【摘要】：目的:1.檢測BRAP(BRCA1 associated protein)在慢性宮頸炎(chronic cervicitis)、宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宮頸鱗癌(Cervical squamous cell carcinoma,CSCC)中的表達情況。2.結合臨床病理特征資料,分析BRAP的表達與臨床病理特征的關系,為宮頸癌的臨床診斷、治療及判斷預后提供理論依據(jù)。方法:1.實驗標本取自2016年9月-2017年9月在我院(山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院)婦產(chǎn)科行陰道鏡活檢、宮頸錐切術、子宮全切術的90例宮頸組織標本。經(jīng)過我院病理醫(yī)師檢查證實,LSIL、HSIL、CSCC各30例,根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)合會(FIGO)2009修訂的宮頸癌臨床分期:I期11例,IIa期19例;宮頸癌組織學分級:高中分化16例,低分化14例;有淋巴結轉移5例,無淋巴結轉移25例;患者年齡28-69歲,平均年齡48歲,其中48歲18例,≥48歲12例;另外選取同期因子宮肌瘤、子宮腺肌癥、子宮脫垂等良性病變切除的慢性宮頸炎30例作為對照。2.采用qRT-PCR(SYBR Green法)檢測BRAP mRNA在不同宮頸病變組織中的表達,以GAPDH為參照,采用公式2~(-△△Ct)計算各組BRAP mRNA的相對表達量。3.采用Western-blot法檢測BRAP蛋白表達情況。4.收集120例患者臨床病理特征(患者年齡、腫瘤最大直徑、組織分化程度、臨床分期、是否有淋巴結轉移),分析BRAP的表達與臨床病理特征的關系。5.采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件對所得數(shù)據(jù)進行分析,BRAP相對表達量采用均數(shù)±標準差(?X+S),不同宮頸病變組間差異性的比較采用one-way ANOVA檢驗;宮頸癌中BRAP的表達量與各臨床病理特征之間的關系比較采用Two-sample t-test;P0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。結果:1.實時熒光定量PCR結果顯示:BRAP mRNA在慢性宮頸炎、LSIL、HSIL、CSCC中均有表達,其中CSCC組BRAP mRNA的表達量高于慢性宮頸炎組的3倍,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);LSIL組、HSIL組分別與慢性宮頸炎組相比BRAP mRNA表達量較高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);LSIL組BRAP mRNA的表達量低于HSIL組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);LSIL組、HSIL組分別與CSCC組相比表達量較低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.Western-blot結果顯示:BRAP蛋白在慢性宮頸炎、LSIL、HSIL、CSCC中均有表達,其中CSCC組BRAP蛋白的表達量高于慢性宮頸炎組的3倍,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);LSIL組、HSIL組分別與慢性宮頸炎組相比BRAP蛋白表達量較高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);LSIL組BRAP蛋白的表達量低于HSIL組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);LSIL組、HSIL組分別與CSCC組相比表達較低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.BRAP在年齡48歲和≥48歲組中表達量為(2.90±0.17;3.01±0.23),差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05);在腫瘤直徑大小≤4cm和4cm組中表達量為(3.01±0.23;3.51±0.22),差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);在不同組織分化程度中的表達分別是高/中分化組(2.33±0.09)、低分化組(3.48±0.15),差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);在臨床分期中的表達分別是I期(2.32±0.11)、IIa期(3.30±0.16),差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);在是否有淋巴結轉移組中的表達分別為有(2.67±0.13)、無(3.68±0.22),差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1.BRAP mRNA及蛋白在慢性宮頸炎、LSIL、HSIL、CSCC中均有表達,且表達水平呈現(xiàn)逐漸增高的趨勢。2.BRAP的表達與腫瘤直徑大小、宮頸癌組織分化程度、臨床分期、是否淋巴結轉移等臨床病理參數(shù)相關,提示BRAP可能在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉移過程中起著不可忽視的重要作用。3.檢測BRAP的表達可作為宮頸癌前病變及宮頸癌的分子生物學指標,為宮頸癌的診斷、分子靶向治療及預后判斷提供科學的理論依據(jù)。
【圖文】：

圖 2-1 qRT-PCR 擴增曲線 圖 2-2 qRT-PCR 溶解曲線2.2 BRAP mRNA 在不同宮頸病變組中的表達以 GAPDH 為參照，采用公式 2-△△Ct計算比較各組 BRAP mRNA 的相對表達（表 2-1，圖 2-3）�？梢� BRAP mRNA 在正常對照組、LSIL、HSIL、CSCC 中有表達，其中 CSCC 組 BRAP mRNA 的表達量高于正常對照組的 3 倍，差異具有計學意義（P＜0.05）；LSIL 組、HSIL 組分別與正常對照組相比 BRAP mRNA 達量較高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；LSIL 組 BRAP mRNA 的表達量低HSIL 組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；LSIL 組、HSIL 組分別與 CSCC 組比表達量較低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。表 2-1 不同宮頸病變組中 BRAP mRNA 表達量（ X+S）分組 n BRAP 表達量 F P

圖 2-1 qRT-PCR 擴增曲線 圖 2-2 qRT-PCR 溶解曲線2.2 BRAP mRNA 在不同宮頸病變組中的表達以 GAPDH 為參照，采用公式 2-△△Ct計算比較各組 BRAP mRNA 的相對表達（表 2-1，圖 2-3）�？梢� BRAP mRNA 在正常對照組、LSIL、HSIL、CSCC 中有表達，其中 CSCC 組 BRAP mRNA 的表達量高于正常對照組的 3 倍，，差異具有計學意義（P＜0.05）；LSIL 組、HSIL 組分別與正常對照組相比 BRAP mRNA 達量較高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；LSIL 組 BRAP mRNA 的表達量低HSIL 組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；LSIL 組、HSIL 組分別與 CSCC 組比表達量較低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。表 2-1 不同宮頸病變組中 BRAP mRNA 表達量（ X+S）分組 n BRAP 表達量 F P
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R737.33

【參考文獻】

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1 胡尚英;鄭榮壽;趙方輝;張思維;陳萬青;喬友林;;1989至2008年中國女性子宮頸癌發(fā)病和死亡趨勢分析[J];中國醫(yī)學科學院學報;2014年02期

2 熱西丹·尼格買提;李菁菁;李軼杰;馬正海;;轉錄因子Skn-1a激活人乳頭瘤病毒18 E6基因表達的分析[J];新疆大學學報(自然科學版);2008年03期

本文編號：2664405