【摘要】：目的:人類巨細胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是宮內(nèi)感染最常見的病毒,嬰幼兒期中重度智力障礙,是以HCMV為代表的TORCH系列宮內(nèi)感染為首要病因。海馬是學習記憶的關鍵生理學基礎,也是人巨細胞病毒作用的主要靶區(qū),為了研究人巨細胞病毒導致子代學習記憶功能逐步下降的機制,本研究擬采用病理組織學和分子機制,探討孕早期人巨細胞病毒感染對仔鼠海馬海馬糖皮質(zhì)激素受體和鹽皮質(zhì)激素受體蛋白表達的影響,為HCMV宮內(nèi)感染致子代子代學習記憶功能逐步下降供新的治療靶點。方法:取9-10周齡SPF級SD鼠30只(雌鼠20只,雄鼠10只),按雌雄1:1合籠交配(雄鼠可多次進行交配),將孕鼠隨機分成對照組(10只)和實驗組(10只),分別于妊娠第5天腹腔內(nèi)注射5×10~7 L~(-1)半數(shù)組織培養(yǎng)感染量(TCID_(50))HCMV懸液0.8 mL和等量的人胚成纖維細胞上清液0.8ml。分別從每組隨機抽取10只15日齡仔鼠,(1)采用Morris水迷宮實驗測試其學習記憶功能;(2)仔鼠經(jīng)4%多聚甲醛灌注后取腦組織,采用病理組織學HE染色觀察仔鼠海馬形態(tài)學變化;(3)應用間接免疫熒光染色方法檢測仔鼠海馬(CA1區(qū)、CA3區(qū))MR、GR蛋白的表達情況。采用SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計學處理。結果:1.Morris水迷宮實驗,在定位航行實驗中,對照組和實驗組仔鼠的逃避潛伏期均呈逐漸降低的趨勢,實驗組的逃避潛伏期均比對照組的時間長,并于第4天(t=-2.212,P0.05)、第5天(t=-2.827,P0.05)實驗組較對照組差異有統(tǒng)計學意義。在空間探索實驗中,實驗組仔鼠在目標象限停留時間(探索正確時間)少于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(t=2.390,PO.05);實驗組穿越平臺次數(shù)少于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(t=2.477,PO.05)。2.仔鼠海馬區(qū)CA1區(qū)、CA3區(qū)病理組織學HE染色顯示,對照組仔鼠海馬神經(jīng)細胞排列均勻整齊,細胞核呈圓形或橢圓形,核仁明顯,染色質(zhì)均勻;實驗組仔鼠海馬神經(jīng)細胞排列紊亂,數(shù)目減少,細胞水腫變大,部分細胞核固縮明顯,并可見巨細胞變;3.免疫熒光染色結果顯示,實驗組仔鼠海馬CA1區(qū)GR(t=3.05,P0.05)、MR(t=2.23,P0.05)、GR/MR(t=2.24,P0.05)平均吸光度值較對照組低,差異有統(tǒng)計學意義;實驗組海馬CA3區(qū)GR(t=2.76,P0.05)、MR(t=2.67,P0.05)、GR/MR(t=2.43,P0.05)平均吸光度值較對照組低,差異有統(tǒng)計學意義。結論:孕早期人巨細胞病毒感染可導致仔鼠空間學習記憶能力下降,海馬CA1、CA3區(qū)海馬神經(jīng)細胞損傷,神經(jīng)細胞水腫、減少,細胞核固縮明顯,部分細胞呈巨細胞變;大鼠海馬表面CA1、CA3區(qū)核受體GR、MR蛋白表達水平下降,以及GR/MR比值下降,HPA軸功能紊亂。海馬MR、GR蛋白水平下調(diào)可能是孕早期HCMV感染致仔鼠空間學習記憶功能受損的機制之一。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R714.2

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 倪坤;唐久來;吳德;段軍;楊李;;孕早期人巨細胞病毒感染對仔鼠海馬N-甲基-D-天冬氨酸受體亞基表達的影響[J];實用兒科臨床雜志;2012年12期

2 姜宏;聞良珍;陳素華;;孕期人巨細胞病毒活動性感染診斷、治療及致病機制系列研究[J];醫(yī)學研究雜志;2007年01期

3 姜凌云,周叢樂,王穎,黃建萍,馮琪,劉紀川,那曉元;先天性和圍產(chǎn)期人巨細胞病毒感染的臨床特征分析[J];新生兒科雜志;1996年03期

本文編號：2733551