【摘要】：目的1.探討低強(qiáng)度脈沖超聲(Low-intensity Pulsed Ultrasound,LIPUS)對(duì)環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)誘導(dǎo)卵巢損傷模型大鼠的治療作用。2.檢測(cè)與卵泡生長(zhǎng)相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),來(lái)探討LIPUS促進(jìn)卵巢早衰(Premature ovarian failure,POF)大鼠卵巢功能恢復(fù)的分子機(jī)制。方法本研究分為兩個(gè)部分:第一部分是低強(qiáng)度脈沖超聲對(duì)SD大鼠卵巢早衰的治療效果,第二部分是低強(qiáng)度脈沖超聲改善SD大鼠卵巢早衰功能的機(jī)制研究。1.從100只雌性SD大鼠中按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)選取70只建立POF動(dòng)物模型。連續(xù)5天大鼠腹腔注射CTX 30mg/kg/d。最后一次注射結(jié)束后,每天早上8點(diǎn)對(duì)大鼠進(jìn)行陰道脫落細(xì)胞涂片分析,連續(xù)14天。發(fā)情周期出現(xiàn)紊亂或無(wú)發(fā)情周期代表模型成功。共有62只大鼠成功建立POF動(dòng)物模型。將建模成功大鼠按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為超聲組(n=31)和對(duì)照組(n=31)。另取30只健康雌性大鼠為空白組。超聲組采用LIPUS輻照,30min/d,共10d�？瞻捉M、對(duì)照組采用與超聲組相同的治療方法,但儀器無(wú)功率輸出。所有大鼠均監(jiān)測(cè)發(fā)情周期和一般情況。治療7天后,從3組中隨機(jī)選取21只大鼠(按隨機(jī)數(shù)字表每組7只),分別與10只健康且年齡匹配的雄性大鼠進(jìn)行交配,記錄懷孕鼠和新生鼠的數(shù)量和體重。然后再?gòu)?組中隨機(jī)選取51只大鼠(按隨機(jī)數(shù)字表每組取17只)處死,采集血液、卵巢和子宮。HE染色光鏡下觀察子宮、卵巢組織形態(tài)學(xué)變化及記錄不同階段卵泡的數(shù)量,ELISA法檢測(cè)血清激素水平變化。2.取第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)束后剩余大鼠,共12只,剖檢出右側(cè)卵巢組織,迅速平分為兩部分。一部分卵巢組織,置于4%多聚甲醛中,常溫固定24h。剩余部分卵巢組織迅速置于EP管中,置于-80℃保存。最后采用免疫組織化學(xué)法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分別對(duì)生長(zhǎng)分化因子-9(Growth differentiation factor-9,GDF-9)和骨形成態(tài)蛋白質(zhì)-15(Bone morphogenetic protein-15,BMP-15)的蛋白質(zhì)和信使RNA表達(dá)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果1.與空白組相比,對(duì)照組的發(fā)情周期紊亂,閉鎖卵泡和血清FSH水平均顯著增加(P0.01),而其他各階段卵泡和血清E_2、AMH水平均有所下降(P0.01)。超聲輻照后,與對(duì)照組相比,超聲組的發(fā)情周期恢復(fù)正常,閉鎖卵泡和血清FSH水平下降(P0.01),其余各階段卵泡顯著增加(P0.01),血清E_2水平恢復(fù)正常(P0.01),AMH水平無(wú)明顯變化,三組大鼠妊娠率之間、每窩新生鼠的數(shù)量和體重之間均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2.與對(duì)照組相比,超聲組BMP-15蛋白質(zhì)的表達(dá),BMP-15和GDF-9信使RNA的表達(dá)均顯著增加(P0.01)。結(jié)論1.LIPUS可改善POF大鼠部分卵巢功能,不能提高大鼠的卵巢儲(chǔ)備功能,且目前本實(shí)驗(yàn)結(jié)果尚未發(fā)現(xiàn)LIPUS對(duì)POF大鼠的妊娠率和生育能力有影響。2.LIPUS可以通過(guò)促進(jìn)卵巢組織中BMP-15蛋白質(zhì)的表達(dá),BMP-15和GDF-9信使RNA的表達(dá),從而改善卵巢功能。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R711.75
【圖文】：

圖 1.1.1 動(dòng)情前期以有核上皮細(xì)胞為主(堿性美藍(lán)染色,×100)Fig. 1.1.1 There were mainly nucleated epithelial cells atproestrus stage(Alkaline meilan staining ,×100)（Note: nuclear epithelial cells）圖 1.1.2 動(dòng)情期以角化上皮細(xì)胞為主(堿性美藍(lán)染色,×100)Fig. 1.1.2 There were mainly keratinized epithelial cells atestrus stage(Alkaline meilan staining ,×100)（Note: keratinized epithelial cells）圖 1.1.3 動(dòng)情后期以有核上皮細(xì)胞、角化上皮細(xì)胞和白細(xì)胞為圖 1.1.4 動(dòng)情間期以白細(xì)胞為主(堿性美藍(lán)染色,×100)

圖 1.1.1 動(dòng)情前期以有核上皮細(xì)胞為主(堿性美藍(lán)染色,×100)Fig. 1.1.1 There were mainly nucleated epithelial cells atproestrus stage(Alkaline meilan staining ,×100)（Note: nuclear epithelial cells）圖 1.1.2 動(dòng)情期以角化上皮細(xì)胞為主(堿性美藍(lán)染色,×100)Fig. 1.1.2 There were mainly keratinized epithelial cells atestrus stage(Alkaline meilan staining ,×100)（Note: keratinized epithelial cells）圖 1.1.3 動(dòng)情后期以有核上皮細(xì)胞、角化上皮細(xì)胞和白細(xì)胞為圖 1.1.4 動(dòng)情間期以白細(xì)胞為主(堿性美藍(lán)染色,×100)

【參考文獻(xiàn)】

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1 錢警語(yǔ);陳秀娟;;抗苗勒管激素與女性生育功能關(guān)系研究進(jìn)展[J];生殖與避孕;2013年07期

2 Yan JIANG;Jing ZHAO;Hui-jing QI;Xiao-lin LI;Shi-rong ZHANG;Daniel W.SONG;Chi-yang YU;Jian-gang GAO;;Accelerated ovarian aging in mice by treatment of busulfan and cyclophosphamide[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2013年04期

3 翟蓓;方廖瓊;李成志;鄒建中;歐洪瓊;;低強(qiáng)度脈沖超聲波對(duì)圍絕經(jīng)期大鼠卵巢功能的影響[J];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志;2012年03期

本文編號(hào)：2741668