【摘要】：目的:人類(lèi)巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是宮內(nèi)感染最常見(jiàn)的病毒,嬰幼兒期中重度智力障礙,是以HCMV為代表的TORCH系列宮內(nèi)感染為首要病因。海馬是學(xué)習(xí)記憶的關(guān)鍵生理學(xué)基礎(chǔ),也是人巨細(xì)胞病毒作用的主要靶區(qū),為了研究人巨細(xì)胞病毒導(dǎo)致子代學(xué)習(xí)記憶功能逐步下降的機(jī)制,本研究擬采用病理組織學(xué)和分子機(jī)制,探討孕早期人巨細(xì)胞病毒感染對(duì)仔鼠海馬海馬糖皮質(zhì)激素受體和鹽皮質(zhì)激素受體蛋白表達(dá)的影響,為HCMV宮內(nèi)感染致子代子代學(xué)習(xí)記憶功能逐步下降供新的治療靶點(diǎn)。方法:取9-10周齡SPF級(jí)SD鼠30只(雌鼠20只,雄鼠10只),按雌雄1:1合籠交配(雄鼠可多次進(jìn)行交配),將孕鼠隨機(jī)分成對(duì)照組(10只)和實(shí)驗(yàn)組(10只),分別于妊娠第5天腹腔內(nèi)注射5×10~7 L~(-1)半數(shù)組織培養(yǎng)感染量(TCID_(50))HCMV懸液0.8 mL和等量的人胚成纖維細(xì)胞上清液0.8ml。分別從每組隨機(jī)抽取10只15日齡仔鼠,(1)采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)試其學(xué)習(xí)記憶功能;(2)仔鼠經(jīng)4%多聚甲醛灌注后取腦組織,采用病理組織學(xué)HE染色觀察仔鼠海馬形態(tài)學(xué)變化;(3)應(yīng)用間接免疫熒光染色方法檢測(cè)仔鼠海馬(CA1區(qū)、CA3區(qū))MR、GR蛋白的表達(dá)情況。采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果:1.Morris水迷宮實(shí)驗(yàn),在定位航行實(shí)驗(yàn)中,對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組仔鼠的逃避潛伏期均呈逐漸降低的趨勢(shì),實(shí)驗(yàn)組的逃避潛伏期均比對(duì)照組的時(shí)間長(zhǎng),并于第4天(t=-2.212,P0.05)、第5天(t=-2.827,P0.05)實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在空間探索實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組仔鼠在目標(biāo)象限停留時(shí)間(探索正確時(shí)間)少于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.390,PO.05);實(shí)驗(yàn)組穿越平臺(tái)次數(shù)少于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.477,PO.05)。2.仔鼠海馬區(qū)CA1區(qū)、CA3區(qū)病理組織學(xué)HE染色顯示,對(duì)照組仔鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞排列均勻整齊,細(xì)胞核呈圓形或橢圓形,核仁明顯,染色質(zhì)均勻;實(shí)驗(yàn)組仔鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞排列紊亂,數(shù)目減少,細(xì)胞水腫變大,部分細(xì)胞核固縮明顯,并可見(jiàn)巨細(xì)胞變;3.免疫熒光染色結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組仔鼠海馬CA1區(qū)GR(t=3.05,P0.05)、MR(t=2.23,P0.05)、GR/MR(t=2.24,P0.05)平均吸光度值較對(duì)照組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;實(shí)驗(yàn)組海馬CA3區(qū)GR(t=2.76,P0.05)、MR(t=2.67,P0.05)、GR/MR(t=2.43,P0.05)平均吸光度值較對(duì)照組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:孕早期人巨細(xì)胞病毒感染可導(dǎo)致仔鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力下降,海馬CA1、CA3區(qū)海馬神經(jīng)細(xì)胞損傷,神經(jīng)細(xì)胞水腫、減少,細(xì)胞核固縮明顯,部分細(xì)胞呈巨細(xì)胞變;大鼠海馬表面CA1、CA3區(qū)核受體GR、MR蛋白表達(dá)水平下降,以及GR/MR比值下降,HPA軸功能紊亂。海馬MR、GR蛋白水平下調(diào)可能是孕早期HCMV感染致仔鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能受損的機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R714.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 倪坤;唐久來(lái);吳德;段軍;楊李;;孕早期人巨細(xì)胞病毒感染對(duì)仔鼠海馬N-甲基-D-天冬氨酸受體亞基表達(dá)的影響[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2012年12期

2 姜宏;聞良珍;陳素華;;孕期人巨細(xì)胞病毒活動(dòng)性感染診斷、治療及致病機(jī)制系列研究[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2007年01期

3 姜凌云,周叢樂(lè),王穎,黃建萍,馮琪,劉紀(jì)川,那曉元;先天性和圍產(chǎn)期人巨細(xì)胞病毒感染的臨床特征分析[J];新生兒科雜志;1996年03期

本文編號(hào)：2733551