本文關(guān)鍵詞：miR-126、EGFL7和微血管密度在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見三大惡性腫瘤之一,其發(fā)病率低于宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌,但惡性程度最高,病情發(fā)展快,且由于缺乏有效的早期診斷指標(biāo),疾病發(fā)現(xiàn)時多已為中晚期,死亡率居婦科腫瘤疾病的第一位,目前國內(nèi)外有關(guān)卵巢癌的研究眾多,然而其發(fā)病機(jī)制仍不清楚。卵巢癌的早期癥狀不明顯、缺乏有效的早期診斷方法,70%患者在確診時已出現(xiàn)腹水、惡病質(zhì)等遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移晚期癥狀。卵巢癌預(yù)后差,雖然通過手術(shù)和化療等方法能夠顯著改善晚期卵巢癌患者的生存質(zhì)量,但5年生存率仍較低,僅在30%左右。因此,卵巢癌是威脅廣大女性生命健康的婦科腫瘤疾病。大多數(shù)卵巢癌起源于卵巢上皮組織,其中上皮性卵巢癌患者占卵巢癌總數(shù)的75%-90%。因此,研究上皮性卵巢癌發(fā)生和發(fā)展機(jī)制,找尋有效、敏感的標(biāo)記物及治療靶點、改善患者預(yù)后目前仍然是卵巢癌研究最重要的目標(biāo)。microRNA是近年來新發(fā)現(xiàn)的一類長21～25個核苷酸的小分子RNA。通過與其靶mRNA分子3’端非編碼區(qū)域(3'-UTR)互補(bǔ)配對使目標(biāo)mRNA分子受到翻譯水平調(diào)控或直接導(dǎo)致其降解,來參與調(diào)控細(xì)胞生長分化、能量代謝、凋亡等各個重要而基本的細(xì)胞生理過程。近年來研究發(fā)現(xiàn)microRNA與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后密切相關(guān)。在卵巢癌中microRNA也發(fā)揮重要作用,如miR-21[64]、miR-181a[65],其中miR-181a通過作用于其功能靶點Smad7,促進(jìn)TGF-β介導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化信號通路參與卵巢癌的侵襲、轉(zhuǎn)移過程。而miR-126在多種腫瘤中表達(dá)下調(diào),可能在腫瘤發(fā)生過程中發(fā)揮抑癌基因的作用,但其在卵巢癌中的研究在國內(nèi)外甚少且存在差異。類表皮生長因子域7(EGFL7)是在內(nèi)皮細(xì)胞中特異性表達(dá)的因子,在多種實體腫瘤中表達(dá)均增高,但其在卵巢癌中的表達(dá)及作用國內(nèi)外鮮有研究。miR-126基因定位于EGFL7基因7號內(nèi)含子內(nèi),同時在非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌等研究資料中提示EGFL7也是miR-126的靶基因。本研究通過qRT-PCR及免疫組化方法檢測了miR-126、EGFL7在上皮性卵巢癌的表達(dá)情況,及與微血管密度表達(dá)的相關(guān)性,以探討miR-126和EGFL7在上皮性卵巢癌發(fā)病機(jī)制中的作用,希望能為上皮性卵巢癌早期診斷、預(yù)后評估和治療提供新的思路和理論依據(jù)。目的研究不同卵巢上皮組織中miR-126、EGFL7和微血管密度的表達(dá),探討它們在上皮性卵巢癌發(fā)病機(jī)制及發(fā)展過程中的作用,并分析三者在上皮性卵巢癌組織中表達(dá)的相關(guān)性。研究對象和實驗方法1.研究對象：收集鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院及第三附屬醫(yī)院2011年3月-2014年3月手術(shù)標(biāo)本89例,正常組21例,良性組23例,惡性組45例。其中正常組卵巢取材于因良性宮體疾病行附件切除患者；惡性組卵巢組織取材于術(shù)前未行化療、放療等輔助治療上皮性卵巢腫瘤患者(按FIGO2008分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ、Ⅱ期12例,Ⅲ、Ⅳ期33例；低分化25例,中分化11例,高分化9例；漿液性囊腺癌29例,粘液性囊腺癌8例,子宮內(nèi)膜樣癌4例,透明細(xì)胞癌4例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移14例。所有病例均經(jīng)手術(shù)和病理證實�；颊吣挲g27-73(47.6±5.5)歲。經(jīng)過倫理委員會批準(zhǔn)及受試者同意后進(jìn)行收集。2.研究方法：對上述89例卵巢組織采用定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)方法檢測miR-126 mRNA的表達(dá),對其中45例卵巢癌組織中EGFL7 mRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測；對上述89例卵巢組織采用免疫組織化學(xué)SP法檢測EGFL7蛋白和微血管密度(CD34)的表達(dá)。3.統(tǒng)計學(xué)方法：采用SPSS 19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。miR-126相對表達(dá)量以M(P25-P75)表示,余定量資料以x±s表示。非正態(tài)定量資料比較應(yīng)用Kruskal-Wallis檢驗(組間比較用Nemeyi法)；定性資料比較用χ2檢驗；正態(tài)定量資料多組比較用單因素方差分析(組間比較用LSD-t法)、兩組比較用t檢驗。相關(guān)性分析采用秩和spearman法、Pearson積矩相關(guān)系數(shù)分析。檢驗水準(zhǔn)a=0.05,組間兩兩比較時檢驗水準(zhǔn)a'=a/比較次數(shù)=0.0167。結(jié)果l.miR-126 mRNA在正常組、良性組、惡性組中的表達(dá)量分別為2.865(1.491～4.879)、1.339(0.904～2.099)、0.310(0.209～0.858),存在顯著差異(P0.001)。其中在正常組、良性組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),在正常組、惡性組；良性組、惡性組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2. EGFL7蛋白表達(dá)陽性染色位于細(xì)胞漿,不僅位于血管內(nèi)皮細(xì)胞中,在腫瘤組織上皮細(xì)胞中也存在。EGFL7蛋白在正常組、良性組、惡性組中的陽性表達(dá)率分別為23.81%(5/21)、52.17%(12/23)、93.33%(42/45),存在顯著差異(P0.001)。其中在正常組、良性組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.0167)；在正常組、惡性組；良性組、惡性組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.0167)。3.CD34蛋白表達(dá)陽性代表組織中微血管密度的檢測。微血管密度在正常組、良性組、惡性組中的檢測值分別為6.133±2.090、11.478±2.337、21.893±3.223,存在顯著差異(P0.001)；兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.0167)。4.上皮性卵巢癌組織中,miR-126 mRNA的表達(dá)、EGFL7 mRNA的表達(dá)和MVD的檢測均與FIGO分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P0.05)；與病理類型、組織分化程度無關(guān)(P0.05)。5.上皮性卵巢癌組織中miR-126 mRNA與EGFL7 mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r1=-0.413;P=0.005);EGFL7 mRNA與MVD表達(dá)呈正相關(guān)(r2=0.362,P=0.015)；miR-126 mRNA與MVD表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r3=-0.909,P0.001)。結(jié)論1.在上皮性卵巢癌組織中miR-126異常低表達(dá),提示其可能參與上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展過程。2.在上皮性卵巢癌組織中EGFL7及微血管密度異常高表達(dá),提示其可能參與上皮性卵巢癌的發(fā)生及發(fā)展過程。3.在上皮性卵巢癌組織中miR-126和EGFL7的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),EGFL7和微血管密度的表達(dá)呈正相關(guān),miR-126和微血管密度的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),提示這三者可能通過某種機(jī)制共同參與上皮性卵巢癌的發(fā)生發(fā)展過程。
【關(guān)鍵詞】：上皮性卵巢癌 miR-126 EGFL7 MVD 免疫組化 定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 摘要4-8
• Abstract8-14
• 中英文縮略詞14-15
• 1 引言15-17
• 2 實驗標(biāo)本、試劑及儀器17-20
• 3 實驗方法20-26
• 4 實驗結(jié)果26-32
• 5 討論32-37
• 6 結(jié)論37-38
• 附圖38-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 綜述部分 EGFL7基因在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展45-70
• 參考文獻(xiàn)64-70
• 臨床實踐技能訓(xùn)練70-78
• 個人簡歷 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文和研究成果78-79
• 致謝79

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 婁艷輝;楊興升;王福玲;錢金花;黃煜;;miR-21在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2010年03期

2 Li Zhou;Jian Li;Yu-Pei Zhao;Jun-Chao Guo;Quan-Cai Cui;Wei-Xun Zhou;Tai-Ping Zhang;Wen-Ming Wu;Lei You;Hong Shu;;Prognostic significance of epidermal growth factor-like domain 7 in pancreatic cancer[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年05期

  本文關(guān)鍵詞：miR-126、EGFL7和微血管密度在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：257603