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維生素D干預(yù)早產(chǎn)大鼠對(duì)體內(nèi)Th17、Treg炎癥因子的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-05-26 06:44
【摘要】:研究目的:早產(chǎn)是產(chǎn)科疾病中比較常見(jiàn)的妊娠并發(fā)癥之一,引起早產(chǎn)的因素有很多,其中炎癥導(dǎo)致早產(chǎn)現(xiàn)象最為明顯,之前很多研究證實(shí)早產(chǎn)患者血液、母胎界面、陰道以及羊水中等炎癥因子明顯增多,研究較多的是Th1/Th2炎癥軸,而近些年來(lái)Th17/Treg炎癥軸研究卻成為熱點(diǎn),特別是在不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)疾病中研究中成為經(jīng)典,除此之外,也已被證實(shí)在早產(chǎn)及其他妊娠疾病中發(fā)揮重要的作用。維生素D是一種脂溶性的微量元素,其在骨骼發(fā)育、支氣管哮喘、肺癌、肥胖、2型糖尿病中發(fā)揮一定的作用,研究顯示維生素D具有激素抗炎的作用,相關(guān)文獻(xiàn)也證實(shí)了對(duì)炎癥因子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β1)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)具有拮抗作用,而Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞也可產(chǎn)生這兩種炎癥因子,但是在早產(chǎn)的作用研究中還未深入。維生素D結(jié)合蛋白(VDBP)是游離維生素D的載體,還可以參與免疫反應(yīng)以及病毒感染。本研究以SD大鼠為研究對(duì)象,通過(guò)培養(yǎng)動(dòng)物使其交配受孕,然后藥物干預(yù),脂多糖誘導(dǎo)早產(chǎn)建立早產(chǎn)模型,探討維生素D和維生素D結(jié)合蛋白與TGF-β1、TNF-α炎癥因子之間的關(guān)系,為早產(chǎn)治療提供新的思路。研究方法:清潔級(jí)SD大鼠,9只健康雌性大鼠,體重大概在350g/只,周齡在12周左右,雄性大鼠5只,周齡在15周左右,體重大概500g/只,所有的大鼠都是健康的,并且具有生育的能力。雌鼠和雄鼠都自由進(jìn)食廣西醫(yī)科大學(xué)提供的大鼠飼料,室溫保持在為19-26攝氏度之間,平均濕度保持在54-66%左右,雌鼠和雄鼠按照2:1的比例在夜間進(jìn)行合籠,記錄合籠時(shí)間,在第二日清晨清晨進(jìn)行雌鼠陰道涂片,若陰道涂片于40倍光學(xué)顯微鏡下能夠觀察到大量精子的雌鼠則作為受孕第一天,若肉眼發(fā)現(xiàn)陰栓也為受孕成功。所有受孕雌鼠記錄好孕周,隨機(jī)分成三組:正常妊娠組(空白組)、模型組(LPS組)、實(shí)驗(yàn)組(維生素D+LPS組),孕第8天時(shí),給予實(shí)驗(yàn)組喂養(yǎng)維生素D600單位/天~([1]),喂養(yǎng)7天,孕第15天時(shí),給予模型組和實(shí)驗(yàn)組腹腔注射400ug/kg~([2])劑量的LPS。用HE染色顯微鏡下觀察大鼠胎盤的炎癥變化,ELISA法檢測(cè)各組孕鼠體內(nèi)TGF-β1、TNF-α、維生素D結(jié)合蛋白的變化。研究結(jié)果:模型組和實(shí)驗(yàn)組全部出現(xiàn)陰道流血而發(fā)生早產(chǎn),模型組胎盤HE染色炎癥程度明顯重于正常妊娠組,實(shí)驗(yàn)組胎盤炎癥程度介于正常組和模型組之間;ELISA結(jié)果:血清中,正常組的TGF-β1含量高于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);羊水中,正常組的TNF-α含量低于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),實(shí)驗(yàn)組的TNF-α含量低于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型組的維生素D結(jié)合蛋白比正常組的高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),實(shí)驗(yàn)組的維生素D結(jié)合蛋白低于模型組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究結(jié)論:1.感染性早產(chǎn)大鼠較正常妊娠大鼠體內(nèi)TGF-β炎癥因子相對(duì)減少,TNF-α炎癥因子相對(duì)增加。2.添加了維生素D,早產(chǎn)大鼠體內(nèi)TNF-α炎癥因子會(huì)相對(duì)減少,這樣提示維生素D對(duì)感染性早產(chǎn)可能具有一定的保護(hù)作用。3.感染性早產(chǎn)模型孕鼠中VDBP水平明顯增高,高濃度的維生素D結(jié)合蛋白與早產(chǎn)呈正相關(guān),檢測(cè)VDBP水平可能會(huì)對(duì)早產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)篩查有幫助。4.補(bǔ)充維生素D可能與更多VDBP相結(jié)合,降低其水平,從而抑制其對(duì)中性粒細(xì)胞的趨化活性。
【圖文】:

血清,羊水,實(shí)驗(yàn)組


圖 5-2 血清中 TGF-β1 含量的比較 圖 5-3 羊水中 TNF-α含量的比較Fig5-2 Comparison of the content of TGF-β1in Serum Fig5-3 Comparison of the content of TNF-anin the amniotic fluid注:正常組與模型組相比,P<0.05 注:模型組與正常組相比、實(shí)驗(yàn)組與模相比,P<0.05圖 5-4 羊水中 VDBP 含量的比較Fig5-4 comparison of VDBP content in amniotic fluid注:模型組與正常組相比,P<0.05

羊水,血清,實(shí)驗(yàn)組


圖 5-2 血清中 TGF-β1 含量的比較 圖 5-3 羊水中 TNF-α含量的比較Fig5-2 Comparison of the content of TGF-β1in Serum Fig5-3 Comparison of the content of TNF-anin the amniotic fluid注:正常組與模型組相比,P<0.05 注:模型組與正常組相比、實(shí)驗(yàn)組與模相比,P<0.05圖 5-4 羊水中 VDBP 含量的比較Fig5-4 comparison of VDBP content in amniotic fluid注:模型組與正常組相比,,P<0.05
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R714.21

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