本文關鍵詞：Fth1基因標記對骨髓間充質(zhì)干細胞生物學特性及體外MRI表現(xiàn)的影響

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【摘要】：目的觀察鐵蛋白報告基因Fth1標記對骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)生物學特性及體外MRI表現(xiàn)的影響。方法原代分離培養(yǎng)大鼠MSCs,取第4代MSCs,用構建的攜帶鐵蛋白重鏈基因Fth1的慢病毒載體進行感染,并在培養(yǎng)液內(nèi)加入1mol/L檸檬酸鐵進行培養(yǎng)。采用普魯士藍染色檢測MSCs的攝鐵能力,錐蟲藍染色活細胞計數(shù)檢測MSCs的細胞存活率,CCK-8方法測定MSCs的增殖活性。應用MRI的FSE T2WI和SWAN序列觀察Fth1標記的MSCs和未標記MSCs MRI信號的差異。結果 Fth1基因可成功轉(zhuǎn)染MSCs,轉(zhuǎn)染MSCs的普魯士藍染色標記效率為87%。未加含鐵培養(yǎng)液的Fth1標記MSCs細胞存活率為(92.17±1.91)%,細胞增殖活性D值為1.094±0.068,與未標記MSCs比較差異均無統(tǒng)計學意義[細胞存活率為(94.23±2.42)%,細胞增殖活性D值為1.027±0.122;P0.05);加入含鐵培養(yǎng)液培養(yǎng)3d后的Fth1標記MSCs細胞存活率為(77.47±4.10)%,細胞增殖活性D值為0.493±0.024,與未加含鐵培養(yǎng)液的Fth1標記MSCs及未標記MSCs比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。MRI掃描FSE T2WI和SWAN序列顯示,加入含鐵培養(yǎng)液培養(yǎng)5d后Fth1標記MSCs信號強度為656.6±18.2,與未加含鐵培養(yǎng)液的Fth1標記MSCs及未標記MSCs比較差異均有統(tǒng)計學意義(分別為807.3±17.1和847.1±10.5,P0.05),而未加含鐵培養(yǎng)液的Fth1標記MSCs與未標記MSCs比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論 Fth1報告基因可成功轉(zhuǎn)染MSCs,轉(zhuǎn)染后的MSCs可高效表達并攝取鐵;細胞活力及增殖活性在不含鐵的培養(yǎng)液中不受影響,但在鐵濃度1mol/L含鐵培養(yǎng)液中受到一定影響;經(jīng)含鐵培養(yǎng)液培養(yǎng)5d后,MRI可體外檢測Fth1標記MSCs,其FSE T2WI和SWAN序列呈低信號改變。
【作者單位】： 上海交通大學醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院影像科;上海中醫(yī)藥大學附屬第七人民醫(yī)院影像科;
【關鍵詞】： 鐵蛋白報告基因 骨髓間充質(zhì)干細胞 生物學特性 磁共振成像
【基金】：上海市科委科技創(chuàng)新行動計劃重點項目(10411953400) 上海交通大學醫(yī)學院項目(12XJ30061) 上海市衛(wèi)生局科研課題(20124194) 上海市寶山區(qū)科學技術委員會科研項目(14-E-4)~~
【分類號】：R445.2;R329.2
【正文快照】： signal differences between transfected MSCs and normal MSCs were observed by MRI FSE T2WI and SWAN sequence.Results MSCs were successfully transfected with Fth1 gene,with the Prussian blue staining efficiency being 87%.Fortransfected MSCs without ferric

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 孫志華;杜軍偉;劉娟;許長萌;韓玉霞;關團;陳創(chuàng)夫;張輝;;FTH1在布魯氏菌侵染宿主細胞中的作用[J];石河子大學學報(自然科學版);2014年02期

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本文編號：574206