【摘要】：研究背景： 子宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)高發(fā)的惡性腫瘤之一，近年來該病的發(fā)病趨勢呈年輕化現(xiàn)象，嚴重威脅女性身體健康，并影響生活質(zhì)量。宮頸癌的發(fā)生發(fā)展是多種因素和多種基因共同參與的復雜過程，目前已經(jīng)明確宮頸癌的始動因素主要為HPV持續(xù)感染，病毒基因組整合宿主細胞DNA后合成的E6/E7蛋白介導P53和Rb泛素化降解，激活端粒酶活性，導致宮頸上皮細胞脫離正常的分化程序、進入異常細胞周期、發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。HPV轉(zhuǎn)化細胞首先發(fā)生宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervicalintraepithelial neoplasia，CIN），經(jīng)過CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ，最終發(fā)展為宮頸癌。HPV轉(zhuǎn)化細胞除了可引起P53和Rb蛋白水平下調(diào)外，還會導致多種基因表達異常，抑癌基因RAR-β2就是其中的關鍵基因之一。 RAR-β2是促進上皮細胞分化的重要調(diào)控因子，也是介導維甲酸發(fā)揮調(diào)控上皮細胞生長分化凋亡方面的關鍵受體，通過誘導分化，具有一系列的抑癌作用，多種腫瘤中均呈現(xiàn)降低或缺失現(xiàn)象，被認為是一個抑癌基因，在腫瘤的演進中扮演關鍵的角色。RAR-β2的表達可以誘導宮頸癌HeLa、SiHa細胞分化，降低其惡性生物學行為，通過轉(zhuǎn)染RAR-β2的肺癌細胞發(fā)現(xiàn)，RAR-β2誘導肺癌細胞分化而增加凋亡，其缺失與腫瘤組織的分化程度有關。上皮細胞是通過正常的分化走向正常的生理衰老死亡，而不斷的進行新陳代謝。Involucrin作為上皮細胞終末分化早期的一個標記，也是腫瘤組織分化程度的一個標記。只有在上皮細胞分化成熟時才表達，腫瘤組織中細胞異型性增加、分化異常，呈去分化狀態(tài)，Involucrin的表達也就隨之減少，組織分化程度逐漸降低。 表觀遺傳是由生物學家Conrad Waddington在1939年首次提出，目前，表觀遺傳被定義為DNA序列不發(fā)生變化，而基因表達卻發(fā)生了可遺傳的改變，主要包括DNA甲基化、組蛋白修飾、染色質(zhì)重塑、非編碼RNA等等，其中組蛋白乙�；揎検怯葹橹匾且环N重要基因表達調(diào)控的模式。通常認為組蛋白氨基末端賴氨酸殘基高度乙酰化使染色質(zhì)結(jié)構(gòu)松散，DNA與組蛋白八聚體解離，核小體結(jié)構(gòu)松弛，從而使各種轉(zhuǎn)錄因子和協(xié)同因子能與DNA結(jié)合位點特異性結(jié)合，有利于基因轉(zhuǎn)錄激活，而組蛋白低乙�；谷旧|(zhì)結(jié)構(gòu)卷縮導致基因沉默或抑制，組蛋白的高乙�；偷鸵阴；瘎討B(tài)平衡的調(diào)控靶基因的穩(wěn)定表達，維持細胞正常的生理功能和表型。當組蛋白乙�；癄顟B(tài)失衡，即乙�；浇档蜁r，將引起相應的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因轉(zhuǎn)錄表達異常，影響細胞周期、分化、增殖、凋亡相關基因的表達，而導致腫瘤的發(fā)生和進展，是腫瘤病理生理過程中重要的分子事件之一。宮頸癌發(fā)生過程中，表觀遺傳改變不僅可影響HPV致癌基因的異常表達，而且還可導致宿主細胞多個癌基因的激活和抑癌基因的失活。 本研究利用臨床組織標本檢測組蛋白乙�；揎椝脚c抑癌基因RAR-β2在不同病變級別宮頸組織中的表達情況，分析兩者的相關性及與宮頸病變程度、臨床病理特征的關系，探討兩者在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用。 目的： 探討組蛋白乙酰化修飾水平對RAR-β2表達的調(diào)控作用，并分析其與宮頸病變程度之間的相關性。 方法： 1.分別選取正常宮頸20例、CINⅡ-Ⅲ29例、子宮頸鱗狀細胞癌（cervical squamouscell carcinoma,SCC）80例存檔于病理科的石蠟包埋組織標本，采用免疫組織化學染色SP法檢測AcH3、RAR-β2、Involucrin的表達水平，半定量積分法判定染色陽性結(jié)果。 2.收集正常宮頸6例、CINⅡ-Ⅲ8例、SCC10例新鮮組織標本，采用Western blotting檢測AcH3、RAR-β2、Involucrin的表達水平，膠片成像條帶灰度分析顯影結(jié)果。 3.分析數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件行χ2檢驗和t檢驗，各指標間相關性采用Pearson correlation分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果： 1.免疫組化檢測AcH3、RAR-β2、Involucrin在正常宮頸、CINⅡ-Ⅲ和SCC組織中的表達顯示，隨著宮頸病變程度加重，三者的表達逐漸降低，甚至缺失，各組間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 2.組蛋白乙�；脚cRAR-β2表達的呈正相關性（r=0.734，P＜0.05），隨著宮頸病變的進展，兩者的表達同步降低。 3.組蛋白乙酰化水平和RAR-β2的表達均與宮頸病變程度呈負相關性（r=－0.547（AcH3），r=－0.585（RAR-β2），P＜0.05），，即宮頸病變程度越重，兩者的表達越低。 4.Western blotting檢測AcH3、RAR-β2、Involucrin在正常宮頸、CINⅡ-Ⅲ和SCC組織中的表達顯示，與免疫組化結(jié)果一致，即隨著宮頸病變程度加重，三者的表達依次降低，甚至缺失，各組間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 5.免疫組化檢測AcH3、RAR-β2、Involucrin在SCC高、中、低分化組織中的表達顯示，三者在高分化組織中的表達高于中、低分化組織，低分化組織中三者的表達明顯缺失，即隨著分化程度的降低，三者的表達依次降低，甚至缺失。 6.組蛋白乙�；健AR-β2的表達在SCC臨床病理特征中分析顯示，兩者與臨床分期、有無盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關，而與腫瘤組織的分化程度有關，兩者在高、中、低分化組織中的比較存在明顯差異，具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 7.組蛋白乙�；脚cRAR-β2的表達在SCC組織中呈正相關性（r=0.427，P＜0.05）。 8.Western blotting檢測AcH3、RAR-β2、Involucrin在SCC高、中、低分化組織中的表達顯示，與免疫組化結(jié)果一致，即隨著分化程度的降低，三者的表達依次降低，甚至缺失，各組間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 結(jié)論： 1.宮頸上皮細胞RAR-β2的表達受組蛋白乙�；揎椝降恼{(diào)控。 2.組蛋白乙�；潭群蚏AR-β2的表達水平與宮頸病變進展密切相關，可作為宮頸病變進展風險和預后的評價指標及可能的治療靶點。
[Abstract]:Background of the study: Cervical cancer is one of the most prevalent malignant tumors in the female reproductive system. In recent years, the trend of the disease is young, which seriously threatens the health of women and affects life. The development of cervical cancer is a complex process involving multiple factors and multiple genes involved in the development of cervical cancer. It is now clear that the initial dynamic factors of cervical cancer are HPV persistent infection, and the E6/ E7 protein synthesized after the whole host cell DNA of the viral genome mediates the degradation of P53 and Rb ubiquitination, and activates telomerase. Activity, cause cervical epithelial cells to break out of normal differentiation procedure, enter abnormal cell cycle, occur malignant First, cervical intraepithelial neoplasia (CIN) occurs in HPV-transformed cells. CIN 鈪

本文編號：2264508