未觀察到f窕降南災(zāi)圓鉅歟ǎ穡荊埃埃靛澹�。辶x

本文編號：2751005