第一部分攜內皮抑素脂質基因超聲微泡的制備 第一節(jié)重組人內皮抑素質粒載體的構建、純化及鑒定 目的構建重組人內皮抑素真核表達載體并制備脂質超聲微泡攜帶目的基因。方法根據目的基因片段設計引物，通過聚合酶鏈式反應(PCR)進行擴增并純化，然后將純化的目的基因與pEZ-M46載體分別酶切并進行連接，構建內皮抑素基因重組真核表達載體pEZ-M46-ES，并轉化至大腸肝菌，進行菌落PCR、酶切分析和DNA測序鑒定重組克隆。結果經雙酶切電泳和DNA測序分析證實，重組克隆載體內的目的基因片段序列與GENEBANK上報道的Endostatin基因序列基本一致，編碼蛋白質的氨基酸序列完全相同。結論成功構建了人重組內皮抑素基因質粒載體。 第二節(jié)微泡基因載體的制備及基本特性檢測 目的研制性能穩(wěn)定、高效的微泡類基因載體以攜帶目的基因。方法采用成膜水化法、膜擠壓法和機械振蕩法分別制備脂質超聲微泡和納米脂質體，通過生物素-親和素法將微泡-納米脂質體連接起來，以構建載基因量高的微泡類載體；在配方中加入帶正電荷的成膜材料DC-膽固醇(DC-cholesterol)，通過機械振蕩法制備陽離子脂質超聲微泡，光鏡下觀察微泡形態(tài)...

【文章頁數】：116 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻
第一部分 攜內皮抑素基因超聲微泡的制備
    第一節(jié) 重組人內皮抑素質粒載體的構建、純化及鑒定
        1 材料和方法
        2 結果
        3 討論
        4 參考文獻
        5 附圖
    第二節(jié) 微泡基因載體的制備及基本特性檢測
        1 材料和方法
        2 結果
        3 討論
        4 參考文獻
        5 附圖
第二部分 超聲破壞微泡介導內皮抑素基因轉染細胞實驗
    第一節(jié) 超聲破壞微泡介導內皮抑素基因轉染對臍靜脈內皮細胞生長及血管生成的影響
        1 材料和方法
        2 結果
        3 討論
        4 參考文獻
        5 附圖
    第二節(jié) 超聲破壞微泡介導內皮抑素基因轉染對肝癌 HepG2 細胞侵襲、轉移特性的影響
        1 材料和方法
        2 結果
        3 討論
        4 參考文獻
        5 附圖
第三部分 超聲破壞微泡介導內皮抑素基因對肝癌 H22 移植瘤生長的影響
    1 材料和方法
    2 結果
    3 討論
    4 參考文獻
    5 附圖
全文總結
文獻綜述
    參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文、參研項目及學術交流情況



本文編號：3842219