【摘要】：目的:應(yīng)用不同冷凍方法對(duì)小鼠卵巢組織進(jìn)行冷凍,通過(guò)檢測(cè)小鼠動(dòng)情周期、血清AMH水平及凋亡卵泡率的變化評(píng)估兩種冷凍方法對(duì)小鼠卵巢組織凍存及自體移植的影響,為臨床上患癌女性的生育力保存提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將90只小鼠隨機(jī)分為三組,每組30只。A組為對(duì)照組;B組、C組為實(shí)驗(yàn)組。A組:切除卵巢后直接將其自體移植。B組:切除卵巢后應(yīng)用程序化冷凍法凍存21天后行自體移植。C組:切除卵巢后應(yīng)用玻璃化冷凍法凍存21后行自體移植。于切除卵巢前、移植卵巢前、移植卵巢后21天取血,檢測(cè)AMH水平,同時(shí)分別留取新鮮、解凍后、移植后的卵巢組織,用TUNEL法檢測(cè)卵泡凋亡率。實(shí)驗(yàn)期間每日觀察小鼠的動(dòng)情周期。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組兩組小鼠在切除卵巢后、移植卵巢前動(dòng)情周期消失,于移植卵巢后又恢復(fù)動(dòng)情周期,恢復(fù)動(dòng)情周期的天數(shù)C組明顯長(zhǎng)于B組(P0.05)。三組小鼠移植卵巢后的動(dòng)情周期天數(shù)明顯長(zhǎng)于切除卵巢前(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組兩組小鼠血清AMH水平在移植卵巢前均明顯低于切除卵巢前(P0.05),在移植卵巢后出現(xiàn)明顯回升(P0.05),且B組明顯高于C組(P0.05)。三組小鼠血清AMH水平在移植卵巢后均明顯低于切除卵巢前(P0.05)。移植后實(shí)驗(yàn)組兩組始基卵泡、竇卵泡凋亡率明顯高于對(duì)照A組(P0.05),移植后C組竇前卵泡凋亡率明顯高于A組和B組(P0.05)。A組小鼠卵巢組織移植后始基卵泡、竇前卵泡凋亡率明顯低于新鮮卵巢組織(P0.05)。B、C組小鼠卵巢組織始基卵泡、竇前卵泡及竇卵泡凋亡率在解凍后和移植后均明顯低于冷凍前(P0.05)。結(jié)論:1.程序化冷凍和玻璃化冷凍均會(huì)損傷小鼠的卵泡,并延長(zhǎng)其動(dòng)情周期。2.程序化冷凍和玻璃化冷凍均會(huì)造成小鼠卵巢竇卵泡的凋亡,從而影響AMH的分泌。但程序化冷凍的影響程度要小于玻璃化冷凍。3.冷凍對(duì)小鼠卵巢結(jié)構(gòu)和功能的影響在移植后可以得到恢復(fù),但不能達(dá)到去卵巢前水平。4.兩種冷凍方法相比,程序化冷凍在冷凍小鼠卵巢組織方面更具優(yōu)勢(shì)。
【圖文】：

1 小鼠動(dòng)情周期變化（Diff-Quik，×4hange of complete estrous in mice (Diff-Proestrus; B: Estrus; C: Metestrus; D: Die 組（對(duì)照組）小鼠卵巢組織卵泡凋亡ion of follicular apoptosis in the ovarian t group)A: Pre-transplantation(TUNEL, ×

圖 1 小鼠動(dòng)情周期變化（Diff-Quik，×40）Fig.1 The change of complete estrous in mice (Diff-Quik, ×40)A: Proestrus; B: Estrus; C: Metestrus; D: Diestrus
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R714.8

【參考文獻(xiàn)】

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4 朱夏琴;孫正怡;郁琦;甄t熑，

本文編號(hào)：2642457