本文關(guān)鍵詞： 氰戊菊酯 宮內(nèi)生長(zhǎng)受限 甲狀腺激素受體 胎盤　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景及目的氰戊菊酯是一種內(nèi)分泌干擾物,大量研究顯示其具有潛在的發(fā)育毒性。本研究主要探討孕期氰戊菊酯暴露是否能夠引起胎鼠宮內(nèi)生長(zhǎng)受限(intrauterine growth restriction,IUGR),同時(shí)研究胎盤甲狀腺激素受體信號(hào)在氰戊菊酯引起胎鼠IUGR中的作用。方法建立氰戊菊酯引起胎鼠IUGR的模型:ICR小鼠(8~10周,雄鼠:32~34g;雌鼠:28~30 g)購買于北京維通利華公司(許可證號(hào):SCXK[京]2012-0001)。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)一周(自由飲食、晝夜均衡,溫度20℃~25℃,濕度50%±5%)。交配時(shí),按雌雄比4:2于9:00 PM合籠,次日7:00 AM檢查雌鼠陰栓,查到陰栓定為妊娠第0天(Gestational day 0,GD0)。56只孕鼠(11只、15只、16只、14只)分為4組,氰戊菊酯處理組ICR孕鼠于GD0~GD17每天給予氰戊菊酯(0.2,2.0或20 mg/kg,溶于玉米油)灌胃處理。對(duì)照組給予玉米油灌胃處理。課題組先前的研究發(fā)現(xiàn)20 mg/kg的氰戊聚酯灌胃處理未發(fā)現(xiàn)母體毒性。所有孕鼠于GD18天剖殺。稱量并記錄子宮連胎重、胎仔重、胎盤重,記錄著床數(shù)、吸收胎數(shù)、死胎數(shù)、活胎數(shù)。收集胎鼠血清和胎盤。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(Electrochemiluminescence Immunoassay,ECLIA)檢測(cè)胎鼠血清中總?cè)饧谞钕僭彼?total triiodothyronine,TT3)、總甲狀腺素(total thyronine,TT4)的水平。rt-pcr檢測(cè)胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(fattyacidtransportprotein-1,fatp1)、脂肪酸轉(zhuǎn)位酶(fattyacidtranslocase,fat/cd36)、鈉依賴性中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(sodium-dependentneutralaminoacidtransporter-1,snat1)、鈉依賴性中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2(sodium-dependentneutralaminoacidtransporter-2,snat2)、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(insulin-likegrowthfactor-1,igf1)和胰島素樣生長(zhǎng)因子-2(insulin-likegrowthfactor-2,igf2)的mrna表達(dá)水平。探討甲狀腺激素受體信號(hào)在氰戊菊酯引起胎鼠iugr中的作用:24只孕鼠平均分為4組(每組6只),氰戊菊酯處理組孕鼠于gd0~gd14每天給予氰戊菊酯(0.2,2.0或20.0mg/kg)灌胃處理。對(duì)照組給予玉米油灌胃處理。所有孕鼠于gd15天剖殺。收集母鼠血清和胎盤。胎盤組織學(xué)分析孕期氰戊菊酯暴露對(duì)胎盤血竇面積的影響。eclia檢測(cè)母鼠血清中tt4和tt3的水平。rt-pcr檢測(cè)胎盤甲狀腺激素受體α-1(thyroidhormonereceptorα,trα1)、甲狀腺激素受體β-1(thyroidhormonereceptorβ,trβ1)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor-a,vegfa)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-1(vascularendothelialgrowthfactorreceptor-1,vegfr1)的mrna表達(dá)水平。westernblotting檢測(cè)trα和trβ的核轉(zhuǎn)位水平。結(jié)果本研究發(fā)現(xiàn),對(duì)照組,0.2mg/kg、2mg/kg和20.0mg/kg氰戊菊酯處理組胎鼠體重分別為(1.347±0.025)g、(1.354±0.010)g、(1.328±0.013)g和(1.280±0.021)g,氰戊菊酯處理組胎鼠體重降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f=3.764,p0.05)。同時(shí),對(duì)照組,0.2mg/kg、2mg/kg和20.0mg/kg氰戊菊酯處理組胎鼠iugr的發(fā)生率分別為5.76%、3.34%、5.94%和22.23%,氰戊菊酯處理組胎鼠iugr的發(fā)生率升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(h=11.851,p0.05)。分性別分析發(fā)現(xiàn),雄性胎鼠對(duì)照組、0.2mg/kg、2mg/kg和20.0mg/kg氰戊菊酯處理組iugr的發(fā)生率分別為5.18%、1.56%、6.51%和17.61%,氰戊菊酯處理組雄性胎鼠iugr的發(fā)生率差升高,異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(h=7.849,p0.05);雌性胎鼠對(duì)照組、0.2mg/kg、2mg/kg和20.0mg/kg氰戊菊酯處理組iugr的發(fā)生率分別為2.95%、8.22%、7.94%和25.17%,氰戊菊酯處理組雌性胎鼠IUGR發(fā)生率升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=8.482,P0.05)。組織學(xué)分析發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比,2.0mg/kg和20.0mg/kg氰戊菊酯處理組胎鼠胎盤血竇面積降低(H=7.849,P0.05)。氰戊菊酯處理對(duì)甲狀腺激素受體信號(hào)的影響的分析發(fā)現(xiàn),處理組母體血清TT4的水平?jīng)]有影響,盡管在2.0 mg/kg氰戊菊酯處理組,母體血清TT3水平降低(P0.05)。與對(duì)照組相比,所有氰戊菊酯處理組胎盤TRα1和TRβ1的mRNA表達(dá)水平均降低(P0.05)。同時(shí),20.0 mg/kg氰戊菊酯處理組TRβ1核轉(zhuǎn)位水平降低(P0.05)。氰戊菊酯處理組胎盤TR下游靶基因的分析發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,2.0mg/kg和20.0mg/kg氰戊菊酯處理組胎盤VEGFa的mRNA表達(dá)水平降低(P0.05),20.0mg/kg氰戊菊酯處理組胎盤IGF2的mRNA表達(dá)水平降低。此外,2.0mg/kg和20.0mg/kg氰戊菊酯處理組胎盤CD36、SNAT1和SNAT2的mRNA表達(dá)水平均降低。結(jié)論胎盤甲狀腺激素受體信號(hào)可能介導(dǎo)氰戊菊酯誘導(dǎo)胎鼠宮內(nèi)生長(zhǎng)受限。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R714

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本文編號(hào)：1534700