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子宮內(nèi)膜異位癥間質(zhì)細(xì)胞中miRNA-150的表達(dá)及其對CXCR4的影響

發(fā)布時間:2019-08-26 15:13
【摘要】:目的:探討子宮內(nèi)膜異位癥(EMT)間質(zhì)細(xì)胞微小RNA-150(miRNA-150)的表達(dá)情況,并分析是否通過調(diào)控趨化因子受體4(CXCR4)的表達(dá)參與EMT的發(fā)生、發(fā)展。方法:選取2015年7月至2016年10月因EMT在天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院進行腹腔鏡手術(shù)患者65例,因卵巢單純囊腫行腹腔鏡手術(shù)患者70例。留取EMT患者的宮腔內(nèi)膜組織和病灶異位內(nèi)膜組織及卵巢單純囊腫患者宮腔內(nèi)膜。消化組織培養(yǎng)內(nèi)膜細(xì)胞,免疫熒光染色鑒定異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞,實時熒光定量PCR(RTPCR)檢測細(xì)胞中miRNA-150的相對表達(dá)量;內(nèi)膜細(xì)胞用脂質(zhì)體2000(lipofectamine2000)轉(zhuǎn)染miRNA-150類似物(miRNA-150mimics)及抑制物(miRNA-150 inhibitor)。轉(zhuǎn)染48小時后RT-PCR檢測miRNA-150及CXCR4 mRNA相對表達(dá)量,并用流式細(xì)胞術(shù)檢測CXCR4陽性細(xì)胞表達(dá)百分?jǐn)?shù)。結(jié)果:miRNA-150在異位內(nèi)膜細(xì)胞與在位內(nèi)膜細(xì)胞內(nèi)表達(dá)顯著降低(P0.01)。轉(zhuǎn)染miRNA-150mimics 48小時后RT-PCR結(jié)果提示CXCR4 mRNA表達(dá)增加(P0.01),流式細(xì)胞結(jié)果提示CXCR4陽性細(xì)胞百分比增加(P0.05);轉(zhuǎn)染miRNA-150inhibitor后CXCR4mRNA低表達(dá)(P0.01),CXCR4陽性細(xì)胞百分比減少(P0.05)。結(jié)論:miRNA-150在EMT組織中低表達(dá),并可能通過調(diào)控CXCR4的表達(dá)參與EMT的發(fā)生、發(fā)展。
[Abstract]:Aim: to investigate the expression of microRNA-150 (miRNA-150) in Leydig cells of (EMT) in Endometriosis and to analyze whether it is involved in the occurrence and development of EMT by regulating the expression of chemokine receptor 4 (CXCR4). Methods: from July 2015 to October 2016, 65 patients underwent laparoscopic surgery in Tianjin Central Obstetrics and Gynecology Hospital for EMT and 70 patients underwent laparoscopic surgery for simple ovarian cysts. The uterine intima and ectopic intima of patients with EMT and simple ovarian cysts were taken. The intimal cells were cultured in digestive tissue and identified by immunofluorescence staining. The relative expression of miRNA-150 in the cells was detected by real-time fluorescence quantitative PCR (RTPCR). The intimal cells were transfected with liposomes 2000 (lipofectamine2000) into miRNA-150 analogues (miRNA-150mimics) and inhibitors (miRNA-150 inhibitor). The relative expression of miRNA-150 and CXCR4 mRNA was detected by RT-PCR 48 hours after transfection, and the percentage of CXCR4 positive cells was detected by flow cytometry. Results: the expression of miRNA-150 in ectopic intimal cells and eutopic intimal cells was significantly decreased (P 0.01). After 48 hours of miRNA-150mimics transfer, the expression of CXCR4mRNA increased (P01), the percentage of CXCR4 positive cells increased (P05), and the expression of CXCR4mRNA decreased (P01) and the percentage of CXCR4 positive cells decreased (P05) after miRNA-150inhibitor transfer. Conclusion: the expression of miRNA-150 is low in EMT, and it may be involved in the occurrence and development of EMT by regulating the expression of CXCR4.
【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院;天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院;
【分類號】:R711.71

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本文編號:2529393

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