YKL-40對卵巢癌SKOV-3細(xì)胞遷移能力的影響
本文選題:卵巢癌 切入點(diǎn):YKL- 出處:《山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年01期
【摘要】:目的探討YKL-40對卵巢癌SKOV-3細(xì)胞體外遷移能力的影響。方法采用RT-PCR檢測卵巢癌SKOV-3細(xì)胞YKL-40 mRNA水平的表達(dá);采用慢病毒感染的方法在SKOV-3細(xì)胞過表達(dá)YKL-40,qRT-PCR、ELISA、Western blotting驗(yàn)證YKL-40的過表達(dá);Transw ell實(shí)驗(yàn)檢測YKL-40過表達(dá)對SKOV-3細(xì)胞遷移能力的影響;特異性抑制劑抑制YKL-40過表達(dá)SKOV-3細(xì)胞中的p38 MAPK通路,檢測其對細(xì)胞遷移能力的影響。結(jié)果 SKOV-3細(xì)胞中未檢測到Y(jié)KL-40 mRNA的表達(dá);成功構(gòu)建了YKL-40過表達(dá)細(xì)胞株LV-SKOV-3,感染率達(dá)90%以上;與空載體慢病毒感染的對照SKOV-3細(xì)胞(NC-SKOV-3)相比,LV-SKOV-3細(xì)胞YKL-40無論mRNA表達(dá)還是蛋白水平(細(xì)胞總蛋白、分泌蛋白)均明顯上調(diào);Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)表明過表達(dá)YKL-40的LV-SKOV-3細(xì)胞較空載體對照細(xì)胞NC-SKOV-3遷移能力顯著增強(qiáng),而通過SB203580抑制p38 MAPK通路p38蛋白磷酸化后,LV-SKOV-3細(xì)胞的遷移能力明顯下調(diào)。結(jié)論 YKL-40可顯著促進(jìn)卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的遷移,這一作用可能是通過p38 M APK通路介導(dǎo)的。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of YKL-40 on the migration of ovarian cancer SKOV-3 cells in vitro. Methods RT-PCR was used to detect the expression of YKL-40 mRNA in ovarian cancer SKOV-3 cells. Overexpression of YKL-40qRT-PCRRT-ELISA-Western blotting in SKOV-3 cells was used to detect the effect of YKL-40 overexpression on the migration ability of SKOV-3 cells by Transw ell assay, and specific inhibitors inhibited p38 MAPK pathway in YKL-40 overexpression SKOV-3 cells. Results the expression of YKL-40 mRNA was not detected in SKOV-3 cells, and the YKL-40 overexpression cell line LV-SKOV-3 was successfully constructed, and the infection rate was over 90%. Compared with the empty vector lentivirus infected control SKOV-3 cell line NC-SKOV-3, the YKL-40 of LV-SKOV-3 cells expressed either mRNA or protein (total protein). Secretory protein) up-regulated the migration of Transwell cells. The results showed that the migration ability of LV-SKOV-3 cells which overexpressed YKL-40 was significantly higher than that of empty vector cells, and the migration ability of LV-SKOV-3 cells was significantly higher than that of empty vector cells. The migration ability of LV-SKOV-3 cells was down-regulated after p38 MAPK pathway p38 protein phosphorylation was inhibited by SB203580. Conclusion YKL-40 can significantly promote the migration of ovarian cancer SKOV-3 cells, which may be mediated by p38M APK pathway.
【作者單位】: 山東大學(xué)齊魯醫(yī)院化療科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81372530,81502615) 山東大學(xué)齊魯醫(yī)院臨床研究項(xiàng)目(2014QLKY30)
【分類號(hào)】:R737.31
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2 李U,
本文編號(hào):1657600
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