研究背景及目的 近年來乳腺癌發(fā)病率不斷上升,嚴(yán)重威脅女性生命健康。早期診斷及治療是提高乳腺癌生存率的關(guān)鍵。但是臨床上目前尚缺乏診斷乳腺癌的敏感特異的方法。放射性核素顯像可在分子水平實(shí)時無創(chuàng)性監(jiān)測疾病發(fā)生發(fā)展,可在疾病早期提供功能代謝方面改變的信息。因此尋找新型分子靶點(diǎn)進(jìn)行放射性核素分子顯像研究有可能為乳腺癌的分子診斷和治療提供新的手段。 新近研究表明,To1]樣受體家族(TLRs)在腫瘤細(xì)胞表達(dá),其中Toll樣受體5(TLR5)在胃腸道腫瘤、前列腺癌、卵巢癌和乳腺癌等高表達(dá),與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。新近報(bào)道,TLR5的特異激動劑-細(xì)菌鞭毛蛋白(Flagellin)可以抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖和生長,因此TLR5有可能成為監(jiān)測和治療乳腺癌的分子靶點(diǎn)。本論文在證實(shí)人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7表達(dá)TLR5的基礎(chǔ)上,成功制備基因重組鞭毛蛋白(rFliC),并用放射性核素131I標(biāo)記rFliC,研究了標(biāo)記率、放化純、穩(wěn)定性及MCF-7細(xì)胞對該標(biāo)記物的攝取與流出特征。建立荷乳腺癌小鼠模型,探討I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠體內(nèi)的生物學(xué)分布特點(diǎn)及腫瘤靶向性,旨在為乳腺癌的早期診斷探討新的靶向制劑。研究方...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
實(shí)驗(yàn)材料及實(shí)驗(yàn)儀器
    — 實(shí)驗(yàn)材料
        1. 傳代培養(yǎng)MCF-7細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)材料
        2. rFliC提取、純化及鑒定的實(shí)驗(yàn)材料
        3. 免疫熒光的實(shí)驗(yàn)材料
        4. RT-PCR的實(shí)驗(yàn)材料
        5. SDS-PAGE及Western Blot的實(shí)驗(yàn)材料
        6. CCK-8法的相關(guān)實(shí)驗(yàn)材料
        7. ¹³¹I-rFliC的細(xì)胞攝取及流出的相關(guān)實(shí)驗(yàn)材料
        8. 建立荷瘤小鼠模型的實(shí)驗(yàn)材料
        9. ¹³¹I-rFliC在荷瘤小鼠體內(nèi)生物學(xué)分布及磷屏顯像實(shí)驗(yàn)材料
        10. 實(shí)驗(yàn)儀器
    二 實(shí)驗(yàn)儀器
實(shí)驗(yàn)方法
    1. rFliC的誘導(dǎo)表達(dá)、純化及鑒定
    2. 細(xì)胞培養(yǎng)、傳代、凍存及復(fù)蘇
    3. 免疫熒光技術(shù)測TLR5蛋白表達(dá)
    4. RT-PCR測TLR5mRNA表達(dá)
    5. Western Blot測TLR5蛋白表達(dá)
    6. CCK-8法測細(xì)胞增殖
    7. ¹³¹I-rFliC的制備、放化純度分析及穩(wěn)定性測定
    8. ¹³¹I-rFliC的細(xì)胞攝取及流出實(shí)驗(yàn)
    9. 建立荷乳腺癌小鼠模型
    10. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)
    11. 磷屏放射自顯影
    12. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    一. 鞭毛蛋白的提取、純化及鑒定
    二. 乳腺癌細(xì)胞系MCF-7及MDA-MB-231 TLR5 mRNA及蛋白表達(dá)狀況
    三. MCF-7細(xì)胞TLR5蛋白的免疫熒光鑒定
    四. MCF-7細(xì)胞TLR5 mRNA表達(dá)狀況
    五. MCF-7細(xì)胞TLR5蛋白表達(dá)狀況
    六. CCK-8法檢測rFliC對細(xì)胞增殖的作用
    七. ¹³¹I-rFliC標(biāo)記率、放化純度及穩(wěn)定性
    八. MCF-7細(xì)胞對¹³¹I-rFliC攝取及流出狀況
    九. 成功建立荷乳腺癌小鼠模型
    十. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠體內(nèi)的生物學(xué)分布情況
    十一. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠體內(nèi)的磷屏放射自顯影結(jié)果
討論
全文小結(jié)
附圖表
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀研究生期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
學(xué)位論文評閱及答辯情況表



本文編號：3802445