發(fā)布時間：2020-05-22 01:52

【摘要】：目的:1.通過Meta分析評價(jià)中重度宮腔粘連(intrauterine adhesion,IUA)宮腔鏡下粘連帶電切術(shù)(transcervical resection of adhesion,TCRA)術(shù)后應(yīng)用球囊及節(jié)育器預(yù)防復(fù)發(fā)的有效性,以期為TCRA術(shù)后選用合適的治療方法提供循證學(xué)依據(jù)。2.建立人早孕蛻膜間充質(zhì)干細(xì)胞(human decidual mesenchymal stem cells,hDMSCs)氧化應(yīng)激模型,模擬宮腔粘連損傷,通過觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)、細(xì)胞活性氧水平、線粒體膜電位及凋亡相關(guān)蛋白的變化,探討氧化應(yīng)激條件下hDMSCs損傷機(jī)制。方法:1.搜索公開發(fā)表的關(guān)于中重度宮腔粘連TCRA術(shù)后使用球囊及節(jié)育器治療的文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析,計(jì)算機(jī)檢索數(shù)據(jù)庫,時間為2010年1月至2017年9月的中/英文公開發(fā)表的研究。制訂納入及排除標(biāo)準(zhǔn),對文獻(xiàn)進(jìn)行嚴(yán)格篩選,所有數(shù)據(jù)采用Revman 5.2統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,并使用森林圖和漏斗圖分析結(jié)果。2.以過氧化氫模擬宮腔粘連環(huán)境,建立hDMSCs體外氧化應(yīng)激模型。分別以0μM、10μM、40μM、80μM、160μM、320μM的過氧化氫溶液作用于P3代hDMSCs,6小時后,觀察其細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變、氧化及抗氧化指標(biāo)、線粒體膜電位變化及凋亡相關(guān)蛋白相對量的變化。結(jié)果:1.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)排除,納入的文獻(xiàn)有15篇。中重度宮腔粘連宮腔鏡粘連分離術(shù)后進(jìn)行球囊和節(jié)育環(huán)治療的總共有1389例,使用球囊和節(jié)育環(huán)預(yù)防術(shù)后再粘連分別為698例和691例。Meta分析發(fā)現(xiàn):(1)15個研究比較了術(shù)后再粘連情況,宮腔鏡粘連分離術(shù)后節(jié)育環(huán)組再粘連發(fā)生率高于球囊組,組間比較差異有顯著性(Z=5.83,OR 0.46,95%CI 0.36~0.60,P0.00001),(2)3個研究比較了兩組的術(shù)后再妊娠率,宮腔鏡粘連分離術(shù)后節(jié)育環(huán)組與球囊組術(shù)后再妊娠率比較,組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=1.34,OR 1.56,95%CI 0.82~2.96,P=0.18)。(3)10篇文獻(xiàn)報(bào)道了術(shù)后月經(jīng)改善率,宮腔鏡粘連分離術(shù)后球囊組月經(jīng)改善率高于節(jié)育環(huán)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=6.83,OR 3.23,95%CI 2.31~4.53,P0.00001)。2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變:正常的hDMSCs為梭形貼壁細(xì)胞;10μM H_2O_2處理6小時候后,細(xì)胞尚保持原有梭形外觀,但細(xì)胞輕度腫脹,密度輕度下降;隨著H_2O_2濃度的增加,細(xì)胞漸進(jìn)性皺縮并密度降低,可見凋亡細(xì)胞,并出現(xiàn)細(xì)胞碎裂現(xiàn)象。3.氧化與抗氧化能力變化:超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)酶活力隨著過氧化氫濃度的增加而降低,二者呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r_s=-0.904,P=0.035),各濃度組細(xì)胞SOD酶活力與對照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);谷胱甘肽濃度隨著過氧化氫濃度增加而降低,二者呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r_s=-0.975,P=0.05),各濃度組細(xì)胞谷胱甘肽濃度與對照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);丙二醛(Malondialdehyde,MDA)濃度隨著過氧化氫濃度增加而升高,二者呈正相關(guān)關(guān)系(r_s=0.975,P=0.005),各濃度組細(xì)胞MDA濃度與對照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);酶標(biāo)儀顯示細(xì)胞內(nèi)ROS的平均熒光值隨H_2O_2濃度的增加而增加,各濃度組細(xì)胞與空白組比較,ROS的平均熒光值升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。4.線粒體膜電位變化:與空白對照組相比,10μM組紅綠熒光比率無明顯變化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);余四個濃度組細(xì)胞與空白組比較,線粒體膜電位降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。除80μM組與160μM組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余不同濃度組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.各組PARP-1蛋白相對表達(dá)量均數(shù)由高到低依次為320μM組(1.004)、160μM組(0.959)、80μM組(0.740)、40μM組(0.406)、10μM組(0.211)、空白對照組(0.150)。各實(shí)驗(yàn)組與對照組相比,10μM組無顯著性差異(P=0.154),其余4組均有顯著性差異,五個實(shí)驗(yàn)組之間,除320μM組與160μM組之間差異無顯著性差異(P=0.282)外,余各實(shí)驗(yàn)組間均有顯著性差異。各組Caspase-3蛋白相對表達(dá)量均數(shù)由高到低依次為320μM組(0.973)、160μM組(0.730)、80μM組(0.620)、40μM組(0.096)、10μM組(0.092)、空白對照組(0.003)。各實(shí)驗(yàn)組與對照組相相比均有顯著性差異,五個實(shí)驗(yàn)組之間,除10μM組與40μM組之間差異無顯著性差異(P=0.895)外,余各實(shí)驗(yàn)組間比較均有顯著性差異。結(jié)論1.與宮內(nèi)節(jié)育器相比,TCRA術(shù)后放置球囊可明顯降低中重度宮腔粘連再粘連率及月經(jīng)減少發(fā)生率,但對于術(shù)后再妊娠率無明顯改善。2.在過氧化氫模擬的宮腔粘連環(huán)境中,活性氧介導(dǎo)的線粒體膜電位降低參與氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的hDMSCs凋亡,活性氧有望成為優(yōu)化hDMSCs臨床效能的治療靶點(diǎn)。
【圖文】：

文獻(xiàn)篩選和納入流程圖

⑥失訪人數(shù)大于 15%的研究。以下為文獻(xiàn)篩選和納入流程圖 如圖 1圖 1 文獻(xiàn)篩選和納入流程圖2.4 文獻(xiàn)質(zhì)量評價(jià)2.4.1 偏倚風(fēng)險(xiǎn)評估 2 位評價(jià)員嚴(yán)格按照偏倚風(fēng)險(xiǎn)評估標(biāo)準(zhǔn)對各自評估納入的研究，從表1 評價(jià)條目對檢索文獻(xiàn)進(jìn)行評價(jià)及判斷，，判斷其偏倚來源。不一致處和第 3 位評價(jià)員一起討論后達(dá)成共識。2.4.2 資料提取 文獻(xiàn)由 2 名獨(dú)立研究人員進(jìn)行評價(jià),，具體檢查及評價(jià)項(xiàng)目及細(xì)節(jié)見表 2。對同一研究及所有納入研究的結(jié)局指標(biāo)進(jìn)行逐個判斷，評價(jià)其風(fēng)險(xiǎn)高低。偏倚風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)依據(jù)如表 4 所示：表 2 納入文獻(xiàn)資料提取標(biāo)準(zhǔn)表檢查及評價(jià)項(xiàng)目 資料提取細(xì)節(jié)篩選文獻(xiàn) 2 名研究員各自獨(dú)立審查和確定納入及排除文獻(xiàn)；評定文獻(xiàn)質(zhì)量，剔除低質(zhì)量文獻(xiàn)并確定納入文獻(xiàn)。意見分歧處理 根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行討論并達(dá)成一致后決定文獻(xiàn)的納入或排除
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R713.4

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本文編號：2675263