【摘要】：目的:通過檢測不同病理類型卵巢惡性腫瘤及卵巢良性腫瘤患者手術(shù)前循環(huán)腫瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)染色體失衡水平,并與健康對照組對比,惡性腫瘤組血漿結(jié)果與相應(yīng)腫瘤組織中的染色體失衡狀況相比對,探討ctDNA在卵巢惡性腫瘤術(shù)前診斷及鑒別診斷方面的臨床價值。材料和方法:我們選取了自2016年1月1日起至2017年12月31日為止,收治于青島市市立醫(yī)院婦科中心病區(qū)的28名卵巢惡性腫瘤者、36名卵巢良性腫瘤患者以及4名交界性卵巢腫瘤患者的相關(guān)臨床資料。同時選取同期于青島市市立醫(yī)院進行健康查體的34例健康女性采集靜脈血,作為對照組。所有患者均于術(shù)前采集靜脈血液8ml,提取血漿后采用二代全基因組測序(WGS)方法測定ctDNA染色體失衡現(xiàn)象;并于術(shù)中采集患者卵巢腫瘤標(biāo)本,同樣方法進行測序,最后分析生物學(xué)信息并采用Cscore模型為ctDNA檢測結(jié)果賦值。比較惡性腫瘤組與良性腫瘤組、健康對照組ctDNA染色體失衡情況,比較惡性腫瘤組ctDNA與組織DNA染色體失衡的一致性,分析不同病理類型腫瘤組的Cscore分布,繪制惡性腫瘤組與健康對照組診斷的ROC曲線,及與良性腫瘤組鑒別診斷的ROC曲線。結(jié)果:惡性組82.14%(23/28)檢測出明顯的染色體失衡,且不局限于一條染色體,尤其對于高級別漿液性卵巢癌(HGSC),檢測陽性率達100%(18/18);交界性腫瘤存在0-3條不等染色體失衡;良性腫瘤組4例檢出1-2條染色體失衡;健康組未檢測到染色體失衡。通過對惡性腫瘤組ctDNA和組織DNA檢測結(jié)果對比,提示了兩者之間的高度一致性。對所有腫瘤按照病理類型進行Cscore比較,結(jié)果提示HGSC組Cscore明顯高于其他組別。通過Cscore正序排列,可以清楚地區(qū)分惡性腫瘤組與健康對照組,且得分最高的10例均為HGSC。利用Cscore數(shù)值繪制受試者工作特征曲線(ROC),計算曲線下面積AUC,用于評估該模型的診斷效能。HGSC與健康組對照,AUC為1.000。所有惡性腫瘤與健康組對照,AUC為0.8929。惡性腫瘤+交界性腫瘤組與健康組對照,AUC為0.8906。在卵巢腫瘤的良惡性鑒別診斷試驗中,如果不區(qū)分組織學(xué)亞型,采用所有惡性腫瘤樣本與良性組對比,AUC為0.8700;如果惡性腫瘤只采集HGSC的樣本與良性腫瘤樣本進行對比,AUC為0.9880。結(jié)論:1.卵巢惡性腫瘤樣本中ctDNA染色體失衡現(xiàn)象表現(xiàn)嚴(yán)重,尤其對于高級別漿液性卵巢惡性腫瘤(HGSC),此現(xiàn)象表現(xiàn)得更為突出。2.惡性腫瘤患者中ctDNA與腫瘤組織DNA染色體失衡呈現(xiàn)高度一致性,說明ctDNA是源自腫瘤組織的,攜帶有與腫瘤組織相一致的遺傳畸變信息,可能成為卵巢惡性腫瘤的標(biāo)志物。3.本研究應(yīng)用一種篩選模型,即Cscore評分,對卵巢惡性腫瘤進行了診斷和鑒別診斷,得到了相對理想的AUC,提示ctDNA可能在卵巢惡性腫瘤診斷和鑒別診斷方面具有一定的臨床參考價值,尚需進一步深入研究。
【圖文】：

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果1 各研究組 ctDNA 中的染色體失衡為了清楚地顯示不同組別的染色體失衡，對所有樣本計算每個染色體的 zscore，見圖 1。圖中，橫坐標(biāo)自左往右綠色區(qū)代表所有納入的卵巢惡性腫瘤患者，紫色區(qū)域代表4 例交界性卵巢腫瘤患者，明黃色區(qū)域代表 36 例卵巢良性腫瘤患者，枚紅色代表入組的 34 例健康對照個體。對于任意一條染色體 i，計算其 z score，若 z score 的絕對值（即｜zChri｜）小于 3，則定義為正常，即表示為底色淺灰色色塊；若 3＜｜zChri｜＜6，則定義為“輕度失衡”，圖中用藍色塊表示；若｜zChri｜＞6，則定義為“重度失衡”。圖中用紅色塊表示。

圖 2 組織與外周血染色體失衡對比圖我們的結(jié)果顯示：①同一惡性腫瘤患者中，血漿染色體失衡與其腫瘤組織的檢測結(jié)果高度匹配；個別個體出現(xiàn)了腫瘤組織 DNA 染色體失衡檢出，而 ctDNA 檢測為陰性結(jié)果。上述結(jié)果提示：②在血漿中檢測到的染色體失衡的確起源于腫瘤部位。組織和血漿樣本之間的細(xì)微差異可能是由于血漿 ctDNA 降解，，腫瘤異質(zhì)性等引起的。3 各不同病理類型組 Cscore將入組研究對象按照各自病理類型進行分組，得到以下組別（見圖 3）：（1）惡性組：高級別漿液性癌（HGSC）18 例、透明細(xì)胞癌（ClearCell）3 例、低級別漿液性癌（LGSC）3 例、轉(zhuǎn)移性癌（Metastatic）2 例和粘液性囊腺癌（CACM）1 例；（2）交界性組（Borderline）4 例；（3）良性組：子宮內(nèi)膜異位囊腫（EM）16 例、粘液性囊腺瘤（CAMO）6 例、畸胎瘤（Tera）11 例和其他良性腫瘤（Others）3 例。繪制盒圖（圖3）用以形象地表示所有不同病理類型中 ctDNA 計算所得 CScore。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.31

【參考文獻】

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