【摘要】：目的:研究去乙酰化酶3(Sirtuin 3,Sirt3)在正常妊娠(Normal control,NC)與子癇前期(Pre-eclampsia,PE)胎盤組織中的表達水平,以及它對滋養(yǎng)細胞凋亡功能的影響,探討其影響是否和子癇前期的發(fā)病相關(guān)。方法:收集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院產(chǎn)科剖宮產(chǎn)分娩的子癇前期和正常妊娠的胎盤組織樣本各12列,收集時間為2016年09月至2017年03月。應(yīng)用免疫熒光(Immunofluorescence,IF)及蛋白質(zhì)印跡(Western blot,WB)檢測正常妊娠和子癇前期孕婦胎盤組織中Sirt3蛋白的表達。再使用慢病毒(Lentivirus,LV)敲低早孕人絨毛外滋養(yǎng)細胞株(HTR8/SVneo Cell Line)的Sirt3。ATP試劑盒檢測HTR8/SVneo細胞的ATP產(chǎn)生情況,了解線粒體產(chǎn)能狀態(tài);然后通過流式細胞技術(shù)(FCM)及CCK-8實驗等檢測HTR8/SVneo細胞的凋亡情況;WB檢測active capase-3、IL-1β、MMP2等蛋白的表達水平。結(jié)果:與正常妊娠胎盤組織比較,Sirt3在子癇前期胎盤組織中的表達明顯降低,敲低Sirt3后HTR8/SVneo細胞的ATP產(chǎn)生減少,線粒體產(chǎn)能障礙,促使滋養(yǎng)細胞凋亡和炎癥因子明顯增加,以及和侵襲相關(guān)的蛋白表達下調(diào)。結(jié)論:Sirt3表達降低導(dǎo)致滋養(yǎng)細胞凋亡增加,可能在子癇前期的發(fā)病中起到一定的作用。
【圖文】：

14 PE 組中 Sirt3 的熒光相對表達量(n=3，**p=0orescence of Sirt3 in NC and PE group(n=3，** 1. Sirt3 在胎盤組織中的熒光表達情況(a.b) 1. Fluorescence expression of Sirt3 in placenta (

圖 3. Sirt3 在 HTR8/SVneo 細胞中的表達情況（n=3，**p＜0.0001） 3. Expression of Sirt3 in Vehicle group and LV-Sirt3 group（n=3，**p＜0.0001）表 2.Vehicle 組和 LV-Sirt3 組中 Sirt3 的平均吸光度值（x±s）Table 2 .Mean absorbance of Sirt3 in Vehicle and LV-Sirt3 group(x±s)Sirt3 表達水平 組 1.238 ± 0.022633 組 0.09169±0.0206037.45＜0.0001R8/SVneo 細胞 的 ATP 生成情況顯示，敲低 Sirt3 后，HTR8/SVneo 細胞線粒體的產(chǎn)能能力受損，，ATP差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（n=3，t=3.482，p=0.0253），如圖 4，表 3 所示：
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R714.244

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本文編號：2666706