本文選題：HOXD8　切入點：卵巢癌　出處：《福建醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：目的：檢測同源異型盒基因D8(HOXD8)在人卵巢癌細胞株SKOV3和SKOV3-DDP中的表達，探討卵巢癌順鉑耐藥的機制。 方法：體外培養(yǎng)人卵巢癌細胞株SKOV3及其配對順鉑耐藥細胞株SKOV3-DDP，應(yīng)用XTT比色實驗檢測SKOV3、SKOV3-DDP細胞株順鉑處理后的半數(shù)抑制濃度(IC50)，并計算耐藥指數(shù)；半定量RT-PCR及實時熒光定量PCR、Elisa方法檢測HOXD8在SKOV3、SKOV3-DDP細胞株中的表達，探討同源異型盒基因D8與卵巢癌順鉑耐藥的關(guān)系。 結(jié)果： 1.細胞經(jīng)不同濃度順鉑處理72小時后，隨著順鉑濃度的增加，細胞抑制率增高，顯示出明顯的劑量依賴關(guān)系；耐藥細胞株經(jīng)順鉑作用后，細胞抑制率明顯低于敏感株細胞株(p0.05)。XTT比色實驗結(jié)果顯示，SKOV3細胞株順鉑IC50值為2.462±0.81ug/ml，SKOV3-DDP細胞株順鉑IC50值為9.174±0.24ug/ml，SKOV3-DDP細胞株的耐藥指數(shù)為3.73，可進行耐藥實驗。 2.半定量RT-PCR實驗結(jié)果顯示，SKOV3細胞株中HOXD8mRNA的表達水平為0.238±0.037，SKOV3-DDP細胞株中HOXD8mRNA的表達水平為0.707±0.026。與SKOV3細胞株比較，SKOV3-DDP細胞株中HOXD8mRNA的相對表達量明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。熒光定量PCR實驗結(jié)果顯示，SKOV3細胞株中HOXD8mRNA的表達水平為0.1711±0.026，SKOV3-DDP細胞株中HOXD8mRNA的表達水平為0.5761±0.037。與SKOV3細胞株比較，SKOV3-DDP細胞株中HOXD8mRNA的相對表達量明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。 3. Elisa實驗結(jié)果顯示，SKOV3細胞株中HOXD8蛋白的表達水平為1584.4±2.08pg/ml， SKOV3-DDP細胞株中HOXD8蛋白的表達水平為4423.3±1.52pg/ml。與SKOV3細胞株比較，SKOV3-DDP細胞株中HOXD8蛋白的表達量明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。 結(jié)論： HOXD8mRNA與HOXD8蛋白在體外培養(yǎng)的卵巢癌細胞株SKOV3及其順鉑耐藥株SKOV3-DDP及中均有表達。 SKOV3-DDP細胞株中HOXD8的表達明顯高于其在SKOV3細胞株中的表達，其表達的升高與卵巢癌細胞順鉑耐藥存在明確的相關(guān)性。
[Abstract]:Aim: to detect the expression of homologous cassette gene D8 (HOXD8) in human ovarian cancer cell line SKOV3 and SKOV3-DDP, and to explore the mechanism of cisplatin resistance in ovarian cancer.Methods: human ovarian cancer cell line SKOV3 and its cisplatin resistant cell line SKOV3-DDP were cultured in vitro. The IC50 inhibition concentration (IC50) was measured by XTT colorimetric assay after treatment with cisplatin, and the drug resistance index was calculated.Semi-quantitative RT-PCR and real-time fluorescence quantitative PCR Elisa were used to detect the expression of HOXD8 in SKOV3- SKOV3-DDP cell line, and to explore the relationship between homologous cassette gene D8 and cisplatin resistance in ovarian cancer.Results:1.After treated with different concentrations of cisplatin for 72 hours, the cell inhibition rate increased with the increase of cisplatin concentration, which showed a significant dose-dependent relationship.緇嗚優(yōu)鎶戝埗鐜囨槑鏄句綆浜庢晱鎰熸牚緇嗚優(yōu)鏍，

本文編號：1712152