發(fā)布時(shí)間：2020-06-21 05:29

【摘要】：目的:宮頸癌是全球女性腫瘤相關(guān)死亡率排第四的惡性腫瘤。已有研究報(bào)道m(xù)icro RNAs(mi RNAs)通過調(diào)節(jié)基因表達(dá)在腫瘤進(jìn)程起多種生物學(xué)作用。因此,我們研究了mi R-708在宮頸癌中的生物學(xué)作用。方法:通過real-time PCR檢測(cè)宮頸癌組織及癌旁組織中mi R-708的表達(dá)水平。生信分析技術(shù)預(yù)測(cè)mi R-708與Timeless的相互關(guān)系,進(jìn)而通過雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)及Western Blot來驗(yàn)證。CCK-8及克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)mi R-708對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖和順鉑敏感性的影響。通過流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡變化。彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)mi R-708誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞DNA損傷水平的變化。DNA損傷修復(fù)相關(guān)通路中的基因蛋白水平變化由Western Blot檢測(cè)分析。結(jié)果:宮頸癌組織中mi R-708的表達(dá)水平顯著低于癌旁組織。生信分析技術(shù)、Western Blot及雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)都說明Timeless是mi R-708的靶基因。此外,在宮頸癌細(xì)胞中過表達(dá)mi R-708抑制細(xì)胞增殖及克隆形成能力,促進(jìn)凋亡,并進(jìn)一步提高DNA損傷水平。過表達(dá)mi R-708通過抑制DNA損傷修復(fù)相關(guān)的ATR/CHK1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路增加宮頸癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性。結(jié)論:過表達(dá)mi R-708通過抑制DNA損傷修復(fù)通路促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞順鉑敏感性。我們的研究結(jié)果說明,mi R-708可能為未來宮頸癌治療提供新的靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R737.33
【圖文】：

miR-708和Timeless在人宮頸癌組織中異常表達(dá)

miR-708對(duì)timeless內(nèi)源性表達(dá)的作用

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