【摘要】：目的:研究宮頸癌細胞系C33a和Siha中核糖核苷酸還原酶小亞基M2(RRM2)表達與細胞對吉西他濱(Gem)敏感性的相關性。方法:以0.1~3.2μmol/L Gem處理C33a細胞,以0.5~512μmol/L Gem處理Siha細胞,72 h后用MTT法測定細胞活力,計算半數(shù)抑制濃度(IC50);使用Western blot法和逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應檢測各細胞中RRM2表達;采用濃度梯度倍增和大劑量沖擊相結(jié)合的方法對Siha細胞進行Gem耐藥誘導培養(yǎng),構(gòu)建Siha/Gem耐藥細胞株;在Siha/Gem細胞中,使用RNA干擾技術敲低RRM2表達并檢測敲低前后Gem對細胞的IC50。結(jié)果:Gem對C33a、Siha細胞的IC50分別為0.63、16.8μmol/L。與C33a細胞比較,Siha細胞中RRM2的表達較高。與Siha細胞相比,Siha/Gem耐藥細胞(耐藥指數(shù)為16.26)中RRM2表達增強。Gem對敲低RRM2表達的Siha/Gem耐藥細胞的IC50降低,其逆轉(zhuǎn)耐藥倍數(shù)為4.24。結(jié)論:宮頸癌細胞系中RRM2表達可能與細胞對Gem的敏感性呈負相關,敲低RRM2表達可增加細胞對Gem的敏感性。
[Abstract]:Aim: to investigate the relationship between the expression of ribonucleotide reductase small subunit M2 (RRM2) and the sensitivity to gemcitabine (Gem) in cervical cancer cell lines C33a and Siha. Methods: C33a cells were treated with 0.1 渭 mol/L Gem and Siha cells were treated with 0.5 渭 mol/L Gem. After 72 h, the cell viability was determined by MTT assay, the half inhibitory concentration (IC50) was calculated, and the expression of RRM2 was detected by Western blot and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The Siha cells were induced to be resistant to Gem by the combination of concentration gradient doubling and high dose shock. In Siha/Gem cells, RNA interference technique was used to lower the expression of RRM2 and to detect the IC50. of Gem on the cells before and after the knockout. Results: the IC50 of Gem on C33a Siha cells was 0.63n16.8 渭 mol/L., respectively. The expression of RRM2 in Siha cells was higher than that in C33a cells. Compared with Siha cells, the expression of RRM2 was increased in Siha/Gem resistant cells (drug resistance index was 16.26). The IC50 expression of Siha/Gem resistant cells with low RRM2 expression was decreased, and the reversal multiple of Gem resistance was 4.24. Conclusion: the expression of RRM2 in cervical cancer cell line may be negatively correlated with the sensitivity of the cell to Gem, and the low expression of RRM2 may increase the sensitivity of the cell to Gem.
【作者單位】： 中山大學附屬第三醫(yī)院
【分類號】：R737.33

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