【摘要】：目的:多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一種內(nèi)分泌代謝疾病,主要特征是出現(xiàn)高雄激素血癥、排卵障礙以及胰島素抵抗。該癥狀最常見于育齡婦女,具體臨床表現(xiàn)為月經(jīng)稀發(fā)、閉經(jīng),婚后不孕,卵巢多囊樣等。綜合征發(fā)病時往往伴有肥胖、胰島素抵抗、血脂異常等情況,同時作為2型糖尿病、心腦血管病及子宮內(nèi)膜癌等疾病的高危誘因,一旦發(fā)病,將會對患者的正常生活產(chǎn)生非常嚴重的影響。然而,其詳細的發(fā)病機制至今仍不十分清楚。微小RNA(microRNA,miRNA)是一類具有基因調(diào)控功能的小RNA分子,一般通過作用于靶基因mRNA的3′非翻譯區(qū)(UTR)引起靶基因mRNA降解或翻譯受阻,起到負調(diào)控作用。近年來,越來越多的研究表明,差異表達的miRNA與PCOS的發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān)。本研究通過檢測PCOS患者血清中miR-93的表達量的變化,分析miR-93的變化與PCOS患者臨床特征的關(guān)系,探討miR-93在PCOS發(fā)生發(fā)展中的臨床意義;隨后又檢測了miR-93對人卵巢顆粒樣細胞系KGN細胞增殖的影響并鑒定了miR-93的直接靶基因,為進一步闡明PCOS可能的發(fā)病機制及其臨床診療提供新依據(jù)和新思路。方法:收集2014年12月-2015年12月經(jīng)病理確診的多囊卵巢綜合征患者血清25例為實驗研究組,同時收集卵巢功能正常者血清25例為實驗對照組。記錄患者的年齡、身高、體重、性激素六項(包括卵泡生成激素、黃體生成激素、雌二醇、孕酮、睪酮和催乳素)、胰島素、血糖等。采用SYBR GreenⅠ實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)法分別檢測兩組患者血清中miR-93的相對表達量,并分析miR-93與多囊卵巢綜合征臨床特征(高雄激素血癥、胰島素抵抗等)的關(guān)系。通過繪制受試者工作特征曲線ROC,計算曲線下面積(AUC)來評價miR-93診斷PCOS的價值。利用MTT和克隆形成實驗檢測人卵巢顆粒樣細胞系KGN細胞生長和增殖的變化;進一步利用生物信息學技術(shù)分析預(yù)測miR-93作用的靶基因,然后在人卵巢顆粒樣細胞系KGN利用雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CmiR-93的直接靶基因。采用SPSS17.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,當P0.05時表明差異具有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:通過對臨床資料進行回顧性分析,在PCOS患者中,體重指數(shù),黃體生成素、睪酮、胰島素和血糖水平均明顯高于卵巢功能正常對照者(P0.05)。與對照組相比,miR-93在多囊卵巢綜合征患者血清中的相對表達量明顯增加(Z=7.614,P0.01)。在對照組,miR-93的表達水平與睪酮、胰島素水平、胰島素抵抗指數(shù)的相關(guān)系數(shù)r值分別為0.03、0.42、0.39(P值分別為0.95、0.11、0.13);在實驗組,miR-93的表達水平與睪酮、胰島素水平、胰島素抵抗指數(shù)的相關(guān)系數(shù)r值分別為0.33、0.24、0.28(P值分別為0.09、0.41、0.47)。ROC曲線分析顯示,miR-93用于診斷多囊卵巢綜合征的AUC(ROC曲線下面積)值為0.73,敏感度為70%,特異度為78%,95%置信區(qū)間為[0.59-0.87]。封閉miR-93的表達后,人卵巢顆粒樣細胞系KGN細胞的生長增殖能力均明顯降低;而過表達miR-93后,細胞的生長增殖能力均明顯升高。熒光報告基因?qū)嶒灲Y(jié)果顯示,miR-93能夠識別并結(jié)合Ras相關(guān)蛋白基因(RAB5B)mRNA 3'UTR,抑制熒光素酶的活性;而對突變的RAB5B mRNA 3'UTR無作用。與對照組相比,在人卵巢顆粒樣細胞系KGN細胞中轉(zhuǎn)染miR-93 ASO后,RAB5B mRNA和蛋白水平均顯著增高;而轉(zhuǎn)染miR-93 mimics后,RAB5B mRNA和蛋白水平均顯著降低。結(jié)論:1.miR-93在多囊卵巢綜合征患者血清中異常高表達,且其表達水平與患者的胰島素、睪酮水平無關(guān)。2.miR-93用于診斷多囊卵巢綜合征準確度較高,可能對多囊卵巢綜合征的診斷有一定價值。3.miR-93可促進人卵巢顆粒樣細胞系KGN細胞的增殖。4.RAB5B是miR-93的直接靶基因并受其負調(diào)控。
【圖文】：

圖 1.1 miR-93 及 U6 snRNA 的溶解曲線1.2.3 實驗組與對照組患者血清中 miR-93 的表達兩組患者血清中均檢測出 miR-93 的表達。如表（1.2）所示，與正常對照組相比，miR-93 在多囊卵巢綜合征患者（PCOS 組）血清中的相對表達量明顯升高（P < 0.01），差異具有統(tǒng)計學意義。表 1.2 兩組患者血清中 miR-93 的相對表達量 M（P25, P75）項 目對照組（n=25）PCOS 組（n=25）Z PmiR-93 1.01(0.55,1.40) 2.70(2.10,3.15) 7.614 < 0.01P < 0.01 表示差異具有統(tǒng)計學意義1.2.4 兩組患者血清中 miR-93 的表達水平與睪酮、胰島素水平、胰島素抵抗指數(shù)的相關(guān)性分析在正常對照組，miR-93 的表達水平與睪酮、胰島素水平、胰島素抵抗指數(shù)

數(shù)0.390.13 0.28 R-93 診斷 PCOS 的 ROC 曲線分析，又稱為感受性曲線, 用于評價某種診斷指標的敏率（敏感度）為縱坐標，，假陽性率（1-特異度）為 曲線越靠近左上角和曲線下面積越大，診斷的準佳[18]。如圖（1.2）所示，以每個臨界點對應(yīng)的假陽縱坐標，繪制ROC曲線，miR-93用于診斷PCOS的.05 相比（AUC=0.05 時提示無診斷價值），差異具依次從圖（1.2）曲線上最左側(cè)的點選擇出正確診斷100％）最大的臨界點，此時相對應(yīng)的切點的真陽確診斷率最高。具體數(shù)值詳見表 1.4 及圖 1.2。表 1.4 血清 miR-93 的 ROC 曲線分析AUC 敏感度 (%) 特異度 (%) 0.73 70 78
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R711.75

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李娟;;飲食指導對多囊卵巢綜合征的影響[J];醫(yī)學理論與實踐;2017年24期

2 于小青;;多囊卵巢綜合征的致病因素與護理措施研究[J];實用婦科內(nèi)分泌雜志(電子版);2017年27期

3 馬金利;;多囊卵巢綜合征合并2型糖尿病臨床治療觀察[J];糖尿病新世界;2017年17期

4 孫迪;李蓉;;慢性非特異性炎癥在多囊卵巢綜合征發(fā)病作用中的研究進展[J];中國婦產(chǎn)科臨床雜志;2018年02期

5 王麗娜;;卵巢多囊樣改變就是多囊卵巢綜合征嗎[J];江蘇衛(wèi)生保健;2018年01期

6 徐淑杰;;多囊卵巢綜合征的中西醫(yī)研究進展[J];世界最新醫(yī)學信息文摘;2018年16期

7 高輝;;多囊卵巢綜合征患者的護理干預(yù)效果評價[J];中國醫(yī)藥指南;2018年09期

8 孫璐璐;;用經(jīng)陰道彩色多普勒超聲檢查診斷多囊卵巢綜合征的價值研究[J];當代醫(yī)藥論叢;2018年03期

9 薛藝青;朱鴻秋;;多囊卵巢綜合征伴焦慮抑郁的臨床研究評述[J];世界最新醫(yī)學信息文摘;2018年43期

10 蔡海容;;中醫(yī)藥治療多囊卵巢綜合征不孕癥治療的進展及優(yōu)勢[J];實用婦科內(nèi)分泌雜志(電子版);2018年11期

相關(guān)會議論文 前10條

1 包敏;;“多囊卵巢綜合征”無需談之色變[A];廣州市第十屆健康教育學術(shù)交流會文集[C];2016年

2 戴蓓蓓;周毓青;張玨華;邱冬;趙蔚;;不同臨床表型的多囊卵巢綜合征患者的三維超聲特征分析[A];第二屆長三角超聲醫(yī)學論壇暨2009年浙江省超聲醫(yī)學學術(shù)年會論文匯編[C];2009年

3 賈莉婷;榮守華;李肖甫;孫琳;;來曲唑誘導多囊卵巢綜合征大鼠模型的實驗研究[A];中華醫(yī)學會第八次全國檢驗醫(yī)學學術(shù)會議暨中華醫(yī)學會檢驗分會成立30周年慶典大會資料匯編[C];2009年

4 管群;曲軍衛(wèi);吳效科;王勇;侯麗輝;曲軍衛(wèi);王勇;許培;金佳麗;;不同表型的多囊卵巢綜合征患者雄激素代謝的差異研究[A];第四屆長三角婦產(chǎn)科學術(shù)論壇暨浙江省2009年婦產(chǎn)科學術(shù)年會論文匯編[C];2009年

5 趙淑云;;多囊卵巢綜合征[A];貴州省生殖醫(yī)學與遺傳學分會2010年第二屆年會論文集[C];2010年

6 孫立業(yè);劉娟;孫博;毛璇;胡衛(wèi)紅;顏賢忠;;多囊卵巢綜合征患者血漿代謝變化的研究[A];第十六屆全國波譜學學術(shù)會議論文摘要集[C];2010年

7 高玲玲;張園;崔毓桂;劉嘉茵;;脂連素基因多態(tài)性與多囊卵巢綜合征關(guān)聯(lián)的薈萃分析[A];中華醫(yī)學會第三次全國絕經(jīng)學術(shù)會議暨絕經(jīng)相關(guān)問題學習班論文匯編[C];2011年

8 劉建英;;多囊卵巢綜合征的診斷與治療[A];江西省首屆中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌專業(yè)學術(shù)交流會論文資料匯編[C];2010年

9 朱依敏;;多囊卵巢綜合征的診治進展[A];2011年浙江省婦產(chǎn)科學學術(shù)年會暨“婦產(chǎn)科常見疾病的臨床研究新進展”學習班論文匯編[C];2011年

10 姚瑤;胡永芳;;1例多囊卵巢綜合征不孕患者的藥學監(jiān)護[A];第三屆全國婦產(chǎn)科藥學大會論文集[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 記者 衣曉峰;多囊卵巢綜合征診治有新思路[N];健康報;2018年

2 沈?qū)?中國中醫(yī)科學院針灸醫(yī)院;多囊卵巢綜合征治療策略[N];中國中醫(yī)藥報;2018年

3 復旦大學附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院 俞瑾;以“女性生命網(wǎng)絡(luò)調(diào)控觀”診治多囊卵巢綜合征[N];中國中醫(yī)藥報;2016年

4 廣東省第二人民醫(yī)院主任醫(yī)師 傅曉英;數(shù)據(jù)在左 邏輯在右[N];健康報;2017年

5 河南中醫(yī)藥大學 謝文英;保胎湯治多囊卵巢綜合征繼發(fā)不孕體會[N];中國中醫(yī)藥報;2017年

6 北京朝陽醫(yī)院 劉姍 李媛 特約記者 楊舒玲 整理;如何幫“多囊”女性懷上寶寶[N];健康報;2017年

7 本報記者 衣曉峰 通訊員 陳京京;對抗多囊卵巢綜合征 緩解不孕不育[N];健康報;2017年

8 通訊員 衣曉峰 陳京京 記者 李麗云;兩項重大成果破解多囊卵巢綜合征難題[N];科技日報;2017年

9 北京朝陽醫(yī)院生殖醫(yī)學中心主任醫(yī)師 李媛;多囊卵巢綜合征遠期治療瞄準并發(fā)癥[N];健康報;2016年

10 衣曉峰;不孕癥女士：你對多囊卵巢綜合征了解多少[N];中國醫(yī)藥報;2016年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 林圣朝（Scott Ling）;加味五苓散聯(lián)合針灸對腎虛痰瘀型多巢綜合征的臨床療效觀察[D];廣州中醫(yī)藥大學;2017年

2 李沖;艾塞那肽聯(lián)合二甲雙胍對多囊卵巢綜合征的干預(yù)作用[D];鄭州大學;2017年

3 劉艷巧;劉潤俠教授治療多囊卵巢綜合征不孕的學術(shù)思想和臨床經(jīng)驗研究[D];中國中醫(yī)科學院;2012年

4 石玉華;中國人多囊卵巢綜合征相關(guān)因素系列研究[D];山東大學;2004年

5 桑霞;疏肝瀉火法治療多囊卵巢綜合征的臨床及實驗研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2005年

6 陸秀娥;多囊卵巢綜合征患者顆粒細胞AQP9、RESISTIN表達及對體外受精結(jié)局的影響[D];浙江大學;2006年

7 陳友國;脂聯(lián)素在多囊卵巢綜合征及其脂代謝中的作用[D];蘇州大學;2006年

8 趙君利;多囊卵巢綜合征的流行病學調(diào)查及相關(guān)基礎(chǔ)研究[D];山東大學;2006年

9 李昕;PPARγ及apM1基因多態(tài)性與多囊卵巢綜合征肥胖異質(zhì)性的相關(guān)研究[D];復旦大學;2006年

10 陳鑫;睪酮對多囊卵巢綜合征胰島素抵抗形成的影響及其分子機制的探討[D];復旦大學;2006年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 陳嘉欣;針刺結(jié)合穴位埋線治療多囊卵巢綜合征的臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2018年

2 蔡爾友;蒼附導痰湯加減結(jié)合針刺治療對痰瘀型多囊卵巢綜合征的臨床觀察[D];廣州中醫(yī)藥大學;2018年

3 彭紹嬋;針刺聯(lián)合LE+Gn治療克羅米芬不敏感型多囊卵巢綜合征不孕婦女的療效觀察[D];廣州中醫(yī)藥大學;2018年

4 周道成;荷芪散治療多囊卵巢綜合征胰島素抵抗的臨床及實驗研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2017年

5 閆曉麗;菟絲子總黃酮對大鼠多囊卵巢綜合征模型的影響[D];河南中醫(yī)藥大學;2018年

6 湯星月;養(yǎng)精導痰湯聯(lián)合達英-35治療腎虛痰濕型多囊卵巢綜合征的臨床觀察[D];安徽中醫(yī)藥大學;2018年

7 任筱霞;滋陰清熱法聯(lián)合二甲雙胍治療多囊卵巢綜合征伴胰島素抵抗臨床觀察[D];河南中醫(yī)藥大學;2018年

8 李英;miR-93在PCOS患者血清中的表達及臨床意義[D];天津醫(yī)科大學;2018年

9 林婉珊;“調(diào)任通督針刺法”對腎陽虛型多囊卵巢綜合征不孕癥的臨床療效觀察[D];廣州中醫(yī)藥大學;2017年

10 欒鑫;多囊卵巢綜合征患者及其父母代謝異常的回顧性分析[D];山東大學;2018年

本文編號：2707180