【摘要】：目的:1、觀察不同劑量骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)的移植對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的療效;2、探討B(tài)MSCs自噬水平的變化對(duì)移植療效的影響,及BMSCs改善絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的可能作用機(jī)制。方法:80只雌性SD大鼠被隨機(jī)分為假手術(shù)組10只(Sham組)和去卵巢組70只。造模成功后,將70只去卵巢大鼠隨機(jī)分為單純?nèi)ヂ殉步M(OVX組)、雌激素組(E_2組)、低劑量BMSCs移植組(BMSCs 2×10~6 LS組)、中劑量BMSCs移植組(BMSCs4×10~6 MS組)、高劑量BMSCs移植組(BMSCs 6×10~6 HS組)、雷帕霉素干預(yù)組(Rapa+BMSCs 4×10~6 Rapa組)及3-MA干預(yù)組(3-MA+BMSCs 4×10~6 3-MA組),每組各10只。各BMSCs移植組分別給予對(duì)應(yīng)的BMSCs經(jīng)尾靜脈一次性移植入體內(nèi)。移植后2到4個(gè)月,,每個(gè)月均予雙能X線(xiàn)法測(cè)量骨密度。移植4個(gè)月后,提取每組的血清予ELISA法測(cè)量骨代謝標(biāo)志物,取雙側(cè)脛骨近端予HE染色觀察骨微結(jié)構(gòu)及形態(tài),取各組的BMSCs予茜素紅染色和油紅O染色比較各組BMSCs的成骨和成脂分化差異。結(jié)果:1、移植不同劑量BMSCs的研究:(1)全身骨密度檢測(cè)結(jié)果:各干細(xì)胞移植組的骨密度在干預(yù)后第二個(gè)月開(kāi)始升高。在同一個(gè)時(shí)間點(diǎn),各干細(xì)胞移植組的全身BMD均大于OVX組(P0.05),且隨著移植劑量的增多而增高;當(dāng)移植(6×10~6)BMSCs時(shí),其全身BMD與E_2組相當(dāng)。(2)脛骨近端HE染色結(jié)果:OVX組骨小梁稀疏,干細(xì)胞移植后,骨小梁占骨髓腔面積的比例隨移植劑量的增加而增加(P0.05);當(dāng)移植(6×10~6)BMSCs時(shí),其值與E_2組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3).血清骨代謝標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果:各BMSCs移植組的血清P1NP水平高于Sham組(P0.001)和OVX組(P0.001),且隨著B(niǎo)MSCs移植劑量的增多而增高;各BMSCs移植組的CTX均高于Sham組(P0.001)而低于OVX組(P0.05),隨著移植劑量的增高而減少。OVX組的CTX水平最高、P1NP水平最低。(4).分化潛能測(cè)定:BMSCs移植后,大鼠體內(nèi)的BMSCs成骨分化的潛能增強(qiáng)、成脂分化的潛能減弱。2.移植不同自噬水平BSMCs的研究:(1).全身骨密度檢測(cè)結(jié)果:Rapa組的全身BMD高于MS組及3-MA組(P0.05),而3-MA組的BMD低于Rapa組及MS組(P0.05)。(2).脛骨近端HE染色、結(jié)果:Rapa組的骨小梁占骨髓腔的比例高于MS組(P0.05)及3-MA組(P0.05),3-MA組的則低于MS組(P0.05)。(3).血清骨代謝標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果:Rapa組的P1NP高于MS組(P0.05)及3-MA組(P0.05),而3-MA組則低于MS組(P0.05)。Rapa組的的CTX低于MS組(P0.05)及3-MA組(P0.05),而3-MA組則高于MS組(P0.05)。(4).分化潛能測(cè)定:Rapa組的BMSCs與MS組及3-MA組相比較時(shí)其成骨分化潛能增強(qiáng)而成脂分化潛能減弱(P0.05)。3-MA組較MS組的成骨分化潛能減弱而成脂分化潛能增強(qiáng)。結(jié)論:1、移植BMSCs可以明顯地改善去卵巢大鼠的骨質(zhì)疏松,且隨著所移植BMSCs數(shù)量的增加可以獲得更好及更長(zhǎng)久的療效。2、BMSCs移植改善去卵巢大鼠的骨質(zhì)疏松的機(jī)制可能是以增加骨形成與降低骨吸收來(lái)起作用。3、干細(xì)胞移植后,其BMSCs成骨分化潛能增強(qiáng)而成脂分化潛能減弱。4、增強(qiáng)所移植BMSCs的自噬水平可以增強(qiáng)BMSCs移植治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松模型大鼠的療效,抑制移植前BMSCs的自噬水平則會(huì)減弱其療效。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R580;R711.75
【圖文】：

齊性檢驗(yàn)的資料采用 Kruskal-Wallis H 檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。P為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.結(jié)果3.1 去卵巢 3 個(gè)月后體重去卵巢手術(shù)前，Sham 組與 OVX 組兩組間的體重?zé)o明顯差異（P>0.05巢去除 3 個(gè)月后，Sham 組及 OVX 組兩者的體重均增加，但 Sham 組體重的增較于 OVX 組的體重明顯低，兩者差異明顯（P<0.001）。表 1.1.1 造模三個(gè)月后大鼠體重（單位：g）（ x±s）組別 例數(shù) 體重假手術(shù)組 10 324±30去卵巢組 70 411±20*

注：與 Sham 組比較，*P<0.0.01。Sham 組：假手術(shù)組 OVX 組：去卵巢組3.2 去卵巢 3 個(gè)月后兩組的全身骨密度去卵巢 3 個(gè)月后從 70 只去卵巢大鼠中隨機(jī)選取 10 只及假手術(shù)組 10 只測(cè)量其全身 BMD，去卵巢組大鼠的全身 BMD 明顯地低于 Sham 組 (P<0.001).表 1.1.2 干預(yù)前假手術(shù)組和去卵巢大鼠全身 BMD（g/cm2）（ x±s）組別 例數(shù) 全身 BMD假手術(shù)組 10 0.191±0.0040去卵巢大鼠 10 0.171±0.0026*

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 李明;呂厚辰;尹鵬濱;李瑞生;張里程;唐佩福;張立海;;兩種卵巢切除術(shù)式建立大鼠骨質(zhì)疏松模型的優(yōu)勢(shì)比較[J];解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年04期

2 Farbod Rastegar;Deana Shenaq;Eric R Wagner;Stephanie H Kim;Russell R Reid;Hue H Luu;Rex C Haydon;;Mesenchymal stem cells: Molecular characteristics and clinical applications[J];World Journal of Stem Cells;2010年04期

3 莊淑波;劉毅;陳克明;肖斌;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離、純化與培養(yǎng)適宜條件的篩選[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2007年20期

4 安沂華,王紅云,張相彤,劉暌,張亞卓,王忠誠(chéng);大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦出血的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2002年01期

本文編號(hào)：2720398