發(fā)布時間：2020-04-25 16:10

【摘要】：目的:探討人羊膜間充質(zhì)干細胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)聯(lián)合PPCNg聚合物(polyethylene glycol citrate-co-N-isopropylacrylamide gelatin,PPCNg)在宮腔粘連(intrauterine adhesions,IUA)治療中的有效性和可行性。方法:將PKH26標記的hAMSCs在不同濃度PPCNg中培養(yǎng),48小時后熒光顯微鏡下察看細胞形態(tài),CCK-8法進行細胞增殖和毒性分析,評價PPCNg的材料毒性。雌性SD級大鼠隨機分為假手術(shù)組、單純IUA模型組(模型組)、PPCNg治療IUA組(PPCNg組)、hAMSCs治療IUA組(hAMSCs組)及PPCNg聯(lián)合hAMSCs治療IUA組(PPCNg+hAMSCs組)。建立IUA模型2周后,假手術(shù)組不處理,其余建模的各組分別宮腔內(nèi)注射PBS、PPCNg、hAMSCs的PBS懸液及hAMSCs的PPCNg懸液。宮腔注射2周后,子宮組織石蠟包埋、切片,通過HE染色和Masson染色檢測子宮內(nèi)膜腺體及纖維化狀況,免疫組化檢測子宮內(nèi)膜中TGF-β1、VEGF、VIM、α-SMA、CK19及E-Ca染色情況;冰凍切片熒光顯微鏡下觀察子宮內(nèi)膜中hAMSCs分布狀況。結(jié)果:(1)hAMSCs在PPCNg(濃度依次為0.625%PPCNg、1.25%PPCNg、2.5%PPCNg、5%PPCNg、10%PPCNg)中貼壁成長,狀態(tài)良好;(2)CCK-8法檢測實驗組(0.625%PPCNg、1.25%PPCNg、2.5%PPCNg、5%PPCNg、10%PPCNg)和陰性對照組的OD值,差異無統(tǒng)計學意義,材料毒性的分級為1級(合格);(3)與假手術(shù)組相比,模型組腺體數(shù)目下降(P=0.000),纖維化面積比增高(P=0.000);與模型組相比,PPCNg組、hAMSCs組及PPCNg+hAMSCs組的腺體數(shù)目不同程度增多(P=0.000),纖維化面積比不同程度減少;(4)與模型組相比,PPCNg組、hAMSCs組及PPCNg+hAMSCs組TGF-β1、VEGF、VIM及α-SMA的表達均不同程度降低,其中PPCNg+hAMSCs組明顯降低(P=0.000),而CK19及E-Ca表達則不同程度升高,其中PPCNg+hAMSCs組明顯升高(P=0.000);(5)PPCNg+hAMSCs組PKH26標記的hAMSCs遠遠多于hAMSCs組。結(jié)論:hAMSCs在PPCNg中生長良好,PPCNg無細胞毒性,可聯(lián)合hAMSCs治療IUA。PPCNg與hAMSCs聯(lián)用,有助于hAMSCs定植于子宮,減少hAMSCs流失,優(yōu)于單用hAMSCs,能更好的改善宮腔纖維化,增強子宮內(nèi)膜修復,防治再粘連,從而提升hAMSCs治療IUA的有效性。
【圖文】：

圖 1 熒光顯微鏡下各組細胞的形態(tài)（200X）re 1 Cell morphology of each group under fluorescence microscope（200X）g 細胞毒性檢測

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文 hAMSCs 在大鼠子宮內(nèi)膜中的分布情況見PKH26標記的hAMSCs的細胞膜呈紅色熒光，，所有被DAPI熒光。hAMSCs 組及 PPCNg+hAMSCs 組呈藍色及紅色熒光。光分布明顯少于 PPCNg+hAMSCs 組（見圖 2）。hAMSCs組 PPCNg+hAMSCs組
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R711.74

【參考文獻】

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本文編號：2640429