STOML-2過表達抑制人宮頸鱗癌Siha細胞凋亡
本文關(guān)鍵詞:STOML-2過表達抑制人宮頸鱗癌Siha細胞凋亡 出處:《南方醫(yī)科大學學報》2015年09期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的研究STOML-2過表達抑制人宮頸鱗癌Siha細胞凋亡的機制,以期為宮頸癌的治療開辟新的路徑。方法用攜帶STOML-2基因的腺病毒感染Siha細胞作為過表達組,同時設(shè)立空白載體組及空白組作為對照,72 h后用Western blot檢測STOML-2的過表達,并用MTT法檢測STOML-2過表達對細胞增殖的影響。用IC50的順鉑處理各組細胞24 h后,利用熒光顯微鏡觀察STOML-2過表達對細胞凋亡的影響,并利用流式細胞儀進一步分析細胞的凋亡率;采用Western blot檢測線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白caspase3、cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax以及線粒體內(nèi)外細胞色素C(Cyt C)表達量的變化。結(jié)果與空白組及空白載體組相比,Western blot結(jié)果顯示過表達組STOML-2的表達量明顯增加;MTT結(jié)果顯示,STOML-2過表達后可明顯促進Siha細胞的增殖。用IC50的順鉑處理細胞24 h后,熒光顯微鏡下,空白載體組凋亡細胞的細胞核大小不一,濃染致密的藍色熒光顯示核固縮,部分核裂解為凋亡小體,而過表達組細胞核多較完整,著色較淺,染色質(zhì)密度均勻一致,并且流式細胞儀結(jié)果同樣提示STOML-2過表達后細胞凋亡率明顯降低。Western blot結(jié)果顯示過表達組線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白cleaved-caspase3、Bax以及線粒體外Cyt C表達水平降低,而caspase3、Bcl-2及線粒體內(nèi)Cyt C的表達水平則相應升高。結(jié)論 STOML-2過表達可以促進Siha細胞增殖,其抑制凋亡的機制可能與線粒體凋亡途徑相關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of overexpression of STOML-2 in inhibiting apoptosis of human cervical squamous cell carcinoma (Siha) cells. Methods Adenovirus-infected Siha cells carrying STOML-2 gene were used as overexpression group and blank vector group and blank group as control group. After 72 h, the overexpression of STOML-2 was detected by Western blot. The effect of STOML-2 overexpression on cell proliferation was detected by MTT assay. The cells in each group were treated with cisplatin of IC50 for 24 h. The effect of overexpression of STOML-2 on apoptosis was observed by fluorescence microscope, and the apoptosis rate was further analyzed by flow cytometry. The mitochondrial apoptosis-related protein caspase3, cleaved-caspase-3 and Bcl-2 were detected by Western blot. The expression of Bax and cytochrome C _ (Cyt C) in and out of mitochondria were compared with those in blank group and blank vector group. The results of Western blot showed that the expression of STOML-2 in overexpression group was significantly increased. The results of MTT showed that the over-expression of STOML-2 could significantly promote the proliferation of Siha cells. After treated with cisplatin of IC50 for 24 h, the cells were treated by fluorescence microscope. The nuclear size of apoptotic cells in blank vector group was different. The dense blue fluorescence showed nuclear pyknosis and partial nucleolysis into apoptotic bodies, while in overexpression group, the nuclei were more complete and light colored. Chromatin density is uniform. The results of flow cytometry also showed that the rate of apoptosis was significantly decreased after overexpression of STOML-2. The results of blot showed that the mitochondrial apoptosis pathway related protein cleaved-caspase3 in overexpression group. The expression of Bax and Cyt C in mitochondria decreased, while caspase3 decreased. The expression of Cyt C in Bcl-2 and mitochondria increased correspondingly. Conclusion the overexpression of STOML-2 can promote the proliferation of Siha cells. The mechanism of inhibiting apoptosis may be related to mitochondrial apoptosis pathway.
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院;南方醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院;新鄉(xiāng)醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院;
【基金】:廣東省自然科學基金(S2013010016194)
【分類號】:R737.33
【正文快照】: STOML-2是stomatin家族的新成員,具有stomatin家族共有的一致序列,但不具有N端跨膜區(qū)域,因此,STOML-2發(fā)揮功能的機制可能與其他成員不同[1-2]。STOML-2定位于線粒體內(nèi)膜,其在食管癌、肺癌、子宮內(nèi)膜癌等多種腫瘤均高表達[3-4],但其在宮頸癌組織中表達量的高低文獻報道不一[5-9
【參考文獻】
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【共引文獻】
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7 王躍,
本文編號:1424393
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