研究背景及目的 近年來乳腺癌發(fā)病率不斷上升,嚴(yán)重威脅女性生命健康。早期診斷及治療是提高乳腺癌生存率的關(guān)鍵。但是臨床上目前尚缺乏診斷乳腺癌的敏感特異的方法。放射性核素顯像可在分子水平實時無創(chuàng)性監(jiān)測疾病發(fā)生發(fā)展,可在疾病早期提供功能代謝方面改變的信息。因此尋找新型分子靶點進行放射性核素分子顯像研究有可能為乳腺癌的分子診斷和治療提供新的手段。 新近研究表明,To1]樣受體家族(TLRs)在腫瘤細胞表達,其中Toll樣受體5(TLR5)在胃腸道腫瘤、前列腺癌、卵巢癌和乳腺癌等高表達,與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。新近報道,TLR5的特異激動劑-細菌鞭毛蛋白(Flagellin)可以抑制乳腺癌細胞的增殖和生長,因此TLR5有可能成為監(jiān)測和治療乳腺癌的分子靶點。本論文在證實人乳腺癌細胞系MCF-7表達TLR5的基礎(chǔ)上,成功制備基因重組鞭毛蛋白(rFliC),并用放射性核素131I標(biāo)記rFliC,研究了標(biāo)記率、放化純、穩(wěn)定性及MCF-7細胞對該標(biāo)記物的攝取與流出特征。建立荷乳腺癌小鼠模型,探討I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠體內(nèi)的生物學(xué)分布特點及腫瘤靶向性,旨在為乳腺癌的早期診斷探討新的靶向制劑。研究方...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
實驗材料及實驗儀器
    — 實驗材料
        1. 傳代培養(yǎng)MCF-7細胞的實驗材料
        2. rFliC提取、純化及鑒定的實驗材料
        3. 免疫熒光的實驗材料
        4. RT-PCR的實驗材料
        5. SDS-PAGE及Western Blot的實驗材料
        6. CCK-8法的相關(guān)實驗材料
        7. ¹³¹I-rFliC的細胞攝取及流出的相關(guān)實驗材料
        8. 建立荷瘤小鼠模型的實驗材料
        9. ¹³¹I-rFliC在荷瘤小鼠體內(nèi)生物學(xué)分布及磷屏顯像實驗材料
        10. 實驗儀器
    二 實驗儀器
實驗方法
    1. rFliC的誘導(dǎo)表達、純化及鑒定
    2. 細胞培養(yǎng)、傳代、凍存及復(fù)蘇
    3. 免疫熒光技術(shù)測TLR5蛋白表達
    4. RT-PCR測TLR5mRNA表達
    5. Western Blot測TLR5蛋白表達
    6. CCK-8法測細胞增殖
    7. ¹³¹I-rFliC的制備、放化純度分析及穩(wěn)定性測定
    8. ¹³¹I-rFliC的細胞攝取及流出實驗
    9. 建立荷乳腺癌小鼠模型
    10. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠體內(nèi)分布實驗
    11. 磷屏放射自顯影
    12. 統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果
    一. 鞭毛蛋白的提取、純化及鑒定
    二. 乳腺癌細胞系MCF-7及MDA-MB-231 TLR5 mRNA及蛋白表達狀況
    三. MCF-7細胞TLR5蛋白的免疫熒光鑒定
    四. MCF-7細胞TLR5 mRNA表達狀況
    五. MCF-7細胞TLR5蛋白表達狀況
    六. CCK-8法檢測rFliC對細胞增殖的作用
    七. ¹³¹I-rFliC標(biāo)記率、放化純度及穩(wěn)定性
    八. MCF-7細胞對¹³¹I-rFliC攝取及流出狀況
    九. 成功建立荷乳腺癌小鼠模型
    十. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠體內(nèi)的生物學(xué)分布情況
    十一. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠體內(nèi)的磷屏放射自顯影結(jié)果
討論
全文小結(jié)
附圖表
參考文獻
致謝
攻讀研究生期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
學(xué)位論文評閱及答辯情況表



本文編號：3802445