SAA對子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞VEGF表達影響的研究
發(fā)布時間:2017-03-20 00:04
本文關(guān)鍵詞:SAA對子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞VEGF表達影響的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:排卵障礙型子宮異常出血(Ovulatory disorders uterine bleeding,AUB-O)是一種常見婦科疾病,由下丘腦-垂體-卵巢軸神經(jīng)內(nèi)分泌失調(diào)所致的子宮異常出血,是在激素誘發(fā)下,子宮局部微環(huán)境因素發(fā)生改變的結(jié)果。目前對于排卵障礙型子宮異常出血的病理機制尚未完全清楚。我們前期研究運用SELDI差異蛋白組篩選技術(shù),發(fā)現(xiàn)排卵障礙型子宮異常出血患者血清淀粉樣蛋白A(Serum Amyloid A,SAA)水平升高了十余倍,且呈持續(xù)高水平狀態(tài),而血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在排卵障礙型子宮異常出血病人血清中顯著下降,但其病理生理學(xué)意義未明,推測高濃度SAA與VEGF相關(guān),進而可引起子宮內(nèi)膜修復(fù)中血管生成障礙,從而參與排卵障礙型子宮異常出血的發(fā)生與發(fā)展。本研究從體外在細胞水平研究SAA對人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞VEGF表達的影響,探討其在排卵障礙型子宮異常出血發(fā)病機制中的作用,為排卵障礙型子宮異常出血的診治提供一個新的靶點和新的血清監(jiān)測標(biāo)志物。方法:首先在體外分離和培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞。培養(yǎng)成功后分組,隨機分為0 mg/L、5mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L,SAA作用組(24h)以及20mg/LSAA作用0、6、12、36、72h組,每組設(shè)3個孔,即重復(fù)3次,通過實時熒光定量(RT-PCR)、q RT-PCR測定各組細胞VEGF m RNA轉(zhuǎn)錄水平;Western blot方法檢測h ESCs細胞VEGF蛋白的表達以及ELISA法定量檢測各組細胞培養(yǎng)上清中VEGF蛋白的分泌。并用SPSS 18.0軟件進行實驗數(shù)據(jù)分析及作圖。結(jié)果:在體外成功分離和培養(yǎng)了原代子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞。低濃度血清淀粉樣蛋白A(SAA,10mg/L)能升高子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞(h ESCs)VEGFmRNA、蛋白及分泌水平,但隨著SAA濃度(20mg/L)的升高,與對照組比較,VEGFmRNA水平、蛋白水平、分泌水平均顯著下降,以40mg/L效果最顯著。20mg/L的SAA作用h ESCs,可見在短時間內(nèi)(4h內(nèi))VEGFmRNA水平、蛋白水平、分泌水平顯著上升,但隨著時間的延長,其表達水平逐漸下降,以36h和72h的表達水平顯著低于對照組。結(jié)論:SAA通過影響子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞VEGF的表達從而參與排卵障礙型子宮異常出血的發(fā)病過程。
【關(guān)鍵詞】:排卵障礙型子宮異常出血 血管內(nèi)皮生長因子 血清淀粉樣蛋白A
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R711.74
【目錄】:
- 摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 主要縮略詞9-10
- 前言10-15
- 1 材料與方法15-25
- 2 結(jié)果25-38
- 3 討論38-41
- 4 結(jié)論41-42
- 參考文獻42-48
- 文獻綜述48-57
- 參考文獻53-57
- 致謝57
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本文編號:256797
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