本文選題：調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 + 流式細(xì)胞術(shù)��； 參考：《復(fù)旦大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：背景與目的：調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells, Treg cells)可以抑制免疫系統(tǒng)的抗腫瘤反應(yīng),在惡性腫瘤的發(fā)生過程中,外周血中Treg細(xì)胞的數(shù)量隨著疾病的嚴(yán)重程度而遞增。本研究旨在初步探討Treg細(xì)胞在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中的可能的作用。方法：采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)61例宮頸鱗癌(squamous cell carcinoma, SCC),8例宮頸腺癌(adenocarcinoma, ADC),41例高級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤變(high-grade cervical intraepithelial neoplasias, HG-CIN)患者和17例健康女性(normal control, NLM)周血中Treg細(xì)胞占CD4+ T細(xì)胞的比例。結(jié)果：ADC、 SCC、HG-CIN患者和正常對(duì)照者中Treg細(xì)胞占外周血CD4+ T細(xì)胞的比例(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)分別為：10.73±2.88%、10.31±2.45%、9.20±2.28%和7.88±1.18%,各組間差異有顯著性(P=0.001)。在宮頸鱗狀上皮病變中,外周血中Treg細(xì)胞的水平隨著病變的惡性程度逐漸升高(SCCHG-CINNLM, P0.001)。在總共69例浸潤(rùn)性宮頸癌中,根據(jù)2009FIGO分期,Ⅰ期為37例,Ⅱ期患者為32例。17例(24.6%)患者術(shù)后被發(fā)現(xiàn)有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。惡性程度較高的腫瘤中Treg細(xì)胞的數(shù)量高于惡性程度較低的腫瘤中該細(xì)胞的數(shù)量,包括FIGOⅡ期高于Ⅰ期(10.67±2.67% vs 10.00±2.24%)；腫瘤直徑4 cm高于腫瘤直徑≤4 cm(10.68±2.31%vs 10.04±2.63%);有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤高于無盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤(11.06±2.56% vs 10.13±2.44%)。但經(jīng)統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn),Treg細(xì)胞的數(shù)量未被發(fā)現(xiàn)和腫瘤的臨床分期、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)、腫瘤大小及纖維肌壁浸潤(rùn)程度有相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌患者外周血中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例增高,并且與宮頸上皮惡性轉(zhuǎn)化的程度呈正相關(guān),但其在浸潤(rùn)性宮頸癌形成后的進(jìn)展過程中的作用價(jià)值有待進(jìn)一步探討。目的：本研究旨在揭示早期宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者的外周血和局部腫瘤微環(huán)境中T淋巴細(xì)胞各類亞群的免疫應(yīng)答特點(diǎn)。方法：采用多色流式細(xì)胞術(shù)對(duì)46例早期宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者(其中38例患者獲取了新鮮的宮頸局部腫瘤組織)和16例正常人中外周血的CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞以及CD4+Foxp3+T淋巴細(xì)胞(Treg細(xì)胞)進(jìn)行計(jì)數(shù),三類淋巴細(xì)胞再分別根據(jù)其表面標(biāo)志物進(jìn)一步分群。結(jié)果：宮頸癌患者外周血中CD4+T細(xì)胞的比例(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)顯著高于正常對(duì)照者(58.20±9.37% vs 52.49±7.09%,P0.05),而CD8+ T細(xì)胞的比例顯著低于正常對(duì)照者(29.18+8.00% vs 34.11±7.11%,P0.05)。在腫瘤微環(huán)境中,惡性表型較高的腫瘤患者CD4+T細(xì)胞的比例顯著高于惡性表型較低的腫瘤患者,包括其在肌層浸潤(rùn)1/2層的腫瘤中高于肌層浸潤(rùn)≤1/2層的腫瘤(45.52±2.56% vs33.57±4.23%,P0.05),有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤明顯高于無盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤(47.75±2.93% vs 38.46±3.23%,P0.05),有脈管浸潤(rùn)的腫瘤顯著高于無脈管浸潤(rùn)的腫瘤(48.76±2.56% vs 37.13±3.31%,P0.05)；與惡性表型較低的腫瘤患者相比,惡性表型較高的腫瘤患者腫瘤浸潤(rùn)性CD8+T細(xì)胞的比例顯著降低,具體表現(xiàn)在：其在肌層浸潤(rùn)1/2層的腫瘤低于肌層浸潤(rùn)≤1／2層的腫瘤(41.42±2.59% vs 57.65±4.82%,P0.05),有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤明顯低于無盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤(39.47±3.40% vs 50.19±3.40%,P0.05),有脈管浸潤(rùn)的腫瘤顯著低于于無脈管浸潤(rùn)的腫瘤(37.83±2.88% vs 52.14±3.43%,P0.05)。在腫瘤微環(huán)境中,不論CD4+T細(xì)胞還是CD8+ T細(xì)胞,效應(yīng)記憶性T細(xì)胞(Effector memory T cells, Tem)占大多數(shù)(83.83±8.25% vs 88.31±9.36%),并且其比例顯著高于外周血中的比例(29.28±14.02% vs 35.82±14.71%,P0.05);而初始T細(xì)胞的比例(1.30±1.89% vs 1.24±1.38%)顯著低于外周血中的比例(32.40±15.07% vs27.91±17.73,P0.05)。在宮頸癌患者的外周血中,惡性表型較高的腫瘤患者CD4+Tem細(xì)胞的比例顯著高于惡性表型較低的腫瘤患者,包括其比例在有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤中明顯高于無盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤(35.54±14.24% vs27.05±11.19%,P0.05),在有脈管浸潤(rùn)的腫瘤中顯著高于無脈管浸潤(rùn)的腫瘤(34.78±13.44% vs 26.27±±11.38%,P0.05)；而在腫瘤微環(huán)境中,惡性表型較高的患者CD8+Tem細(xì)胞的比例顯著低于其在惡性表型較低的腫瘤患者中的比例,主要表現(xiàn)在其比例在肌層浸潤(rùn)深度1/2層的腫瘤中顯著低于浸潤(rùn)深度≤1/2層的腫瘤(86.35±±10.37% vs 93.03±3.43%,P0.01),在有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤中明顯低于無盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤(80.99±12.38% vs 90.67±6.40%,P0.05)宮頸癌患者外周血中Treg細(xì)胞和Helios+Treg細(xì)胞的比例分別為7.51±1.92%和66.12±13.16%,顯著高于其在正常對(duì)照者中的比例(6.16±1.89%和50.79±10.59%,P值均0.05)。腫瘤微環(huán)境中終末效應(yīng)型Treg細(xì)胞的比例顯著高于外周血(43.91±21.17% vs 6.15±±9.08%,P0.05),而初始Treg細(xì)胞的比例顯著低于外周血(0.45±0.32% vs 19.89±9.77%,P0.05)。此外,在有脈管浸潤(rùn)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者外周血中,Treg細(xì)胞的比例顯著升高。結(jié)論：在早期宮頸癌的局部抗腫瘤免疫應(yīng)答中,不同惡性表型的腫瘤存在不同的免疫應(yīng)答反應(yīng)。其中外周血中Treg細(xì)胞的比例升高以及腫瘤微環(huán)境中CD4+ T細(xì)胞比例的升高、CD8+ T細(xì)胞和CD8+Tem細(xì)胞比例的降低與腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移有相關(guān)性。
[Abstract]:BACKGROUND & OBJECTIVE : Regulatory T cells ( Treg cells ) can inhibit the anti - tumor response of the immune system . In the course of the occurrence of malignant tumor , the number of Treg cells in peripheral blood is increased with the severity of the disease . The results show that the ratio of Treg cells to peripheral blood CD4 + T cells in peripheral blood is 10.73 鹵 2.88 % , 10.31 鹵 2.45 % , 9.20 鹵 2.28 % and 7.88 鹵 1.18 % , respectively . In total 69 cases of invasive cervical cancer , there were 37 cases in stage 鈪，

本文編號(hào)：1771384