【摘要】：研究背景 子宮頸癌是嚴(yán)重威脅全球女性健康的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率居女性惡性腫瘤的第四位。子宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)內(nèi)高危型人乳頭瘤病毒(High-Risk Human Papillomavirus,HR-HPV)持續(xù)性感染是導(dǎo)致子宮頸癌前病變及子宮頸癌的主要致病因素。在大多數(shù)子宮頸癌發(fā)生發(fā)展的過程中,存在著較長而且可逆轉(zhuǎn)的癌前病變期。及時(shí)恰當(dāng)?shù)奶幚砀呶Ｐ虷PV持續(xù)感染及子宮頸癌前病變,是防治子宮頸癌的根本所在。但目前臨床上仍缺乏有效的清除HPV感染的手段,對(duì)于子宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變(Cervical squamous intraepithelial lesions,SIL)和高危型HPV持續(xù)性感染的治療主要是物理治療和手術(shù)治療。然而,物理治療復(fù)發(fā)率較高;手術(shù)治療(宮頸環(huán)形電切、冷刀錐切)又存在著出血、宮頸管狹窄、宮頸機(jī)能不全等不同程度影響生育功能的并發(fā)癥。鑒于目前我國罹患宮頸病變的群體趨于年輕化,其中部分患者未婚或未產(chǎn),強(qiáng)烈要求保留生理、生育功能,迫切需要一種既可以有效治療子宮頸癌前病變、清除HPV感染又不影響宮頸機(jī)能的治療方法。光動(dòng)力學(xué)療法(Photodynamic therapy,PDT)是臨床醫(yī)學(xué)、光學(xué)及光電子學(xué)等學(xué)科交叉融合而發(fā)展起來的一種新的治療技術(shù)。PDT能選擇性殺傷增生活躍的病變細(xì)胞,對(duì)正常細(xì)胞的毒性作用極小或無,可消滅隱性病灶,并能保留器官的完整性。此外,光動(dòng)力學(xué)治療還可與其他傳統(tǒng)療法如化療、手術(shù)等相結(jié)合,具有協(xié)同作用,重復(fù)性好。PDT治療腫瘤和HPV感染相關(guān)性疾病如尖銳濕疣、高危型HPV持續(xù)性感染、甚至早期子宮頸癌的臨床療效己得到肯定,但其療效不一。深入研究PDT介導(dǎo)的細(xì)胞損傷的分子機(jī)制有助于提高PDT的治療效果,對(duì)指導(dǎo)PDT在臨床中的應(yīng)用是非常必要的,也是PDT治療最終走向臨床的重要前提。Demyanenko等利用蛋白質(zhì)微陣列芯片技術(shù)篩選與表觀遺傳學(xué)有關(guān)的差異表達(dá)蛋白質(zhì)中發(fā)現(xiàn):ALA-PDT作用后可引起組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(Histone deacetylases,HDAC)-1和HDAC-11的表達(dá)上調(diào)。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白48(Retinoblastoma associated protein 48,RbAP48),是組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物中的高豐度蛋白組分。RbAp48,能協(xié)同其他蛋白調(diào)節(jié)組蛋白及其核小體相關(guān)的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物的構(gòu)型和活性,從而抑制E2F調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。研究己證實(shí)RbAp48是一種調(diào)控HPV16陽性子宮頸癌轉(zhuǎn)化活性的重要蛋白,在HPV陽性的宮頸癌細(xì)胞系中過表達(dá)RbAp48能夠抑制細(xì)胞的生長增殖及腫瘤形成,其機(jī)制與RbAp48調(diào)節(jié)抑癌基因p53、Rb以及Rb/E2F靶位基因和HPV E6、E7基因的表達(dá)有關(guān)。同時(shí)RbAP48也是一種放射敏感蛋白,其過表達(dá)能增加子宮頸癌細(xì)胞對(duì)放射治療的敏感性,提示RbAp48可以作為一種HPV相關(guān)疾病的治療靶位用于臨床應(yīng)用。本課題擬系統(tǒng)研究ALA-PDT對(duì)子宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變及子宮頸癌的作用,以及RbAp48參與調(diào)控ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞及子宮頸癌細(xì)胞的作用及其機(jī)制,具體研究內(nèi)容分為以下三個(gè)部分。第一部分ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其機(jī)制研究背景和目的 高危型HPV尤其是HPV16、18亞型,在子宮頸粘膜的持續(xù)感染與子宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)。H8細(xì)胞是取材于我國正常婦女子宮頸磷柱上皮交界處的鱗狀上皮,經(jīng)體外轉(zhuǎn)染HPV16 E6和E7基因而達(dá)到永生化的細(xì)胞株。該細(xì)胞株是一種理想的癌前病變模型細(xì)胞。本課題采用H8細(xì)胞為靶細(xì)胞,研究ALA-PDT對(duì)HPV感染細(xì)胞的增殖和凋亡的作用,探討其清除子宮頸上皮HPV感染的機(jī)制。研究方法1.通過CCK-8實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)檢測ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞的增殖活性的影響;2.采用流式細(xì)胞術(shù)分析ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞周期及凋亡的影響;3.采用Western blot檢測ALA-PDT作用于H8細(xì)胞后對(duì)凋亡相關(guān)基因p53和p21蛋白的影響;4.采用Real-time PCR檢測ALA-PDT作用于H8細(xì)胞后對(duì)腫瘤相關(guān)基因、凋亡相關(guān)因子及HPV致癌基因E6、E7的mRNA的表達(dá)影響;5.采用Real-time PCR和Western blot檢測ALA-PDT作用于H8細(xì)胞后對(duì)RbAp48的表達(dá)影響。結(jié)果1.ALA-PDT抑制H8細(xì)胞增殖 CCK-8實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞有顯著增殖抑制作用,且該抑制作用隨著ALA濃度的增加而增強(qiáng),呈劑量依賴性。而單獨(dú)使用光敏劑ALA孵育H8細(xì)胞30小時(shí),與對(duì)照組(0μM ALA-PDT)細(xì)胞比較,細(xì)胞活力幾乎沒有抑制作用。 2.ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞周期分布的影響細(xì)胞周期分析結(jié)果表明:不同濃度的ALA-PDT組G0/G|期的比率增多,S和G2/M期的比率明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。3.ALA-PDT能誘導(dǎo)H8細(xì)胞凋亡流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果表明:不同濃度的ALA-PDT作用后24小時(shí)可顯著誘導(dǎo)H8細(xì)胞的凋亡,且呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴關(guān)系。Western blot結(jié)果表明:ALA-PDT作用于H8細(xì)胞后24小時(shí)引起凋亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子p53蛋白的表達(dá)量顯著增加,同時(shí)伴有其下游靶基因p21蛋白的表達(dá)增加。4.ALA-PDT能促進(jìn)H8細(xì)胞抑癌基因及凋亡相關(guān)因子的表達(dá)Real-time PCR結(jié)果顯示:ALA-PDT能夠促進(jìn)抑癌基因(p53、p21、Rb),凋亡相關(guān)因子Caspase-3的mRNA表達(dá)。5.ALA-PDT能抑制H8細(xì)胞HPV E6、E7基因的表達(dá)Real-time PCR結(jié)果顯示:ALA-PDT能夠明顯抑制HPV E6、E7的mRNA表達(dá),其中150μM的ALA-PDT組最明顯,大約是對(duì)照組E6的1/4,E7的1/2,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.ALA-PDT能促進(jìn)H8細(xì)胞RbAp48的表達(dá)ALA-PDT作用于H8細(xì)胞后,RbAp48的表達(dá)在mRNA和蛋白水平均顯著升高。結(jié)論1.ALA-PDT對(duì)HPV16轉(zhuǎn)化的人宮頸上皮永生化細(xì)胞系H8細(xì)胞有顯著的增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡效應(yīng),證明ALA-PDT是子宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變的有效治療方法。2.ALA-PDT作用于H8細(xì)胞,誘導(dǎo)p53和p21表達(dá)增加,將細(xì)胞周期阻滯于G()/G1期,可能為其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一;ALA-PDT導(dǎo)致HPV16病毒癌蛋白E6和E7mRNA表達(dá)下調(diào)及RbAp48的表達(dá)上調(diào),有助于清除HPV感染。第二部分RbAp48在ALA-PDT作用于H8細(xì)胞中的作用及其機(jī)制研究背景和目的既往研究表明RbAP48是調(diào)控HPV16陽性的子宮頸癌轉(zhuǎn)化活性的重要蛋白,能抑制宮頸癌細(xì)胞的生長,降低HPV病毒的致瘤性,RbAp48可以作為一種HPV感染相關(guān)疾病的治療靶位應(yīng)用于臨床。所以這一部分主要研究RbAp48在ALA-PDT殺傷H8細(xì)胞中所發(fā)揮的作用及其機(jī)制。研究方法1.采用免疫組織化學(xué)染色法在15例HSIL、21例LSIL的子宮頸病變組織和25例正常對(duì)照的子宮頸組織中檢測RbAp48的表達(dá)差異;2.構(gòu)建RbAp48siRNA,轉(zhuǎn)染H8細(xì)胞并檢測其干擾效率;通過CCK-8和細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)觀察干擾RbAp48的表達(dá)后,ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞抗增殖效應(yīng)的影響。3.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測siRbAp48組細(xì)胞和NC組細(xì)胞在接受1 OOhM ALA-PDT前后細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的變化;4.采用Real-time PCR方法檢測siRbAp48組細(xì)胞和NC組細(xì)胞分別接受100μM ALA-PDT前后腫瘤相關(guān)基因(p53、p21、Rb),凋亡相關(guān)因子Caspase-3及HPV E6、E7的mRNA表達(dá)變化。結(jié)果1.RbAp48在子宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變組織及正常子宮頸鱗狀上皮組織中的差異表達(dá)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:RbAp48在子宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變組織及正常宮頸鱗狀上皮組織中的細(xì)胞核中表達(dá)。RbAp48在HSIL中的高表達(dá)率顯著低于正常子宮頸組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.干擾RbAp48的表達(dá)能抑制ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞的增殖抑制作用構(gòu)建RbAp48siRNA,轉(zhuǎn)染H8細(xì)胞并檢測其干擾效率。CCK-8和細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:siRbAp48聯(lián)合ALA-PDT組細(xì)胞的增殖活性明顯高于NC聯(lián)合ALA-PDT組的細(xì)胞。由此可見,抑制RbAp48表達(dá)后可降低ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞增殖的抑制效應(yīng)。說明ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞的抗增殖效應(yīng),至少部分是由于ALA-PDT誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)RbAp48的表達(dá)升高所致。3.干擾RbAp48的表達(dá)能降低ALA-PDT誘導(dǎo)H8細(xì)胞凋亡的作用流式細(xì)胞分析結(jié)果顯示:siRbAp48組的H8細(xì)胞經(jīng)ALA-PDT處理后,細(xì)胞的總凋亡比例要顯著低于ALA-PDT處理后的NC組細(xì)胞。這說明抑制RbAp48的表達(dá)能抑制ALA-PDT所致的細(xì)胞凋亡。4.細(xì)胞周期分析RbAp48對(duì)ALA-PDT作用于H8細(xì)胞的影響流式細(xì)胞分析結(jié)果顯示:siRbAp48組的H8細(xì)胞中,ALA-PDT處理后G0/G1期的細(xì)胞比例要明顯低于ALA-PDT處理后的NC組細(xì)胞。說明RbAp48表達(dá)的降低能抑制ALA-PDT所引起的Go/G1期的阻滯。5.ALA-PDT作用于H8細(xì)胞后,RbAp48對(duì)腫瘤基因p53、p21、Rb及凋亡相關(guān)因子Caspase-3的影響Real-time PCR結(jié)果同樣顯示:經(jīng)ALA-PDT作用后,siRbAp48組細(xì)胞p53、p21、Rb和Caspase-3的mRNA表達(dá)水平顯著低于NC組細(xì)胞。干擾RbAp48的表達(dá)后,ALA-PDT促進(jìn)p53、p21、Rb和Caspase-3的mRNA表達(dá)受到抑制。6.ALA-PDT治療后,RbAp48對(duì)HPV相關(guān)基因的影響Real-time PCR 結(jié)果顯示:經(jīng) ALA-PDT 作用后,siRbAp48 組細(xì)胞 HPV E6、E7mRNA表達(dá)水平顯著高于NC組細(xì)胞。說明干擾RbAp48的表達(dá)后,ALA-PDT引起的HPV E6、E7的mRNA表達(dá)降低明顯受到抑制。結(jié)論1.ALA-PDT對(duì)HPV16轉(zhuǎn)化的人宮頸上皮永生化細(xì)胞系H8細(xì)胞有顯著的增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡效應(yīng),干擾RbAp48的表達(dá)則抑制這一過程,證明RbAp48參與調(diào)控ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞的作用過程。2.RbAp48主要通過阻滯細(xì)胞周期、誘導(dǎo)凋亡、促進(jìn)抑癌基因、抑制HPVE6、E7mRNA的表達(dá)來參與并影響ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞的作用過程。第三部分RbAp48在ALA-PDT作用于子宮頸癌細(xì)胞中的作用及其機(jī)制研究背景及目的 上述研究表明RbAp48參與了調(diào)控ALA-PDT對(duì)子宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變的作用過程,在本部分的研究中,我們進(jìn)一步以子宮頸癌細(xì)胞系SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞為例,采用一系列的實(shí)驗(yàn)方法驗(yàn)證RbAp48在ALA-PDT在治療宮頸癌中所發(fā)揮的作用及其機(jī)制。研究方法1.采用Real-time PCR和Western blot分別從mRNA和蛋白水平上檢測子宮頸癌細(xì)胞SiHa、Hela細(xì)胞在不同濃度的ALA-PDT作用后RbAp48的表達(dá)變化;2.構(gòu)建RbAp48siRNA,轉(zhuǎn)染子宮頸癌細(xì)胞系SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞并檢測其干擾效率,通過CCK-8和細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)觀察干擾RbAp48的表達(dá)后,ALA-PDT對(duì)子宮頸癌細(xì)胞抗增殖效應(yīng)的影響;3.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測siRbAp48組細(xì)胞和NC組細(xì)胞分別接受100μM ALA-PDT前后細(xì)胞凋亡的變化;4.采用Real-time PCR方法檢測siRbAp48組細(xì)胞和NC組細(xì)胞分別接受100μM ALA-PDT和對(duì)照處理后腫瘤相關(guān)基因(p53、p21、Rb),凋亡相關(guān)因子Caspase-3及HPV E6、E7的mRNA表達(dá)變化。結(jié)果1.RbAp48在ALA-PDT作用后子宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)差異Real-time PCR和Western blot結(jié)果表明:不同濃度的ALA-PDT作用于SiHa、HeLa細(xì)胞后,RbAp48的表達(dá)在mRNA和蛋白水平均顯著升高。2.干擾RbAp48的表達(dá)能抑制ALA-PDT對(duì)子宮頸癌的增殖抑制作用構(gòu)建RbAp48siRNA,轉(zhuǎn)染子宮頸癌細(xì)胞系SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞并檢測其干擾效率,其中siRbAp48(2)能更有效的抑制RbAp48的mRNA和蛋白水平的表達(dá)。因此,我們選取了 siRbAp48(2)進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。CCK-8和細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:siRbAp48聯(lián)合ALA-PDT干擾處理組的細(xì)胞增殖活性顯著高于NC聯(lián)合ALA-PDT處理組細(xì)胞。由此可見,抑制RbAp48表達(dá)后可降低ALA-PDT對(duì)H8細(xì)胞增殖生長的抑制效應(yīng),說明ALA-PDT對(duì)子宮頸癌細(xì)胞增殖抑制效應(yīng),至少部分是由于ALA-PDT誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)RbAp48的表達(dá)升高所致。3.干擾RbAp48的表達(dá)能降低ALA-PDT誘導(dǎo)子宮頸癌細(xì)胞凋亡的作用流式細(xì)胞分析結(jié)果顯示:siRbAp48組細(xì)胞經(jīng)ALA-PDT處理后細(xì)胞凋亡的比例要顯著低于ALA-PDT處理后的NC組細(xì)胞。也就是說RbAp48表達(dá)的降低能抑制ALA-PDT作用于子宮頸癌細(xì)胞所引起的細(xì)胞凋亡。4.ALA-PDT作用于子宮頸癌細(xì)胞后,RbAp48對(duì)腫瘤基因p53、p21、Rb及凋亡相關(guān)因子Caspase-3的影響Real-time PCR結(jié)果顯示:經(jīng)ALA-PDT作用后,siRbAp48組子宮頸癌細(xì)胞抑癌基因p53、p21、Rb和凋亡相關(guān)因子Caspase-3的mRNA表達(dá)水平顯著低于NC組細(xì)胞。表明干擾RbAp48的表達(dá)后,ALA-PDT促進(jìn)p53、p21、Rb和Caspase-3的mRNA表達(dá)增加受到抑制。5.ALA-PDT治療后,RbAp48對(duì)HPV相關(guān)基因的影響Real-time PCR結(jié)果顯示:經(jīng)ALA-PDT作用后,siRbAp48組子宮頸癌細(xì)胞HPV E6、E7的mRNA表達(dá)水平顯著高于NC組細(xì)胞。表明干擾RbAp48的表達(dá)后,ALA-PDT引起的HPV E6、E7的mRNA表達(dá)降低明顯受到抑制。結(jié)論1.ALA-PDT對(duì)子宮頸癌細(xì)胞SiHa和HeLa細(xì)胞有顯著的增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡效應(yīng),干擾RbAp48的表達(dá)則抑制這一過程,證明RbAp48參與調(diào)控ALA-PDT對(duì)子宮頸癌細(xì)胞的作用過程。2.RbAp48主要通過阻滯細(xì)胞周期、誘導(dǎo)凋亡、抑制HPVE6、E7mRNA的表達(dá)來參與并影響ALA-PDT對(duì)SiHa和HeLa細(xì)胞的作用過程。
【圖文】：

１．３邋ＡＬＡ暗毒性的確定：逡逑ＣＣＫ－８實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：與正常對(duì)照組（Ｏ＾ＭＡＬＡ）細(xì)胞比較，單獨(dú)使用光敏逡逑劑ＡＬＡ邋６００＾Ｍ及以下孵育Ｈ８細(xì)胞３０小時(shí)，對(duì)細(xì)胞活力沒有明顯的影響，見圖１Ｃ。逡逑Ａ？，，00Ｌ．邐Ｂ邋Ｍ１邐Ｃ逡逑０邐５０邐１００邐１５０邐２００邐２Ｓ０邐０邐５０邐１００邐１５０邐２００邐0邋２００邐４００邐６００邋ＭＯ逡逑Ｃｏｏｃｅｎｔｒｉｔｌｏｎ邋ｏｆ邋ＡＬＡ邋（ｐＭ）邐Ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｔｔｏｎ邋ｏｆ邋ＡＬＡ邋（ｐＭ）邐Ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ＡＬＡ邋（ｍＭ）逡逑圖１不同濃度的ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)Ｈ８細(xì)胞增殖的影響逡逑（Ａ）邋ＣＣＫ－８檢測不同濃度ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)Ｈ８細(xì)胞活力的影響；（Ｂ）細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)檢測逡逑不同濃度ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)Ｈ８細(xì)胞增殖的抑制作用，與對(duì)照組（０（ｉＭＡＬＡ－ＰＤＴ）比較，逡逑０．０５；邋＊邋尸＜０．０１；邐＊＊＊Ｐ＜０．００１邋（ｎ＝３）；邐（Ｃ）單純邋ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)邋Ｈ８細(xì)胞的影響。逡逑２．邐ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)Ｈ８細(xì)胞周期分布的影響逡逑ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)Ｈ８細(xì)胞增殖具有顯著的抑制作用，細(xì)胞周期的調(diào)控是影響細(xì)逡逑胞增殖的關(guān)鍵途徑，因此我們進(jìn)一步就ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)Ｈ８細(xì)胞周期的影響做了相逡逑關(guān)研究。細(xì)胞周期分析結(jié)果表明

逑的明顯改變。與對(duì)照組比較，ＡＬＡ－ＰＤＴ組Ｇｏ／Ｇ，增多，Ｓ和Ｇ２／Ｍ期明顯減少，逡逑差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜邋０．０５），且呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴關(guān)系，如表１、圖２所示。逡逑［ＡＬＡ］邋＝邋ＯｐＭ邐Ｉ邋［ＡＬＡ］邋＝邋５0ｍＭ邐｜邋［ＡＬＡ］邋＝邋１００｜ｊＭ逡逑Ｉ邋：：逡逑：Ｌ邋Ｉ邐Ｈ逡逑ｅ：邐Ｉ邋邐邐邐邐邋0：＿Ｊ邐邐，逡逑０邐４Ｃ邐８０邐１２０邐？��？＞邐ａｏｏ邋0邐４０邐？邐Ｉ２Ｑ邐１９０邐ＺＯＯ邐0邐＊0邐？邐２０邐ＭＯ邐２００逡逑ＣＳ＊ｎｒ？ｌ？（ｒＬ３－Ａ）邐Ｃｋ？ｎｎａｌ（（ＦＬ２－Ａ｜邐Ｃｈｃｒｍｔｌ＾Ｃ＾．Ａ｝逡逑ｆ邋［ＡＬＡ］邋＝邋１５0ｍＭ逡逑｜邐孑８０＿｜邐□邋ＯｐＭ逡逑ｗ邋Ｉ邐—邐＊＊＊＊邐ｍ邋５0ｍｍ逡逑Ｔ邐Ｉ邐§邋Ｒｎ邐１００ｍｍ逡逑Ｉ邐ｉ邋ｉｌｌ邐Ｄ１＿逡逑Ｉ邐｜邋４０－邋ｆ１？邋｜邐Ｊ＊＊邋＊逡逑ｌ．．邋．．．．．邋ＪＬ－，—邐Ｉ邋通雇姐逡逑６邐４０邐ｃ＾，．＾邐１５０邋ＯＴ邐Ｇ０／Ｇ１邐Ｓ邐Ｇ２／Ｍ逡逑圖２不同濃度的ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)Ｈ８細(xì)胞周期分布的影響逡逑不同濃度的ＡＬＡ－ＰＤＴ作用Ｈ８細(xì)胞１２小時(shí)后引起的細(xì)胞周期分布的改變。與對(duì)照組（0ｎＭ逡逑ＡＬＡ－ＰＤＴ）比較，＊邋尸＜０．０５；邋＊＊邋尸＜０．０１邋（ｎ＝邋３）。逡逑３．邋ＡＬＡ－ＰＤＴ能誘導(dǎo)Ｈ８細(xì)胞凋亡逡逑Ａｎｎｅｘｉｎ邋Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ雙染結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測ＡＬＡ－ＰＤＴ對(duì)Ｈ８細(xì)胞凋亡的影逡逑響，結(jié)果表明：與對(duì)照組比較，ＡＬＡ－ＰＤＴ作用后２４小時(shí)可顯著的誘導(dǎo)Ｈ８細(xì)胞逡逑凋亡
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R737.33

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4 楊旭銳;下調(diào)RbAp48表達(dá)抑制人消化道腫瘤細(xì)胞的增殖[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

5 鐘晶晶;下調(diào)RbAp48表達(dá)對(duì)人宮頸癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的抑制作用及其機(jī)制的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

6 王平;下調(diào)RbAp48表達(dá)抑制子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移[D];山東大學(xué);2017年

7 戚武林;RbAp48和PBDC1在丁酸鈉誘導(dǎo)MEL細(xì)胞分化中的功能研究[D];浙江理工大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2644557