本文關(guān)鍵詞：玻璃化冷凍中冷凍因素對(duì)MⅡ小鼠卵母細(xì)胞的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討玻璃化冷凍中冷凍因素對(duì)小鼠卵母細(xì)胞存活率及其發(fā)育潛能的影響。方法:①根據(jù)不同平衡時(shí)間進(jìn)行分組:將卵母細(xì)胞隨機(jī)分為新鮮組、平衡時(shí)間5、10、20 min組(即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組),觀(guān)察Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組卵母細(xì)胞的存活率、透明帶破裂率、質(zhì)膜破裂率、卵周隙增寬率;對(duì)于解凍后存活的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精、培養(yǎng)與新鮮組比較觀(guān)察其發(fā)育潛能。②根據(jù)載體不同進(jìn)行分組:開(kāi)放式載體(OPS)與封閉式(CPS)載體分別凍存帶卵丘細(xì)胞(COC)或剝除卵丘細(xì)胞(OD)的小鼠卵丘復(fù)合體,復(fù)蘇后分別作體外受精—胚胎培養(yǎng),觀(guān)察其存活率及發(fā)育潛能。結(jié)果:①經(jīng)玻璃化冷凍后凍存卵母細(xì)胞的存活率Ⅰ、Ⅱ組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(81.9%vs57.3%,χ2=7.13,P0.05);Ⅱ、Ⅲ組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(57.3%vs25%,χ2=8.22,P0.05);Ⅰ、Ⅲ組間差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(81.9%vs25%,χ2=17.92,P0.01)。透明帶破裂率、質(zhì)膜破裂率、及卵周隙增寬率由于樣本例數(shù)少,未作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。新鮮組和冷凍組間受精率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(71.6%vs36%,χ2=13.92,P0.01)卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(97.6%vs94.4%,χ2=1.82,P0.05;95.2%vs88.2%,χ2=2.16,P0.05).②OPS組的存活率略高于CPS組,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(68%vs65.3%,χ2=1.32,P0.05)。OPS組內(nèi)COC組的復(fù)蘇率顯著高于DO組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(78.6%vs57.4%,χ2=11.82,P0.05),而COC組與DO組的受精率及囊胚率相比,均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。在CPS組同樣COC組的復(fù)蘇率(75.4%)顯著高于DO組(55.1%),有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(75.4%vs55.1%,χ2=11.98,P0.05),而兩組的受精率和囊胚形成率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,與OPS組是否包裹顆粒細(xì)胞凍存的結(jié)論一致。結(jié)論:①掌握合適的預(yù)平衡時(shí)間能夠避免小鼠卵母細(xì)胞冷凍損傷。平衡時(shí)間為5min組的卵母細(xì)胞存活率最高。②凍存復(fù)蘇后的存活卵受精后受精率下降,但受精后胎的發(fā)育潛能似乎未受很大影響③封閉式載體有效避免了潛在的污染問(wèn)題,但不同載體對(duì)卵子存活率無(wú)顯著影響。④卵丘細(xì)胞在玻璃化冷凍卵母細(xì)胞中可以起到保護(hù)作用,并對(duì)胚胎后期的發(fā)育有一定的改善。
【關(guān)鍵詞】：小鼠 卵母細(xì)胞 玻璃化冷凍 平衡時(shí)間 開(kāi)放式載體 封閉式載體
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R714.8
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英漢縮略詞對(duì)照表8-9
• 前言9-12
• 1 材料與方法12-16
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器12-13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法13-16
• 2 結(jié)果16-19
• 2.1 平衡時(shí)間對(duì)小鼠卵母細(xì)胞存活率以及形態(tài)學(xué)損傷特征的影響16-17
• 2.2 平衡時(shí)間對(duì)小鼠卵母細(xì)胞發(fā)育潛能的影響17-18
• 2.3 不同載體及是否拆除顆粒細(xì)胞對(duì)小鼠卵母細(xì)胞的影響18-19
• 附圖19-22
• 3 討論22-26
• 3.1 玻璃化冷凍原理及冷凍損傷22
• 3.2 冷凍中顆粒細(xì)胞的作用和冷凍載體的選擇22-24
• 3.3 平衡時(shí)間24-25
• 3.4 凍存卵的受精問(wèn)題25-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-30
• 綜述30-39
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄39-40
• 致謝40

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  本文關(guān)鍵詞：玻璃化冷凍中冷凍因素對(duì)MⅡ小鼠卵母細(xì)胞的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：257050