發(fā)布時(shí)間：2023-08-15 20:26

　　第一部分?jǐn)y內(nèi)皮抑素脂質(zhì)基因超聲微泡的制備 第一節(jié)重組人內(nèi)皮抑素質(zhì)粒載體的構(gòu)建、純化及鑒定 目的構(gòu)建重組人內(nèi)皮抑素真核表達(dá)載體并制備脂質(zhì)超聲微泡攜帶目的基因。方法根據(jù)目的基因片段設(shè)計(jì)引物，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)進(jìn)行擴(kuò)增并純化，然后將純化的目的基因與pEZ-M46載體分別酶切并進(jìn)行連接，構(gòu)建內(nèi)皮抑素基因重組真核表達(dá)載體pEZ-M46-ES，并轉(zhuǎn)化至大腸肝菌，進(jìn)行菌落PCR、酶切分析和DNA測序鑒定重組克隆。結(jié)果經(jīng)雙酶切電泳和DNA測序分析證實(shí)，重組克隆載體內(nèi)的目的基因片段序列與GENEBANK上報(bào)道的Endostatin基因序列基本一致，編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列完全相同。結(jié)論成功構(gòu)建了人重組內(nèi)皮抑素基因質(zhì)粒載體。 第二節(jié)微泡基因載體的制備及基本特性檢測 目的研制性能穩(wěn)定、高效的微泡類基因載體以攜帶目的基因。方法采用成膜水化法、膜擠壓法和機(jī)械振蕩法分別制備脂質(zhì)超聲微泡和納米脂質(zhì)體，通過生物素-親和素法將微泡-納米脂質(zhì)體連接起來，以構(gòu)建載基因量高的微泡類載體；在配方中加入帶正電荷的成膜材料DC-膽固醇(DC-cholesterol)，通過機(jī)械振蕩法制備陽離子脂質(zhì)超聲微泡，光鏡下觀察微泡形態(tài)...

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對(duì)照
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 攜內(nèi)皮抑素基因超聲微泡的制備
    第一節(jié) 重組人內(nèi)皮抑素質(zhì)粒載體的構(gòu)建、純化及鑒定
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 參考文獻(xiàn)
        5 附圖
    第二節(jié) 微泡基因載體的制備及基本特性檢測
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 參考文獻(xiàn)
        5 附圖
第二部分 超聲破壞微泡介導(dǎo)內(nèi)皮抑素基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
    第一節(jié) 超聲破壞微泡介導(dǎo)內(nèi)皮抑素基因轉(zhuǎn)染對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長及血管生成的影響
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 參考文獻(xiàn)
        5 附圖
    第二節(jié) 超聲破壞微泡介導(dǎo)內(nèi)皮抑素基因轉(zhuǎn)染對(duì)肝癌 HepG2 細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移特性的影響
        1 材料和方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 參考文獻(xiàn)
        5 附圖
第三部分 超聲破壞微泡介導(dǎo)內(nèi)皮抑素基因?qū)Ω伟?H22 移植瘤生長的影響
    1 材料和方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 參考文獻(xiàn)
    5 附圖
全文總結(jié)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、參研項(xiàng)目及學(xué)術(shù)交流情況



本文編號(hào)：3842219