發(fā)布時(shí)間：2018-05-28 18:20

  本文選題：子宮頸癌 + 微小RNA--p��； 參考：《山東醫(yī)藥》2017年05期

【摘要】：目的探討miR-497-5p對(duì)人宮頸癌細(xì)胞(He La)增殖的抑制作用及機(jī)制。方法將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人宮頸癌He La細(xì)胞隨機(jī)分為兩部分,第一部分細(xì)胞隨機(jī)分為四組:miR-497-5p mimics NC+IKCa1 3'端非翻譯區(qū)(3'-URT)野生型雙熒光素酶重組質(zhì)粒載體(IKCa1-wt)轉(zhuǎn)染組、miR-497-5p mimics+IKCa1-wt轉(zhuǎn)染組、miR-497-5p mimics NC+3'-URT突變型雙熒光素酶重組質(zhì)粒載體(IKCa1-mut)轉(zhuǎn)染組、miR-497-5p mimics+IKCa1-mut轉(zhuǎn)染組,分別轉(zhuǎn)染相應(yīng)質(zhì)粒48 h,用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)He La細(xì)胞熒光素酶活性。第二部分細(xì)胞隨機(jī)分為三組:miR-497-5p mimics轉(zhuǎn)染組、miR-497-5p mimics NC轉(zhuǎn)染組和空白對(duì)照組,分別轉(zhuǎn)染相應(yīng)質(zhì)粒,用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞IKCa1 mRNA表達(dá),Western boltting法檢測(cè)細(xì)胞IKCa1蛋白表達(dá),CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力。結(jié)果第一部分細(xì)胞中的miR-497-5p mimics+IKCa1-wt轉(zhuǎn)染組熒光素酶活性較其他三組降低(P均0.05),其他三組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05),證實(shí)miR-497-5p與IKCa1 3'-URT存在特異性結(jié)合位點(diǎn)。第二部分細(xì)胞中的miR-497-5p mimics轉(zhuǎn)染組IKCa1 mRNA、蛋白的相對(duì)表達(dá)量較其他兩組降低(P均0.05),其他兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。第二部分細(xì)胞培養(yǎng)24、48、72、96 h,miR-497-5p mimics轉(zhuǎn)染組增殖能力均較其他兩組降低(P均0.05),其他兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。結(jié)論 miR-497-5p可以通過(guò)負(fù)向調(diào)控IKCa1基因表達(dá)以抑制宮頸癌細(xì)胞增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect and mechanism of miR-497-5p on the proliferation of human cervical cancer cell line he La. Methods Human cervical cancer He-La cells in logarithmic phase were randomly divided into two parts. The first part was randomly divided into four groups: MiR-497-5p mimics NC IKCa1 3'untranslated region 3'-URT) wild-type double-luciferase recombinant plasmid vector IkCa1-wt) transfection group (miR-497-5p mimics IKCa1-wt transfection group) and miR-497-5p mimics NC 3'-URT mutant vector IKCa1-mutated group (MIR-497-5p mimics IKCa1-mut transfection group). The luciferase activity of He-La cells was detected by double luciferase reporter gene detection system at 48 h after transfection of corresponding plasmids. The second part of cells were randomly divided into three groups: 1 miR-497-5p mimics transfection group (n = 10) and control group (n = 10). The corresponding plasmids were transfected respectively. The expression of IKCa1 protein was detected by qRT-PCR technique and the expression of IKCa1 protein was detected by CCK-8 method. Results the luciferase activity in the miR-497-5p mimics IKCa1-wt transfection group was lower than that in the other three groups (P < 0.05), but there was no significant difference among the other three groups (P < 0.05), which confirmed the existence of specific binding sites between miR-497-5p and IKCa1 3'-URT. In the second part, the relative expression of IKCa1 mRNAs in the miR-497-5p mimics transfection group was lower than that in the other two groups (P 0.05), but there was no significant difference between the other two groups (P 0.05). In the second part, the proliferation ability of the mimics transfected group was significantly lower than that of the other two groups, but there was no significant difference between the other two groups. Conclusion miR-497-5p can inhibit the proliferation of cervical cancer cells by negatively regulating the expression of IKCa1 gene.
【作者單位】： 西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院;
【基金】：四川省衛(wèi)生廳科研基金資助項(xiàng)目(110373) 四川省瀘州市科技局科研項(xiàng)目(2013LZLY-J30)
【分類(lèi)號(hào)】：R737.33

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張明輝,安廣宇,董寧征,白霞,阮長(zhǎng)耿;血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子165對(duì)K562細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];中華血液學(xué)雜志;2005年09期

2 成海燕;彭應(yīng)梅;于建春;韓景獻(xiàn);;腦細(xì)胞增殖研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年02期

3 ;對(duì)人類(lèi)生老病死奧秘的最新闡釋——細(xì)胞增殖、分化與凋亡[J];山東中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1993年04期

4 劉勇,路名芝;細(xì)胞增殖調(diào)控與腫瘤發(fā)生[J];九江醫(yī)學(xué);1997年04期

5 劉勇;腫瘤細(xì)胞增殖調(diào)控的研究進(jìn)展[J];實(shí)用癌癥雜志;1997年02期

6 周劍濤,徐久元;P21 CIP1/WAF1/SDI1與細(xì)胞增殖調(diào)控[J];九江醫(yī)學(xué);1999年04期

7 鄭瑞玉,陳澤紅;胰母細(xì)胞增殖癥手術(shù)治療護(hù)理要點(diǎn)[J];護(hù)士進(jìn)修雜志;2001年03期

8 Kase S.;SaitoW.;YokoiM. ;王文軍;;人類(lèi)特發(fā)性視網(wǎng)膜前膜細(xì)胞增殖及谷氨酰胺合成酶的表達(dá)[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘.眼科學(xué)分冊(cè);2006年04期

9 陳潔;李瑞明;方娟;盧志勇;阮緒芝;;siRNA-FAM92A1-289對(duì)HeLa細(xì)胞增殖的影響[J];湖北醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào);2011年02期

10 石淙;萬(wàn)臘根;;細(xì)胞增殖的檢測(cè)方法[J];實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2012年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 王瀟;高瑞蘭;錢(qián)煦岱;林筱潔;陳小紅;尹利明;;大黃素對(duì)K562細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 王瀟;錢(qián)煦岱;陳曉紅;林筱潔;尹利明;高瑞蘭;;大黃素對(duì)K562細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];2009年浙江省中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血液病學(xué)術(shù)年會(huì)、浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)血液病學(xué)術(shù)年會(huì)暨國(guó)家級(jí)中西醫(yī)結(jié)合血液病新進(jìn)展繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

3 鄧錦波;牛艷麗;范文娟;劉彬;;死亡受體5與神經(jīng)細(xì)胞增殖[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年

4 鄧錦波;牛艷麗;范文娟;劉彬;;死亡受體5與神經(jīng)細(xì)胞增殖[A];河南省細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第二屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2009年

5 鄭志宏;胡建達(dá);陳英玉;鄭靜;林敏輝;;大黃素對(duì)K562細(xì)胞增殖、凋亡的影響[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

6 楊林;陶天遵;吳瑩;李曉蕊;劉楓晨;劉偉;張淑云;聞穎;陶樹(shù)清;吳麗萍;;地塞米松對(duì)成人骨細(xì)胞增殖和分化影響的實(shí)驗(yàn)研究(摘要)[A];第五次全國(guó)創(chuàng)傷康復(fù)暨第七次全國(guó)運(yùn)動(dòng)療法學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

7 李墨;韓艷玲;劉俊;吳非;韓昱晨;;RACK1直接與MCM7結(jié)合,促進(jìn)細(xì)胞增殖、運(yùn)動(dòng)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)日程及論文匯編[C];2010年

8 徐楓;趙玫;杜菲;林梁;周啟兵;余權(quán);黃常志;;Hsp 70與T細(xì)胞增殖的相關(guān)研究[A];第七屆全國(guó)腫瘤生物治療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2001年

9 陳勇;呂合作;胡建國(guó);李柏青;;可刺激人γδT細(xì)胞增殖的結(jié)核桿菌多肽抗原的生物學(xué)特性分析[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

10 黃文榮;王立生;高春記;魯茁壯;王華;段海峰;達(dá)萬(wàn)明;;rhG-CSF動(dòng)員對(duì)T細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒的影響[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 四川省廣元市元壩中學(xué) 葉靜;《細(xì)胞增殖》第1課時(shí)[N];學(xué)知報(bào);2011年

2 ;自身細(xì)胞可制再生血管[N];中國(guó)環(huán)境報(bào);2000年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李因濤;促微管聚合蛋白TPPP3在肥胖及肺癌中的功能及調(diào)控研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 鄭碧云;HBx與COXIII共定位上調(diào)HepG2細(xì)胞線粒體功能促進(jìn)細(xì)胞增殖[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉霞;REG3A促進(jìn)AD-HIES支氣管上皮細(xì)胞增殖修復(fù)的作用機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

4 段亮;結(jié)直腸癌中炎性分子S100A9的表達(dá)與疾病進(jìn)展的關(guān)系及其對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖與遷移的作用及分子機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王齊;Sam68對(duì)T-ALL細(xì)胞增殖和凋亡的作用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

6 黃正洋;表皮生長(zhǎng)因子參與鵝卵泡顆粒細(xì)胞增殖調(diào)控機(jī)理的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2016年

7 桂琳;多細(xì)胞因子調(diào)控hsBAFF通過(guò)Erk1/2和S6K1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)促進(jìn)B細(xì)胞增殖機(jī)理研究[D];南京師范大學(xué);2015年

8 李繼偉;氧化固醇結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白4L(ORP4L)通過(guò)維持細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)平衡促進(jìn)細(xì)胞增殖[D];暨南大學(xué);2016年

9 來(lái)凱然;環(huán)氧合酶-2在TNF-α誘導(dǎo)的人晶狀體上皮細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)分化中的作用及其機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2016年

10 王洪領(lǐng);抗腫瘤新藥羧胺三唑抑制細(xì)胞增殖機(jī)制的初步研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 孫思;TGF-β調(diào)節(jié)仔豬睪丸支持細(xì)胞增殖的機(jī)制[D];西南大學(xué);2015年

2 王愿;ATO通過(guò)下調(diào)CD44對(duì)K562細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉夢(mèng)涵;靶向抑制miRNA-21對(duì)K562細(xì)胞增殖及PTEN-PI3K/AKT通路的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 高曉晗;尼洛替尼聯(lián)合三氧化二砷對(duì)K562細(xì)胞增殖及凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 姚晶晶;地西他濱聯(lián)合三氧化二砷對(duì)HL-60細(xì)胞增殖、凋亡的作用以及對(duì)DAPK基因影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 王西華;NNK對(duì)V79和NCTC 1469細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];鄭州輕工業(yè)學(xué)院;2015年

7 常遵輝;Mfn2對(duì)高糖誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞A7r5增殖及糖代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

8 闕菡雅;NOX1對(duì)A549細(xì)胞增殖及凋亡的影響[D];鄭州大學(xué);2015年

9 徐銀麗;中華眼鏡蛇毒及其組分神經(jīng)毒素對(duì)皮膚移植排斥反應(yīng)的抑制作用及其機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

10 張紅麗;沉默Piwil2表達(dá)對(duì)子宮頸癌細(xì)胞增殖和衰老的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1947712