發(fā)布時間：2020-06-27 07:59

【摘要】：胚胎植入是指從卵子受精到胚泡著床的一系列細胞或分子生物學事件,是一個極其復雜的生理過程,主要包括游離胚泡定位、黏附和侵入以及胎盤形成,是一個連續(xù)的動力生物學現(xiàn)象,其中任何一個過程的缺陷都會導致不良的妊娠結(jié)局。子宮內(nèi)膜蛻膜化是指子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞在胚胎發(fā)生黏附反應(yīng)后、受到蛻膜化誘導因子的刺激,增生并分化形成的一種特殊組織,它對于妊娠的建立和維持具有至關(guān)重要作用。已有研究表明約20%的妊娠失敗與基質(zhì)細胞蛻膜化異常有關(guān)。子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞蛻膜化過程中,母體子宮內(nèi)膜受到一系列基因及信號通路的調(diào)控,從而基質(zhì)細胞發(fā)生廣泛的增殖與分化,以適應(yīng)胚胎的生長。而分化抑制因子3(Id3)作為細胞轉(zhuǎn)錄因子,在生物體內(nèi)廣泛表達,具有抑制分化、促進增殖的作用。課題組前期轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果顯示,Id3在人工誘導蛻膜化組織中的表達較對照組顯著降低,這提示Id3基因表達的降低可能與子宮內(nèi)膜蛻膜化的進展有密切聯(lián)系。先已知對多種細胞分化起關(guān)鍵調(diào)控作用的鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子1(Prdm1)與Id3相互作用參與多種生物學過程,但是Id3在小鼠子宮內(nèi)膜蛻膜化中的作用以及在胚胎植入過程中與Prdm1的相互作用均不清楚。因此本研究初步探究了Id3和Prdm1基因在早期妊娠和人工誘導蛻膜化模型小鼠的子宮內(nèi)膜中的表達模式,探索了Id3在小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞蛻膜化過程中的作用,以及借助體外人工誘導蛻膜化模型驗證Prdm1-Id3信號對子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞蛻膜化的調(diào)控作用,以初步闡明其對胚胎植入的影響,所取得研究結(jié)果如下:1.Id3在小鼠早期妊娠模型中的表達模式應(yīng)用免疫組織化學、原位雜交、Western blot以及RT-qPCR檢測Id3在早孕小鼠模型中的表達,結(jié)果顯示Id3高表達于子宮內(nèi)膜容受期形成階段(孕第四天),在胚胎著床后基質(zhì)細胞發(fā)生分化的蛻膜化子宮中表達較低,即在D5和D6著床旁的表達明顯高于著床點。檢測Id3在假孕小鼠模型中的表達規(guī)律,其表達與小鼠正常妊娠早孕期的表達模式相似,提示Id3在早孕期小鼠子宮內(nèi)膜的時空性表達并不依靠胚胎信號。在小鼠人工誘導蛻膜化模型中,Id3的表達在人工誘導蛻膜化后有所降低,進一步提示Id3的表達下調(diào)與蛻膜化發(fā)生相關(guān)。結(jié)果表明Id3可能參與子宮內(nèi)膜細胞蛻膜化進程。2.Id3對子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞蛻膜化的調(diào)控作用分離小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞,進行體外人工誘導蛻膜化以及過表達Id3基因,發(fā)現(xiàn)體外人工誘導蛻膜化可抑制Id3的表達,且過表達Id3可以顯著抑制體外子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞蛻膜化的過程。3.Prdm1在小鼠早期妊娠模型的表達模式應(yīng)用免疫組織化學、Western blot以及RT-qPCR檢測Prdm1在早孕小鼠模型中的表達,Prdm1在D1主要表達于腺上皮和腔上皮,D4表達于基質(zhì)細胞,在D5著床點主要表達于子宮內(nèi)膜初級蛻膜區(qū)(PDZ),在D6著床點和D8的表達逐漸轉(zhuǎn)向次級蛻膜區(qū)(SDZ)。且Prdm1的表達在D5、D6表達高于其它天,且在著床點的表達高于著床旁。在小鼠人工誘導蛻膜化模型中,Prdm1的表達在人工誘導蛻膜化升高,提示Prdm1的表達上調(diào)與蛻膜化發(fā)生相關(guān)。結(jié)果表明Prdm1可能參與子宮基質(zhì)細胞誘導蛻膜化過程。4.Prdm1對子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞蛻膜化的調(diào)控作用分離小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞,進行體外人工誘導蛻膜化以及si RNA干擾Prdm1基因,發(fā)現(xiàn)Prdm1在體外人工誘導蛻膜化后表達升高,且干擾Prdm1可以顯著降低基質(zhì)細胞的增殖和分化來影響蛻膜化進程。此外,抑制Prdm1的表達可以促進Id3表達上調(diào)進而抑制蛻膜化的進程。我們的研究初步發(fā)現(xiàn)Id3可以抑制蛻膜化的過程;抑制Prdm1的表達可促進Id3的表達上調(diào)進而抑制蛻膜化的進程。綜上所述,Id3可能參與調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞蛻膜化過程。
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R714.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 李曉軍;汪萍;賈麗;;分化抑制因子3的表達調(diào)控機理及其功能[J];生命的化學;2008年02期

本文編號：2731552