本文關(guān)鍵詞：脂肪酸結(jié)合蛋白4對(duì)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的影響　出處：《浙江大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：背景 胚胎著床是指胚泡進(jìn)入子宮腔后與子宮內(nèi)膜粘附,并逐漸埋入子宮內(nèi)膜的過(guò)程,它是生殖的關(guān)鍵性調(diào)控環(huán)節(jié),著床失敗是早期妊娠丟失的主要原因。胚胎著床受到激素、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、粘附因子及其配基等組成的分子網(wǎng)絡(luò)的精細(xì)調(diào)控,但其機(jī)制遠(yuǎn)未闡明。我們前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人子宮內(nèi)膜細(xì)胞表達(dá)脂肪酸結(jié)合蛋白4(FABP4,常被稱為aP2),利用臨床標(biāo)本,進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)分泌期子宮內(nèi)膜組織表達(dá)FABP4較增生期上調(diào),蛻膜組織的FABP4表達(dá)較非妊娠期子宮內(nèi)膜進(jìn)一步增加；雌、孕激素分別及聯(lián)合刺激作用子宮內(nèi)膜細(xì)胞,結(jié)果顯示雌、孕激素分別作用和雌孕激素聯(lián)合作用,對(duì)FABP4的表達(dá)均有上調(diào)作用。 目的 明確FABP4是否參與調(diào)控子宮內(nèi)膜細(xì)胞的生物學(xué)功能,觀察FABP4對(duì)子宮內(nèi)膜容受性標(biāo)志性因子調(diào)控作用,應(yīng)用體外粘附模型驗(yàn)證FABP4是否參與對(duì)胚胎粘附和著床的調(diào)控；研究和探索FABP4是否參與胚胎著床的過(guò)程及其可能的機(jī)制。 方法 1. Western blot和細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)子宮內(nèi)膜細(xì)胞Ishikawa和RL-952細(xì)胞FABP4的表達(dá)；2、采用siRNA于擾FABP4基因的表達(dá)和FABP4特異性抑制劑阻斷FABP4功能,利用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移,Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲力；3、采用FABP4特異性抑制劑阻斷Ishikawa和RL-952細(xì)胞FABP4功能,利用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)子宮內(nèi)膜容受因子白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)、整合蛋白beta3(Integrin beta3,Integrin-p3)、緊密連接蛋白4(claudin4)的蛋白水平。結(jié)果 (1) Western blot和細(xì)胞免疫熒光顯示Ishikawa和RL-952細(xì)胞表達(dá)FABP4;(2).靶向性siRNA干擾Ishikawa和RL-952細(xì)胞FABP4的表達(dá)和特異性FABP4抑制劑阻斷FABP4功能顯著抑制子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖、遷移和侵襲力；(3).特異性抑制劑抑制Ishikawa和RL-952細(xì)胞FABP4功能顯著下調(diào)雌、孕激素誘導(dǎo)的子宮內(nèi)膜容受因子LIF、Integrin-β, claudin4的表達(dá)。 結(jié)論 FABP4表達(dá)于人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞,參與調(diào)控子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的生物學(xué)功能,抑制FABP4的表達(dá)或其功能可抑制子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖、遷移和侵襲以及子宮內(nèi)膜容受因子的表達(dá)。
[Abstract]:Background Embryo implantation is a process in which the blastocyst adheres to the endometrium and gradually implants into the endometrium. It is the key regulation of reproduction. Implantation failure is the main cause of early pregnancy loss. Embryo implantation is carefully regulated by molecular networks of hormones, cytokines, growth factors, adhesion factors and their ligands. But the mechanism is far from clear. We found that human endometrial cells express fatty acid binding protein 4FABP4, often called aP2P4, using clinical specimens. It was further found that the expression of FABP4 in secretory endometrium was higher than that in proliferative phase, and the expression of FABP4 in decidual tissue was higher than that in non-pregnant endometrium. The effects of estrogen, progesterone and combined stimulation on endometrial cells showed that the expression of FABP4 was up-regulated by estrogen and progesterone combined with estrogen and progesterone. Purpose To determine whether FABP4 is involved in regulating the biological function of endometrial cells and to observe the regulatory effect of FABP4 on endometrial receptivity. The in vitro adhesion model was used to verify whether FABP4 was involved in the regulation of embryo adhesion and implantation. To investigate whether FABP4 is involved in embryo implantation and its possible mechanism. Method 1. Western blot and cellular immunofluorescence were used to detect the expression of FABP4 in Ishikawa and RL-952 cells. 2. SiRNA was used to disturb the expression of FABP4 gene and FABP4 specific inhibitor to block the function of FABP4. The proliferation of cells was detected by CCK-8 assay. Cell migration and cell invasion were detected by scratch test. 3The function of Ishikawa and RL-952 cells was blocked by FABP4 specific inhibitor. The real time quantitative PCR was used to detect the leukemia inhibitory factor (LIF) of endometrial accommodation factor leukemia suppressor. The protein level of integrin beta3(Integrin beta3, integrin-p3, tight junction protein 4, claudin4. 1) Western blot and cellular immunofluorescence showed FABP4 expression in Ishikawa and RL-952 cells. 2). Targeted siRNA interfered with the expression of FABP4 in Ishikawa and RL-952 cells and the specific FABP4 inhibitor blocked the function of FABP4 significantly inhibited the proliferation of endometrial cells. Migration and invasiveness; Inhibition of FABP4 function of Ishikawa and RL-952 cells by specific inhibitors significantly down-regulated estrogen and progesterone-induced endometrial receptor-factor LIF. Expression of Integrin- 尾, claudin4. Conclusion FABP4 is expressed in human endometrial epithelial cells and participates in regulating the biological function of endometrial epithelial cells. Inhibiting the expression or function of FABP4 can inhibit the proliferation of endometrial cells. Migration and invasion and expression of endometrial receptive factors.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R714.8

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1422585