【摘要】：目的:研究miRNA-101對胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞(HTR-8/SVneo)增殖和遷移能力的影響,探討其在妊娠期糖尿病(GDM)中的可能作用機制。方法:收集GDM患者及正常孕婦胎盤組織,PCR、Western blot法檢測胎盤組織中miR-101及下游因子EZH2表達(dá),免疫組化法檢測胎盤中EZH2及其下游因子H3K27me3的定位及表達(dá)。分別上調(diào)和抑制HTR-8/SVneo細(xì)胞中miRNA-101表達(dá),PCR法檢測EZH2 mRNA表達(dá)水平,Western blot法檢測EZH2及H3K27me3蛋白表達(dá),CCK-8法、Transwell實驗檢測細(xì)胞增殖和遷移能力。結(jié)果:GDM組胎盤組織中miR-101 mRNA表達(dá)明顯高于正常組(P0.05),EZH2及H3K27me3表達(dá)顯著低于對照組(P0.05)。上調(diào)miRNA-101后,HTR-8/SVneo細(xì)胞中EZH2及H3K27me3表達(dá)顯著降低(P0.05),細(xì)胞增殖能力顯著降低(P0.01),遷移能力明顯降低(P0.05);抑制miR-101表達(dá)后,EZH2及H3K27me3表達(dá)顯著升高(P0.05),細(xì)胞增殖能力無明顯變化(P0.05),遷移能力顯著增強(P0.001)。結(jié)論:GDM患者胎盤中miRNA-101表達(dá)異常升高,miRNA-101可能通過EZH2-H3K27me3途徑使胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞增殖及遷移能力降低,參與GDM發(fā)病的病理機制。
【圖文】：

。P＜0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2．1胎盤組織免疫組化EZH2蛋白和H3K27me3蛋白在正常孕婦及GDM孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中均有表達(dá)，見圖1。GDM孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中EZH2蛋白和H3K27me3蛋白均低于正常孕婦，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)，見圖2。2．2胎盤組織中miＲ-101及EZH2mＲNA表達(dá)PCＲ結(jié)果顯示，miＲ-101在GDM孕婦胎盤組織中的表達(dá)顯著高于正常妊娠孕婦(P＜0．05)，EZH2在GDM孕婦胎盤組織中的表達(dá)顯著低于正常孕婦(P＜0．05)，見圖3。圖1胎盤組織免疫組化(×200)A:正常孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中EZH2陽性表達(dá);B:GDM孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中EZH2陽性表達(dá);C:正常孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中H3K27me3陽性表達(dá);D:GDM孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中H3K27me3陽性表達(dá)圖2半定量分析結(jié)果*P＜0．05圖3胎盤組織中miＲ-101、EZH2mＲNA表達(dá)*P＜0．052．3胎盤組織中EZH2及H3K27me3蛋白表達(dá)Westernblot結(jié)果顯示，GDM孕婦胎盤組織中EZH2、H3K27me3表達(dá)均低于正常孕婦，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)，見圖4。圖4正常孕婦及GDM孕婦胎盤組織中EZH2及H3K27me3蛋白表達(dá)*P＜0．052．4轉(zhuǎn)染miＲ-101mimics和inhibitor后細(xì)胞中miＲ-101及EZH2mＲNA表達(dá)Ｒeal-timePCＲ結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染miＲ-101mimics組中miＲ-101表達(dá)水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)(圖5A);轉(zhuǎn)染miＲ-101inhibitor組中miＲ-101表達(dá)水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．01)(圖5B)，，表明miＲ-101mimics及inhibitor可模擬細(xì)胞內(nèi)源性miＲ-101mＲNA水

差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)，見圖2。2．2胎盤組織中miＲ-101及EZH2mＲNA表達(dá)PCＲ結(jié)果顯示，miＲ-101在GDM孕婦胎盤組織中的表達(dá)顯著高于正常妊娠孕婦(P＜0．05)，EZH2在GDM孕婦胎盤組織中的表達(dá)顯著低于正常孕婦(P＜0．05)，見圖3。圖1胎盤組織免疫組化(×200)A:正常孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中EZH2陽性表達(dá);B:GDM孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中EZH2陽性表達(dá);C:正常孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中H3K27me3陽性表達(dá);D:GDM孕婦胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中H3K27me3陽性表達(dá)圖2半定量分析結(jié)果*P＜0．05圖3胎盤組織中miＲ-101、EZH2mＲNA表達(dá)*P＜0．052．3胎盤組織中EZH2及H3K27me3蛋白表達(dá)Westernblot結(jié)果顯示，GDM孕婦胎盤組織中EZH2、H3K27me3表達(dá)均低于正常孕婦，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)，見圖4。圖4正常孕婦及GDM孕婦胎盤組織中EZH2及H3K27me3蛋白表達(dá)*P＜0．052．4轉(zhuǎn)染miＲ-101mimics和inhibitor后細(xì)胞中miＲ-101及EZH2mＲNA表達(dá)Ｒeal-timePCＲ結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染miＲ-101mimics組中miＲ-101表達(dá)水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)(圖5A);轉(zhuǎn)染miＲ-101inhibitor組中miＲ-101表達(dá)水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．01)(圖5B)，表明miＲ-101mimics及inhibitor可模擬細(xì)胞內(nèi)源性miＲ-101mＲNA水平。miＲ-101mimics組中EZH2表達(dá)水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)(圖5C);轉(zhuǎn)染miＲ-101inhibitor組EZH2表達(dá)水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0．05)(圖5D)，表明HTＲ-8/SVneo細(xì)胞過表達(dá)m

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄒梅芳;陳燕;王海燕;;胰島素樣生長因子-Ⅱ?qū)θ焉锔哐獕壕C合征胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤能力的影響[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2008年12期

2 陳燕;鄒梅芳;錢偉明;;胰島素樣生長因子Ⅱ在妊娠高血壓綜合征胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)[J];江蘇醫(yī)藥;2008年11期

3 呂曉杰;王玫;韓淑梅;馮麗華;;5-羥色胺對體外培養(yǎng)的人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年02期

4 李真,胡燕,林桂蘭,王智,成婭;胰島素樣生長因子-Ⅱ在妊振高血壓綜合征胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞淺浸潤中的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2005年01期

5 李真,林桂蘭,王智,成婭;妊娠高血壓綜合征胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中胰島素樣生長因子Ⅱ及其mRNA的表達(dá)[J];中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

6 邱紅玉,孫永玉;胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞表面FasL的表達(dá)異常與妊娠高血壓綜合征的關(guān)系[J];中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志;2001年02期

7 張樹榮;何順安;郭玉卿;楊淑莉;;5-羥色胺對人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞L-型鈣通道的影響[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2010年01期

8 張樹榮;何順安;郭玉卿;楊淑莉;;5-羥色胺對人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞鈣通道的影響[J];中國婦產(chǎn)科臨床雜志;2010年01期

9 夏暉;徐穎;;胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤1例[J];臨床醫(yī)學(xué);2010年09期

10 孫麗洲,趙文英,洪蕾,彭韜;妊娠高血壓綜合征患者胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡基因表達(dá)譜的研究[J];中華婦產(chǎn)科雜志;2003年10期

相關(guān)會議論文 前10條

1 張瑞詳;趙淑敏;李春輝;劉勝;盧金秀;張瑛;王宇;陳文秀;翟雅麗;張淑英;趙曉明;;人妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的動態(tài)研究[A];第五次全國電子顯微學(xué)會議論文摘要集[C];1988年

2 崔世紅;岳秀云;張曦;;FasL在重度子癇前期胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)的研究[A];第三次全國婦產(chǎn)科基層醫(yī)師學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2005年

3 鄭東穎;喬寵;;塌陷反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白-1(CRMP-1)在胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會議產(chǎn)科會場（產(chǎn)科學(xué)組、妊高癥學(xué)組）論文匯編[C];2012年

4 張曦;岳秀云;;Fas及VEGF在重度子癇前期胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)的研究[A];第三次全國婦產(chǎn)科基層醫(yī)師學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2005年

5 蔣玲玲;華瑩;陳苗苗;朱雪瓊;;調(diào)控人早孕胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞AQP3蛋白表達(dá)的cAMP-PKA信號通路的研究[A];2014浙江省婦產(chǎn)科學(xué)、圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會暨婦產(chǎn)科常見疾病規(guī)范化治療新進(jìn)展、圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)現(xiàn)狀與進(jìn)展專題學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2014年

6 王云;李力;;子癇前期胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中低氧誘導(dǎo)因子-1αmRNA的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會第二次全國產(chǎn)科熱點問題研討會及第一屆全國產(chǎn)科主任論壇學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

7 王云;李力;;子癇前期胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中低氧誘導(dǎo)因子-1αmRNA的變達(dá)[A];第八次全國婦產(chǎn)科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

8 徐慶;;妊娠期糖尿病的飲食制作[A];2015年臨床營養(yǎng)師實踐技能培訓(xùn)班資料匯編[C];2015年

9 尤薇;陳丹青;;妊娠期糖尿病3個候選基因單核苷酸多態(tài)性的研究[A];第四屆長三角婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)論壇暨浙江省2009年婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

10 蘇世萍;;妊娠期糖尿病的綜合管理[A];全國婦產(chǎn)科新技術(shù)、新理論進(jìn)展研討會論文匯編[C];2012年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 記者 白竟楠;妊娠期糖尿病，危害遠(yuǎn)比你想象中大[N];北京科技報;2017年

2 北京婦產(chǎn)醫(yī)院營養(yǎng)科 趙明;糖篩 你準(zhǔn)備好了嗎[N];健康報;2017年

3 王樂羊;治療妊娠期糖尿病　呵護(hù)兩代人健康[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

4 嘉興市婦幼保健院圍產(chǎn)保健科 楊雪群;應(yīng)對妊娠期糖尿病是“糖媽媽”的必修課[N];保健時報;2016年

5 中國婦女報·中華女性網(wǎng)記者 楊娜;妊娠期糖尿病危害母嬰 管住嘴和腿不做“糖媽媽”[N];中國婦女報;2016年

6 韓詠霞;妊娠期糖尿病的調(diào)治[N];衛(wèi)生與生活報;2007年

7 蔡慶華;妊娠期糖尿病怎么辦[N];家庭醫(yī)生報;2006年

8 韓詠霞;妊娠期糖尿病更要注意[N];衛(wèi)生與生活報;2006年

9 廣西醫(yī)科大學(xué) 黎淑貞;補出來的妊娠期糖尿病[N];上海中醫(yī)藥報;2017年

10 武漢大學(xué)中山醫(yī)院主任醫(yī)師、教授 李定國;妊娠期糖尿病不可忽視[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 呂曉杰;5-羥色胺與妊娠期高血壓疾病相關(guān)關(guān)系的研究[D];吉林大學(xué);2006年

2 唐超;Hedgehog信號調(diào)控人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞甾體激素合成和合體化[D];浙江大學(xué);2016年

3 童曉嵋;鈣結(jié)合蛋白S100P在胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)與功能研究[D];浙江大學(xué);2016年

4 王文玲;妊娠期糖尿病婦女乳汁代謝組學(xué)研究及其對子代生長發(fā)育初期的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2018年

5 楊柳;腫瘤壞死因子α、可溶性受體及其基因多態(tài)性在妊娠期糖尿病發(fā)病機制作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

6 徐修才;氧化—內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號途徑在弓形蟲感染致胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡中的作用研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 戢蘭馨;miR-221/222通過促人胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞HTR-8凋亡參與妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥發(fā)病機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2018年

2 王玉萍;Bax、Bcl-2基因在晚期妊娠胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞層的表達(dá)及意義[D];天津醫(yī)科大學(xué);2003年

3 韓凌;妊娠高血壓綜合征患者胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白Bax,Bcl-2表達(dá)及意義[D];天津醫(yī)科大學(xué);2005年

4 胡燕;IGF-Ⅱ和TGF-β1對妊高征胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

5 張婷;細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2在子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)及意義[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2011年

6 楊元元;XIAP在子癇前期患者胎盤中的表達(dá)[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

7 李靜;斑點追蹤技術(shù)評價妊娠期糖尿病患者左室功能的研究[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2018年

8 喬山峰;妊娠期糖尿病相關(guān)因素的初步臨床研究[D];揚州大學(xué);2018年

9 謝明坤;脂肪因子分泌型卷曲相關(guān)蛋白5與超重及妊娠期糖尿病的關(guān)系[D];鄭州大學(xué);2018年

10 榮艷霞;妊娠期甲減合并妊娠期糖尿病對圍產(chǎn)期母嬰的影響[D];華北理工大學(xué);2018年

本文編號：2655036