發(fā)布時間：2020-05-04 17:43

【摘要】：目的:本實驗應用兩種不同的冷凍方法凍存小鼠卵巢組織進行冷凍并解凍后自體移植,然后比較各組冷凍前、解凍后及移植后卵巢組織內(nèi)卵泡的形態(tài)改變以及Ang-2和Tie-2的表達。方法:以小鼠為研究對象,將90只小鼠隨機分為3組,每組各30只。由于實驗過程中操作問題,剩余74只小鼠納入結(jié)果(其中A組27只,B組23只,C組24只)。A組為對照組,B組、C組為實驗組。A組將卵巢組織取下后直接移植于頸后部,B組將取下的卵巢組織以慢速程序化冷凍方法凍存21天后再進行自體移植,C組將取下的卵巢組織以玻璃化冷凍方法凍存21天后再進行自體移植。三組小鼠均在移植21天后將移植的卵巢組織取下。將剛?cè)∠碌男迈r卵巢組織(三組)、解凍后(B組和C組)、移植后的卵巢組織(三組)進行HE染色及免疫組化,各組HE染色組織學觀察各級卵泡形態(tài)學改變以及免疫組織化學法觀察Ang-2及Tie-2的表達。結(jié)果:1.A組:移植后各級卵泡形態(tài)正常率均明顯低于移植前(P0.05)。B組:冷凍前與解凍后相比,始基卵泡形態(tài)正常率差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);解凍后竇前卵泡、竇卵泡形態(tài)正常率均低明顯于冷凍前(P0.05)。C組:解凍后各級卵泡形態(tài)正常率均明顯低于冷凍前(P0.05)。B組、C組移植后各級卵泡形態(tài)正常率均明顯低于冷凍前和解凍后(P0.05)。冷凍前A、B、C三組間各級卵泡的形態(tài)正常率差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。解凍后B組始基卵泡形態(tài)正常率明顯高于C組(P0.05),A組各級卵泡形態(tài)正常率于移植后明顯高于B組和C組(P0.05);B組和C組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.無論在顆粒細胞還是卵泡膜細胞,A組新鮮卵巢Ang-2、Tie-2的陽性表達均明顯高于移植后(P0.05),B組、C組解凍后均明顯低于冷凍前(P0.05),移植后明顯低于冷凍前和解凍后(P0.05)。A、B、C三組相比,冷凍前Ang-2、Tie-2的陽性表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。B組于解凍后Ang-2、Tie-2陽性表達均明顯高于C組(P0.05),A組于移植后Ang-2、Tie-2陽性表達均明顯高于B組、C組(P0.05);B組和C組之間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:1.無論用何種冷凍方法,相比于于竇前卵泡和竇卵泡,冷凍對始基卵泡的損傷最小,始基卵泡更易耐受冷凍,而且慢速程序化冷凍對各級卵泡的損傷小于玻璃化冷凍。2.卵巢組織冷凍過程會影響Ang-2和Tie-2的表達,冷凍對血管生成會產(chǎn)生影響,慢速程序化冷凍對Ang-2和Tie-2的影響小于玻璃化冷凍。3.無論是否經(jīng)過冷凍,移植過程均會對對卵泡產(chǎn)生損傷,同時影響血管再生過程。
【圖文】：

圖 1 三組小鼠新鮮卵巢（冷凍前）的組織形態(tài)學（HE）Fig.1 The morphology of ovarian tissue in the three groups beforefreezing(HE).: The fresh ovarian tissue in group A (40×); B: The fresh ovarian tissueroup B(before frezing) (40×); C: The fresh ovarian tissue in group C(beforezing) (20×). a: preantral follicle; b: antral follicle.

圖 2 實驗組 B、C 兩組小鼠解凍后卵巢組織形態(tài)學改變 (HE, 20×)Fig.2 The morphological changes of ovarian tissue in experimental groafter thawing in group B and group C(HE, 20×). A: After thawing in grouB: After thawing in group C.a: preantral follicle; b: antral follicle.
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R714.8

【參考文獻】

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1 汪翔;方叢;狄春光;史亞男;梁曉燕;;玻璃化冷凍對人類卵巢皮質(zhì)組織形態(tài)學和凋亡的影響[J];中山大學學報(醫(yī)學科學版);2015年04期

2 張娜,劉復權(quán),李彥群,馬洪駿;轉(zhuǎn)化生長因子-α及其受體在多囊卵巢綜合征大鼠中的表達[J];河北醫(yī)科大學學報;2005年01期

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本文編號：2648763