miR-203調(diào)控ΔNP63對(duì)宮頸癌細(xì)胞株生物學(xué)特性的影響及作用機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2017-03-25 17:06
本文關(guān)鍵詞:miR-203調(diào)控ΔNP63對(duì)宮頸癌細(xì)胞株生物學(xué)特性的影響及作用機(jī)制研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:探究mi RNA-203和ΔNp63二者的功能關(guān)系,進(jìn)一步明確mi RNA-203能否通過調(diào)控ΔNp63影響宮頸癌細(xì)胞的生物學(xué)行為,以揭示mi R-203參與宮頸癌變的作用機(jī)制。方法:1.應(yīng)用靶基因預(yù)測網(wǎng)站,明確mi RNA-203與ΔNp63的靶向關(guān)系。2.在宮頸癌細(xì)胞株Caski和C33A中,利用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)過表達(dá)或沉默mi R-203,采用RT-PCR法定量檢測mi R-203的表達(dá)并對(duì)轉(zhuǎn)染效果進(jìn)行驗(yàn)證。3.在mi R-203過表達(dá)或沉默的Caski和C33A細(xì)胞中,采用CCK-8法、流式細(xì)胞檢測法、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的生物學(xué)行為進(jìn)行檢測。4.在mi R-203過表達(dá)或沉默的Caski和C33A細(xì)胞中,采用westem blot法對(duì)ΔNp63蛋白進(jìn)行檢測,進(jìn)而研究mi R-203通過調(diào)控ΔNp63對(duì)宮頸癌細(xì)胞的作用機(jī)制。結(jié)果:1.通過生物信息學(xué)靶基因預(yù)測網(wǎng)站ΔNp63被預(yù)測為mi R-203的一個(gè)靶點(diǎn),mi R-203可以與ΔNp63的m RNA 3′UTR高度結(jié)合。2.在HPV16陽性的宮頸癌細(xì)胞Caski和HPV16陰性的宮頸癌細(xì)胞C33A中成功轉(zhuǎn)染mi R-203 mimics和mi R-203 inhibitor。3.過表達(dá)或沉默mi R-203對(duì)宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響:過表達(dá)mi R-203可抑制Caski和C33A細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、延緩細(xì)胞遷移;而沉默mi R-203可加快Caski和C33A細(xì)胞增殖、延緩細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞遷移。4.mi R-203與ΔNp63的關(guān)系:在mi R-203 mimics轉(zhuǎn)染的Caski和C33A細(xì)胞中,mi R-203表達(dá)明顯升高,ΔNp63蛋白表達(dá)明顯下降;而在mi R-203 inhibitor轉(zhuǎn)染的Caski和C33A細(xì)胞中,mi R-203表達(dá)降低,ΔNp63表達(dá)升高。結(jié)論:1.在宮頸癌細(xì)胞中,mi R-203過表達(dá)可抑制細(xì)胞增殖和遷移、促進(jìn)細(xì)胞凋亡;而沉默mi R-203可促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移、延緩細(xì)胞凋亡。提示mi R-203能夠影響Caski和C33A細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的生物學(xué)行為。2.過表達(dá)mi R-203可下調(diào)ΔNp63的表達(dá),沉默mi R-203可上調(diào)ΔNp63的表達(dá)。ΔNp63可能是mi R-203的負(fù)調(diào)控靶基因,mi R-203可能通過調(diào)控ΔNp63發(fā)揮抑癌作用。
【關(guān)鍵詞】:宮頸癌 miR-203 ΔNp63 microRNA
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R737.33
【目錄】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 常用縮寫詞中英文對(duì)照表9-10
- 前言10-12
- 1 材料與方法12-28
- 1.1 材料12-15
- 1.2 實(shí)驗(yàn)方法15-26
- 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法26-28
- 2 結(jié)果28-38
- 2.1 miR-203 與ΔNP63 的靶向關(guān)系28
- 2.2 Caski和C33A細(xì)胞成功轉(zhuǎn)染miR-203 模擬物及抑制物28-29
- 2.3 轉(zhuǎn)染48小時(shí)后Caski和C33A細(xì)胞miR-203 的表達(dá)量29-31
- 2.4 miR-203 對(duì)Caski和C33A細(xì)胞增殖能力的影響31-33
- 2.5 miR-203 對(duì)Caski和C33A細(xì)胞凋亡能力的影響33-35
- 2.6 miR-203 對(duì)Caski和C33A細(xì)胞遷移能力的影響35-36
- 2.7 轉(zhuǎn)染72小時(shí)后Caski和C33A細(xì)胞ΔNP63 的表達(dá)水平36-38
- 3 討論38-41
- 4 結(jié)論41-42
- 參考文獻(xiàn)42-44
- 綜述44-53
- 參考文獻(xiàn)50-53
- 致謝53-54
- 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果54-55
- 個(gè)人簡歷55
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 楊君;王彬;周德平;張軒珍;李云霞;;P16、△NP63在宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌組織中的表達(dá)及相關(guān)性研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2009年24期
2 敬鵬;吳小候;羅春麗;陳剛;何云峰;;ΔNp63基因?qū)CCB 5637細(xì)胞侵襲作用的影響[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年04期
本文關(guān)鍵詞:miR-203調(diào)控ΔNP63對(duì)宮頸癌細(xì)胞株生物學(xué)特性的影響及作用機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):267499
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