【摘要】：目的:探討Matriptase與子宮內(nèi)膜癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的相關(guān)性。方法:采用熒光定量PCR和Western blot法檢測HEC-1A、HEC-1B和RL952細胞中Matriptase、HAI-1 mRNA和蛋白表達水平;構(gòu)建Matriptase基因SiRNA慢病毒載體,采用RNA干擾技術(shù),對Matriptase高表達的HEC-1A和RL952細胞進行瞬時轉(zhuǎn)染,從而達到抑制Matriptase基因表達水平的目的。應(yīng)用細胞劃痕實驗及穿膜小室實驗觀察干擾前后癌細胞體外侵襲及遷移能力的改變。結(jié)果:熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示,Matriptase和HAI-1 mRNA在HEC-1A細胞(0.2123±0.021和0.2827±0.049)和RL-952細胞(0.1778±0.013和0.2420±0.032)中為均陽性表達;在HEC-1B細胞中為陰性表達(0.000695±0.00012和0.00263±0.00043)。Western blot結(jié)果顯示,Matriptase和HAI-1在HEC-1A細胞和RL-952細胞中為陽性表達,在HEC-1B細胞中為陰性表達。轉(zhuǎn)染siRNA后,HEC-1A細胞和RL-952細胞的Matriptase mRNA和蛋白表達水平顯著下降,抑制率達80%以上,HAI-1表達水平未見明顯改變,Matriptase/HAI-1比值明顯降低(HEC-1A:0.75 vs 0.11,P0.01;RL-952:0.0.73 vs 0.12,P0.01)。細胞劃痕實驗和穿膜小室實驗顯示,癌細胞體外侵襲及遷移能力顯著下降。結(jié)論:Matriptase表達水平與子宮內(nèi)膜癌細胞侵襲遷移能力呈正相關(guān),Matriptase/HAI-1比值降低亦可能抑制癌細胞的侵襲遷移。
[Abstract]:Objective: to investigate the relationship between Matriptase and invasion and metastasis of endometrial cancer cells. Methods: the expression levels of Matriptase,HAI-1 mRNA and protein in HEC-1A,HEC-1B and RL952 cells were detected by fluorescence quantitative PCR and Western blot, and the Matriptase gene SiRNA lentivirus vector was constructed. HEC-1A and RL952 cells with high expression of Matriptase were transfected by RNA interference technique. In order to achieve the purpose of inhibiting the expression level of Matriptase gene. Cell scratch test and transmembrane chamber test were used to observe the invasion and migration ability of cancer cells before and after interference. Results: the results of fluorescence quantitative PCR showed that both matriptase and HAI-1 mRNA were positive in HEC-1A cells (0.2123 鹵0.021 and 0.2827 鹵0.049) and RL-952 cells (0.1778 鹵0.013 and 0.2420 鹵0.032), and negative in HEC-1B cells (0.000695 鹵0.00012 and 0.00263 鹵0.00043). Western blot showed that matriptase and HAI-1 were positive in HEC-1A cells and RL-952 cells. Negative expression was found in HEC-1B cells. After transfection of siRNA, the expression of Matriptase mRNA and protein in HEC-1A cells and RL-952 cells decreased significantly, and the inhibition rate was more than 80%. There was no significant change in the ratio of Matriptase-1 / HAI-1 (HEC-1A:0.75 vs 0.11p0.01RL-952: 0.73 vs 0.12P0.01). Cell scratch assay and transmembrane chamber test showed that the ability of invasion and migration of cancer cells in vitro decreased significantly. Conclusion there is a positive correlation between the expression of 1: Matriptase and the ability of invasion and migration of endometrial cancer cells. The decrease of the ratio of Matriptase- / HAI-1 may also inhibit the invasion and migration of endometrial cancer cells.
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學(xué)教學(xué)醫(yī)院福建省婦幼保健院婦科腫瘤實驗室;福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】：福建省自然科學(xué)基金(No:2012J01310)
【分類號】：R737.33

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本文編號：2227020