本文選題：外泌體　切入點：胎盤　出處：《醫(yī)學研究生學報》2015年06期

【摘要】：目的妊娠期間,胎盤可釋放外泌體到母體循環(huán),在正常妊娠或胎盤相關(guān)妊娠并發(fā)癥中發(fā)揮重要作用。文中旨在建立簡便、高效、低耗的母血清胎盤來源外泌體的分離純化方法,為妊娠疾病研究奠定基礎(chǔ)。方法蔗糖梯度離心聯(lián)合2次8%PEG6000沉淀,分離純化正常孕婦血清中胎盤來源外泌體,Western blot檢測胎盤來源外泌體標記蛋白分子(CD63、CD81、PLAP),銀染法分析各密度層中所有蛋白質(zhì)條帶,透射電鏡鑒定胎盤來源外泌體形態(tài),動態(tài)光散射測定外泌體粒徑及分布。結(jié)果通過蔗糖密度梯度離心后得到的各分層液經(jīng)蛋白質(zhì)SDS-PAGE膠電泳,銀染后可見各蛋白分子條帶清晰可見,Western blot結(jié)果顯示CD63、CD81和PLAP同時表達于21%~34%蔗糖密度層,證明血清胎盤外泌體主要存在于1.09~1.16g/m L蔗糖密度層。透射電鏡鑒定獲得的胎盤來源外泌體形態(tài)符合一般外泌體特征,且特異表達PLAP。動態(tài)光散射測定獲得的胎盤外泌體直徑分布于28~91 nm,且大小均一。結(jié)論成功建立了一種簡便、快捷、高效分離血清中胎盤來源外泌體的改良方法,為研究胎盤外泌體在正常妊娠及胎盤相關(guān)并發(fā)癥中的作用奠定實驗基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective during pregnancy, placenta can release exocrine to maternal circulation and play an important role in normal pregnancy or placental associated pregnancy complications. Methods sucrose gradient centrifugation combined with 8%PEG6000 precipitation was used for the study of pregnancy diseases. Western blot was used to detect the placental exocrine marker protein molecule (CD63nCD81) in normal maternal serum. All protein bands in each density layer were analyzed by silver staining, and the morphology of exocrine from placenta was identified by transmission electron microscopy (TEM). The particle size and distribution of exocrine were measured by dynamic light scattering. Results the layers obtained by sucrose density gradient centrifugation were electrophoretic with protein SDS-PAGE gel. After silver staining, the protein molecular bands were clearly observed. Western blot showed that CD63, CD81 and PLAP were simultaneously expressed in the density layer of 34% sucrose. The results showed that the exocrine of the placenta mainly existed in the sucrose density layer of 1.09~1.16g/m L. the morphology of the exocrine from the placenta identified by transmission electron microscope was consistent with the general exocrine characteristics. The diameter of placental exocrine was 2891 nm, and the size was uniform. Conclusion A simple, fast and efficient method for isolation of exocrine from placenta was established. To study the role of placental exocrine in normal pregnancy and placental related complications.
【作者單位】： 東南大學醫(yī)學院;南京大學醫(yī)學院附屬鼓樓醫(yī)院婦產(chǎn)科;南京醫(yī)科大學鼓樓臨床醫(yī)學院婦產(chǎn)科;
【基金】：國家自然科學基金(81370724) 江蘇省科技發(fā)展計劃項目(BL2012015)
【分類號】：R714.2

【參考文獻】

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2 李美玲;梁元姣;沈濤;邵永;靖俊;姚兵;;血清Glycodelin-A水平對宮腔內(nèi)人工授精妊娠結(jié)局的作用[J];醫(yī)學研究生學報;2014年12期

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1 劉紅梅;邢福祺;吳鳳林;;IVF-ET周期中g(shù)lycodelin與子宮內(nèi)膜容受性及妊娠關(guān)系的初步研究[J];南方醫(yī)科大學學報;2006年08期

2 莊春香;張桂;趙蓓蕾;孫輝明;;喉罩氣道導管在慢性阻塞性肺疾病合并Ⅱ型呼吸衰竭患者無創(chuàng)通氣中的應用研究[J];醫(yī)學研究生學報;2012年02期

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4 陳莉;孫琴;沈濤;許娟娟;姚兵;梁元姣;;腎陽虛型不孕女性行宮腔內(nèi)人工授精術(shù)中補加復方玄駒膠囊的臨床療效[J];醫(yī)學研究生學報;2013年06期

5 辛曉峰;;2011年修訂版《慢性阻塞性肺疾病全球防治創(chuàng)議》解讀[J];醫(yī)學研究生學報;2012年05期

6 李美玲;梁元姣;姚兵;;不同方案對322個夫精人工授精周期妊娠率的影響[J];醫(yī)學研究生學報;2014年03期

7 孫海茹;甄秀麗;趙世彬;郭麗娜;呂翠婷;賈新轉(zhuǎn);趙素英;;輸卵管積水患者窗口期子宮內(nèi)膜Glycodelin表達及臨床意義[J];山東醫(yī)藥;2012年19期

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3 Goodman DR;陳乃眉;;胎盤毒理學[J];國外醫(yī)學.婦產(chǎn)科學分冊;1984年01期

4 邵秀芝;;胎盤對甲狀腺激素及藥物的轉(zhuǎn)運、合成和代謝的影響[J];地方病通訊;1984年03期

5 孫紅妹,郭章溉,吳廣琴,張景華,王斌,謝曉樺,任桂珍,陳樹新;胎盤解脲脲原體感染與妊娠的關(guān)系[J];中國人獸共患病雜志;2000年03期

6 趙真;王凱;錢禎;周倩;;胎盤血管形成相關(guān)研究進展[J];醫(yī)學綜述;2011年13期

7 陳忠;印永祥;許建娟;趙華;馮一中;;血管內(nèi)皮生長因子及其受體在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥患者胎盤中的表達及其意義[J];中華婦幼臨床醫(yī)學雜志(電子版);2011年06期

8 俞蘇蒙，王耐芬，王振剛，王醒芳;石墨爐原子吸收法測定胎盤和臍帶中鉛及其質(zhì)控[J];環(huán)境與健康雜志;1994年04期

9 閻玉芹;李健群;;胎盤與甲狀腺激素代謝[J];黑龍江醫(yī)藥科學;1984年02期

10 ;鉻~(51)標記紅血球作胎盤定位[J];四川醫(yī)學院學報;1972年02期

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1 胡曉紅;欒佐;;胎盤屏障對堿性成纖維細胞生長因子通透性的實驗研究[A];新世紀全國首屆小兒綜合研究學術(shù)會議論文匯編[C];2001年

2 劉亞濱;李光實;徐維清;;HBV標志物的胎盤傳播及產(chǎn)前免疫的可能性[A];’96全國優(yōu)生科學大會大會學術(shù)講演與大會論文摘要匯編[C];1996年

3 黃堅;林珍云;王玨;馮國芳;卓廣超;;胎盤上Toll樣受體的表達及其與自發(fā)性早產(chǎn)間關(guān)系的探討[A];2012年浙江省婦產(chǎn)科學及圍產(chǎn)醫(yī)學學術(shù)年會暨《婦產(chǎn)科常見疾病規(guī)范化治療新進展》及《圍產(chǎn)醫(yī)學熱點追蹤》學習班論文集[C];2012年

4 徐銘軍;;麻醉及麻醉藥對胎兒和新生兒的影響[A];2008年中華醫(yī)學會全國麻醉學術(shù)年會論文匯編[C];2008年

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1 楊鋒;胎盤——胎兒的“全職保姆”[N];中國醫(yī)藥報;2002年

2 王振坤;胎兒防線[N];家庭醫(yī)生報;2006年

3 本報記者 王峰;孕期用藥別傷及胎兒[N];中國消費者報;2001年

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1 王乾華;軸突導向因子-1對胎盤血管形成作用的研究[D];華中科技大學;2011年

2 趙秀欣;高原世居藏族與移居漢族胎盤線粒體能量代謝的比較研究[D];第三軍醫(yī)大學;2007年

3 張園;IVF-ET來源胎盤形態(tài)學、基因組學和胎盤屏障的研究：探討輔助生育技術(shù)安全性[D];南京醫(yī)科大學;2012年

4 劉玉凌;膽汁淤積基因在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥發(fā)病機制和在異常胎盤膽汁酸排泌機制中作用的研究[D];華中科技大學;2006年

5 隋琳琳;小鼠體內(nèi)外胚外組織/胎盤轉(zhuǎn)錄組、miRNA及蛋白質(zhì)組的比較分析[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2014年

6 俞丹;外源性BDNF在宮內(nèi)缺氧環(huán)境中對胎盤及胚鼠血腦屏障通透性和腦細胞凋亡的作用及信號傳導的研究[D];四川大學;2004年

7 梁慧超;乙肝胎盤P-gp/MDR1和ABCG2/BCRP的表達[D];暨南大學;2009年

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1 鄭榮華;抗AT1受體自身抗體對人體胎盤血管的收縮作用[D];山西醫(yī)科大學;2010年

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3 張鈺;胎盤一氧化氮體系與妊高征發(fā)病機理的研究[D];天津醫(yī)科大學;2003年

4 鄒翠麗;孕期不同階段鉛暴露對大鼠胎盤血栓調(diào)節(jié)蛋白、核因子-κB表達影響的實驗研究[D];青島大學;2010年

5 安紅敏;�；撬釋β然k誘導的孕鼠胎盤損傷及胚胎發(fā)育毒性的影響及機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2007年

6 倪曉田;人絨毛膜促性腺激素促進胎盤糖皮質(zhì)激素屏障11β-HSD2表達的機制研究[D];復旦大學;2010年

7 王娟;不同劑量硒對染鉛孕鼠胎盤及仔代生長發(fā)育的影響[D];河北醫(yī)科大學;2007年

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本文編號：1678895