【摘要】：胚胎植入是指從卵子受精到胚泡著床的一系列細(xì)胞或分子生物學(xué)事件,是一個(gè)極其復(fù)雜的生理過(guò)程,主要包括游離胚泡定位、黏附和侵入以及胎盤形成,是一個(gè)連續(xù)的動(dòng)力生物學(xué)現(xiàn)象,其中任何一個(gè)過(guò)程的缺陷都會(huì)導(dǎo)致不良的妊娠結(jié)局。子宮內(nèi)膜蛻膜化是指子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞在胚胎發(fā)生黏附反應(yīng)后、受到蛻膜化誘導(dǎo)因子的刺激,增生并分化形成的一種特殊組織,它對(duì)于妊娠的建立和維持具有至關(guān)重要作用。已有研究表明約20%的妊娠失敗與基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化異常有關(guān)。子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化過(guò)程中,母體子宮內(nèi)膜受到一系列基因及信號(hào)通路的調(diào)控,從而基質(zhì)細(xì)胞發(fā)生廣泛的增殖與分化,以適應(yīng)胚胎的生長(zhǎng)。而分化抑制因子3(Id3)作為細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子,在生物體內(nèi)廣泛表達(dá),具有抑制分化、促進(jìn)增殖的作用。課題組前期轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果顯示,Id3在人工誘導(dǎo)蛻膜化組織中的表達(dá)較對(duì)照組顯著降低,這提示Id3基因表達(dá)的降低可能與子宮內(nèi)膜蛻膜化的進(jìn)展有密切聯(lián)系。先已知對(duì)多種細(xì)胞分化起關(guān)鍵調(diào)控作用的鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子1(Prdm1)與Id3相互作用參與多種生物學(xué)過(guò)程,但是Id3在小鼠子宮內(nèi)膜蛻膜化中的作用以及在胚胎植入過(guò)程中與Prdm1的相互作用均不清楚。因此本研究初步探究了Id3和Prdm1基因在早期妊娠和人工誘導(dǎo)蛻膜化模型小鼠的子宮內(nèi)膜中的表達(dá)模式,探索了Id3在小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化過(guò)程中的作用,以及借助體外人工誘導(dǎo)蛻膜化模型驗(yàn)證Prdm1-Id3信號(hào)對(duì)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化的調(diào)控作用,以初步闡明其對(duì)胚胎植入的影響,所取得研究結(jié)果如下:1.Id3在小鼠早期妊娠模型中的表達(dá)模式應(yīng)用免疫組織化學(xué)、原位雜交、Western blot以及RT-qPCR檢測(cè)Id3在早孕小鼠模型中的表達(dá),結(jié)果顯示Id3高表達(dá)于子宮內(nèi)膜容受期形成階段(孕第四天),在胚胎著床后基質(zhì)細(xì)胞發(fā)生分化的蛻膜化子宮中表達(dá)較低,即在D5和D6著床旁的表達(dá)明顯高于著床點(diǎn)。檢測(cè)Id3在假孕小鼠模型中的表達(dá)規(guī)律,其表達(dá)與小鼠正常妊娠早孕期的表達(dá)模式相似,提示Id3在早孕期小鼠子宮內(nèi)膜的時(shí)空性表達(dá)并不依靠胚胎信號(hào)。在小鼠人工誘導(dǎo)蛻膜化模型中,Id3的表達(dá)在人工誘導(dǎo)蛻膜化后有所降低,進(jìn)一步提示Id3的表達(dá)下調(diào)與蛻膜化發(fā)生相關(guān)。結(jié)果表明Id3可能參與子宮內(nèi)膜細(xì)胞蛻膜化進(jìn)程。2.Id3對(duì)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化的調(diào)控作用分離小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞,進(jìn)行體外人工誘導(dǎo)蛻膜化以及過(guò)表達(dá)Id3基因,發(fā)現(xiàn)體外人工誘導(dǎo)蛻膜化可抑制Id3的表達(dá),且過(guò)表達(dá)Id3可以顯著抑制體外子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化的過(guò)程。3.Prdm1在小鼠早期妊娠模型的表達(dá)模式應(yīng)用免疫組織化學(xué)、Western blot以及RT-qPCR檢測(cè)Prdm1在早孕小鼠模型中的表達(dá),Prdm1在D1主要表達(dá)于腺上皮和腔上皮,D4表達(dá)于基質(zhì)細(xì)胞,在D5著床點(diǎn)主要表達(dá)于子宮內(nèi)膜初級(jí)蛻膜區(qū)(PDZ),在D6著床點(diǎn)和D8的表達(dá)逐漸轉(zhuǎn)向次級(jí)蛻膜區(qū)(SDZ)。且Prdm1的表達(dá)在D5、D6表達(dá)高于其它天,且在著床點(diǎn)的表達(dá)高于著床旁。在小鼠人工誘導(dǎo)蛻膜化模型中,Prdm1的表達(dá)在人工誘導(dǎo)蛻膜化升高,提示Prdm1的表達(dá)上調(diào)與蛻膜化發(fā)生相關(guān)。結(jié)果表明Prdm1可能參與子宮基質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)蛻膜化過(guò)程。4.Prdm1對(duì)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化的調(diào)控作用分離小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞,進(jìn)行體外人工誘導(dǎo)蛻膜化以及si RNA干擾Prdm1基因,發(fā)現(xiàn)Prdm1在體外人工誘導(dǎo)蛻膜化后表達(dá)升高,且干擾Prdm1可以顯著降低基質(zhì)細(xì)胞的增殖和分化來(lái)影響蛻膜化進(jìn)程。此外,抑制Prdm1的表達(dá)可以促進(jìn)Id3表達(dá)上調(diào)進(jìn)而抑制蛻膜化的進(jìn)程。我們的研究初步發(fā)現(xiàn)Id3可以抑制蛻膜化的過(guò)程;抑制Prdm1的表達(dá)可促進(jìn)Id3的表達(dá)上調(diào)進(jìn)而抑制蛻膜化的進(jìn)程。綜上所述,Id3可能參與調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化過(guò)程。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R714.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 李曉軍;汪萍;賈麗;;分化抑制因子3的表達(dá)調(diào)控機(jī)理及其功能[J];生命的化學(xué);2008年02期

本文編號(hào)：2731552