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miRNA-497抑制卵巢癌細(xì)胞中FASN的表達(dá)

發(fā)布時間:2018-07-21 17:49
【摘要】:目的:研究miRNA-497在上皮性卵巢癌組織/細(xì)胞中的表達(dá)情況,miRNA-497對脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FASN)表達(dá)水平的影響,探討miRNA-497與FASN之間的關(guān)系,為臨床卵巢癌診治以及選擇性靶向藥物應(yīng)用提供新的實驗研究依據(jù)。方法:q RT-PCR分析10例上皮性卵巢癌組織及10例正常上皮性卵巢組織中miRNA-497、FASN的表達(dá)水平,Person相關(guān)性分析二者表達(dá)水平有無相關(guān)性。從卵巢癌細(xì)胞株SKOV3、A2780中篩選出miRNA-497表達(dá)量較低的SKOV3細(xì)胞株,轉(zhuǎn)染miRNA-497 mimics、miRNA-497 inhibitor至卵巢癌細(xì)胞株SKOV3中,轉(zhuǎn)染miRNA-497 mimics control,miRNA-497 inhibitor control作為陰性對照,未轉(zhuǎn)染組為空白對照,q RT-PCR檢測不同組中FASN的m RNA的表達(dá)情況,Western blot分析各組細(xì)胞中FASN蛋白表達(dá)改變情況。結(jié)果:1miRNA-497在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)較正常卵巢組織明顯降低,而FASN基因卻存在異常高表達(dá);Pearson相關(guān)性分析表明,卵巢癌組織和正常卵巢組織中miR-497與FASN m RNA表達(dá)存在負(fù)相關(guān)(r=-0.458 84,P0.01);2miRNA-497可以調(diào)控FASN的表達(dá)。與對照組相比,增加miRNA-497的表達(dá)后FASN的蛋白及m RNA表達(dá)水平明顯降低;抑制miNRA-497的表達(dá)可增加FASN蛋白及m RNA的表達(dá)。結(jié)論:miRNA-497在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)較正常卵巢組織明顯降低,而FASN基因卻存在異常高表達(dá),二者表達(dá)水平存在負(fù)相關(guān);miRNA-497能夠抑制卵巢癌SKOV3細(xì)胞中FASN的表達(dá),FASN可能是miRNA-497的靶基因。
[Abstract]:Objective: to study the expression of miRNA-497 in epithelial ovarian cancer tissues and to investigate the effect of miRNA-497 on the expression of fatty acid synthase (fatty acid synthetase (fatty acid synthetase), and to explore the relationship between miRNA-497 and FASN. To provide a new experimental basis for the diagnosis and treatment of ovarian cancer and the application of selective targeting drugs. Methods the expression level of miRNA-497FASN in 10 cases of epithelial ovarian carcinoma and 10 cases of normal epithelial ovarian tissues were analyzed by RT-PCR and the correlation between the expression level of miRNA-497 FASN and that of person was analyzed. SKOV3 cell line with low expression of miRNA-497 was selected from ovarian cancer cell line SKOV3, and transfected into ovarian cancer cell line SKOV3 by transfection of miRNA-497 mimicssimiRNA-497 inhibitor, and transfected miRNA-497 mimics control-miRNA-497 inhibitor control as negative control. The mRNA expression of FASN was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) in the untransfected group. Western blot was used to analyze the changes of FASN protein expression in different groups. Results the expression of miRNA-497 in epithelial ovarian carcinoma was significantly lower than that in normal ovarian tissues, while the expression of FASN gene was significantly higher than that in normal ovarian tissues. Pearson correlation analysis showed that the expression of FASN gene in epithelial ovarian carcinoma was significantly lower than that in normal ovarian tissues. There was a negative correlation between miR-497 and FASN mRNA expression in ovarian cancer and normal ovarian tissues (r-0.45884, P0.01). MiRNA-497 could regulate the expression of FASN. Compared with the control group, the expression of FASN protein and mRNA decreased significantly after increasing the expression of miRNA-497, and the expression of FASN protein and mRNA increased by inhibiting the expression of miNRA-497. Conclusion the expression of 10 miRNA-497 in epithelial ovarian carcinoma is significantly lower than that in normal ovarian tissues, but FASN gene is highly expressed. There was a negative correlation between the two expression levels. MiRNA-497 could inhibit the expression of FASN in ovarian cancer SKOV3 cells. FASN might be the target gene of miRNA-497.
【作者單位】: 東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院婦產(chǎn)科;興化市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院;南京市第二醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【分類號】:R737.31

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本文編號:2136306

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