本文關(guān)鍵詞：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)神經(jīng)炎癥反應(yīng)及神經(jīng)干細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)作用

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【摘要】：目的放療相關(guān)的的認(rèn)知功能損傷的發(fā)生主要與小膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞過(guò)度激活所致的慢性神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)及神經(jīng)發(fā)生減少有關(guān)。本研究通過(guò)觀察人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞增值及活化的影響以及對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞分化能力的影響,研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)以及神經(jīng)發(fā)生的調(diào)節(jié)作用,為今后臨床治療放療相關(guān)的認(rèn)知功能損傷提供新思路,同時(shí)為間充質(zhì)干細(xì)胞的臨床應(yīng)用開(kāi)辟新領(lǐng)域。方法利用脂多糖(LPS)刺激小膠質(zhì)細(xì)胞模擬神經(jīng)炎癥反應(yīng),將BV2細(xì)胞與人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的條件培養(yǎng)基(h UC-MSCs-CM)和(或)脂多糖(LPS)共培養(yǎng)24或48小時(shí)后利用MTT比色法分析BV2增殖活力的變化;ELISA法分析BV2細(xì)胞上清中TNF-a和IL-6的變化;免疫印跡法檢測(cè)精氨酸酶1(Arg1)的表達(dá);real-time PCR分析TNF-a、IL-6、ARG1基因的表達(dá)水平。利用transwell小室將NE-4C細(xì)胞分別與M1、M2型小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行隔離共培養(yǎng)48h后,應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)GFAP、β3-Tubulin和β-catenin蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果1 BV2在LPS長(zhǎng)程刺激下表現(xiàn)出明顯的增殖效應(yīng),而h UC-MSCs-CM可以抑制這種增殖反應(yīng);2 LPS刺激誘導(dǎo)BV2大量分泌TNF-a和IL-6兩種炎癥因子,而在h UC-MSCs-CM和LPS共刺激時(shí)TNF-a和IL-6的表達(dá)明顯低于LPS單刺激組;3 h UC-MSCs-CM共培養(yǎng)組BV2細(xì)胞高表達(dá)Arg1;4 M2型小膠質(zhì)細(xì)胞與NE-4C共培養(yǎng)組GFAP及β-catenin的表達(dá)升高,而β3-Tubulin的表達(dá)未見(jiàn)明顯改變。結(jié)論1臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞抑制炎癥所致的小膠質(zhì)細(xì)胞增殖。2臍帶間充干細(xì)胞抑制小膠質(zhì)細(xì)胞釋放炎癥因子TNF-a和IL-6。3臍帶間充干細(xì)胞能夠調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2型活化。4 M2型小膠質(zhì)細(xì)胞可能通過(guò)激活Wnt/β-catenin通路促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞向星形膠質(zhì)細(xì)胞分化。
【關(guān)鍵詞】：小膠質(zhì)細(xì)胞 神經(jīng)保護(hù)作用 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 免疫調(diào)節(jié) 神經(jīng)干細(xì)胞 Wnt/β-catenin信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R730.55
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 英文縮略表8-9
• 引言9-12
• 第1章 實(shí)驗(yàn)研究12-43
• 1.1 材料與方法12-25
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞系12
• 1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及耗材。12-13
• 1.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)耗材13
• 1.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備13-14
• 1.1.5 主要試劑緩沖液的配置14-16
• 1.1.6 實(shí)驗(yàn)方法16-24
• 1.1.7 實(shí)驗(yàn)分組24-25
• 1.1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析25
• 1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-32
• 1.2.1 hUC-MSCs-CM和LPS對(duì)BV2增殖活力的影響25-26
• 1.2.2 不同處理組BV2細(xì)胞TNF-α 和IL-6 分泌水平的變化26-27
• 1.2.3 不同處理組BV2細(xì)胞TNF-α 和IL-6mRNA表達(dá)水平的變化27-28
• 1.2.4 不同處理組BV2細(xì)胞ARG1和CD206mRNA的相對(duì)表達(dá)水平28-29
• 1.2.5 不同處理組BV2細(xì)胞中Arg1蛋白的表達(dá)情況29-30
• 1.2.6 不同誘導(dǎo)條件下NE-4C細(xì)胞表達(dá)GFAP、β3-Tubulin的不同30-31
• 1.2.7 不同誘導(dǎo)條件下NE-4C細(xì)胞中 β-catenin表達(dá)水平的不同31-32
• 1.3 討論32-37
• 1.3.1 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞與免疫調(diào)節(jié)32-34
• 1.3.2 神經(jīng)發(fā)生與輻射認(rèn)知障礙34-35
• 1.3.3 M2型小膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)作用35-36
• 1.3.4 Wnt/β-catenin信號(hào)通路與神經(jīng)發(fā)生36-37
• 1.4 結(jié)論37
• 參考文獻(xiàn)37-43
• 第2章 綜述 間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的免疫調(diào)控研究進(jìn)展43-53
• 2.1 引言43-44
• 2.2 阿爾茨海默病44-45
• 2.3 脊髓損傷45
• 2.4 缺血性腦卒中45-47
• 2.5 結(jié)論47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 結(jié)論53-54
• 附錄A 基因擴(kuò)增曲線、溶解曲線、溶解峰54-59
• 內(nèi)參基因action擴(kuò)增曲線54
• 內(nèi)參基因action溶解曲線54
• 內(nèi)參基因action溶解峰54-55
• TNF-α 基因擴(kuò)增曲線55
• TNF-α 基因溶解曲線55
• TNF-α 基因溶解峰55-56
• IL-6 基因擴(kuò)增曲線56
• IL-6 基因溶解曲線56
• IL-6 基因溶解峰56-57
• ARG1基因擴(kuò)增曲線57
• ARG1基因溶解曲線57
• ARG1基因溶解峰57-58
• CD206基因擴(kuò)增曲線58
• CD206基因溶解曲線58
• CD206基因溶解峰58-59
• 致謝59-61
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介61-62
• 作者簡(jiǎn)介62-63
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集63

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本文編號(hào)：670895