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人胎盤間充質(zhì)干細胞對妊娠期糖尿病大鼠血糖及胰島細胞形態(tài)學(xué)影響的研究

發(fā)布時間:2020-04-14 22:41
【摘要】:目的目前妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是影響妊娠結(jié)局的重要疾病之一,妊娠期血糖增高會產(chǎn)生一系列不良妊娠結(jié)局:巨大兒、新生兒低血糖、剖宮產(chǎn)增加等。目前對于妊娠期糖尿病的治療主要依靠胰島素干預(yù),但其無法從發(fā)病機制上治療妊娠期糖尿病。近年來,關(guān)于疾病的生物學(xué)治療越來越引起人們的重視,尤其是間充質(zhì)干細胞的相關(guān)研究。因此,為了間充質(zhì)干細胞能夠早日用于妊娠期糖尿病的治療,相關(guān)基礎(chǔ)研究尤為迫。因此我們利用妊娠期糖尿病鼠模型,來研究人胎盤來源間充質(zhì)干細胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)能否改善血糖水平,以及干預(yù)后胰島細胞形態(tài)學(xué)改變。方法本實驗所有胎盤均來自于正常足月剖宮產(chǎn)分娩的人胎盤組織。從胎盤中提取出間充質(zhì)干細胞,進行分離、培養(yǎng)及鑒定。倒置顯微鏡下觀察人胎盤來源間充質(zhì)干細胞形態(tài)學(xué)特征妊娠期糖尿病模型的制備采用“高脂高糖飲食+低劑量STZ腹腔注射”的方法。所有成模的鼠模型隨機分組。其中正常孕鼠組(A組)10只、GDM鼠未經(jīng)干預(yù)組(B組)10只、GDM鼠生理鹽水干預(yù)組(C組)10只、GDM鼠人胎盤來源干細胞干預(yù)組(D組)10只,然后實驗組給予人胎盤來源間充質(zhì)干細胞干預(yù),對照組給予等量的生理鹽水干預(yù)。所有大鼠于妊娠第6天、12天、18天檢測空腹血糖,并于妊娠第18天解剖取出各組大鼠胰腺組織做石蠟切片,于顯微鏡下觀察各組胰島細胞形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果1、分離獲得人胎盤來源間充質(zhì)干細胞呈梭形貼壁生長,生長狀態(tài)良好。通過流式細胞儀檢測其表面抗原表達情況,陽性表達CD44、CD105、CD1172、GDM各組與正常孕鼠組(A組)血糖比較:GDM各組血糖在妊娠第6天、12天、18天均高于正常孕鼠組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);GDM各組間比較:未干預(yù)組(B組)與生理鹽水干預(yù)組(C組)之間血糖水平相比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與B、C組相比,hPDMSCs干預(yù)組(D組)血糖水平降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);3、各組不同時間點空腹血糖變化:自妊娠第4天起GDM各組血糖趨于穩(wěn)定;給予人胎盤來源間充質(zhì)干細胞干預(yù)組空腹血糖自妊娠第6天起呈下降趨勢。4、各組GDM大鼠胰島組織有不同程度細胞壞死,胰島嚴重破壞,胰島細胞鏡下數(shù)量明顯減少;但人胎盤來源間充質(zhì)干細胞移植組的胰島細胞炎性反應(yīng)可見明顯減輕,炎性細胞浸潤明顯減少。結(jié)論尾靜脈途徑將人胎盤來源間充質(zhì)干細胞植入GDM鼠體內(nèi),能夠改善其血糖水平,病理結(jié)果提示可能通過修復(fù)受損的胰島細胞發(fā)揮作用。
【圖文】:

間充質(zhì)干細胞,胎盤,倒置顯微鏡,來源


未見明顯細胞懸浮,培養(yǎng)基屮未見明顯雜質(zhì)(見圖1)。逡逑?邋?邋'逡逑圖1邋3代人胎盤來源間充質(zhì)干細胞鏡卜'觀察逡逑倒置顯微鏡下觀察,融合度約70%邋(放大倍數(shù)分別為100X、400X)逡逑(二)

孕鼠,生理鹽水,光鏡,細胞


與B、C組比較,hPDMSCs干預(yù)組(D組)血糖水平降低,差異有統(tǒng)計學(xué)逡逑意義(尸<0.05);逡逑3.空腹血糖變化逡逑自妊娠第4天起GDM各組血糖趨于穩(wěn)定;給予人胎盤來源間充質(zhì)干細胞逡逑干預(yù)組空腹血糖自妊娠第6天起呈下降趨勢;逡逑(四)人胎盤來源間充質(zhì)干細胞移植后大鼠胰島組織病理變化逡逑細胞移植后丨4滅,正常孕鼠疽鵲盒翁,胞质丰富,螔凶许嵏胞浸润,辶x弦認儋拗翁嬖潁峁菇裘。生理盐水「?预组淫o菏棵饗約跎伲飾踝,,辶x閑翁芳,结诡櫩槩,细胞眹揖_磺,大量淋巴细胞浸润。干细胞十预组艺J馘義獻櫓鵲何趺饗愿納疲仔韻赴竺饗約跚。(见阁4)辶x

本文編號:2627794

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