目的探討超聲造影(Contrast-enhanced ultrasounography, CEUS)技術(shù)及定量分析方法評(píng)估單側(cè)輸尿管梗阻大鼠模型腎血流灌注改變的應(yīng)用價(jià)值,并與病理對(duì)照分析,為臨床無創(chuàng)定量評(píng)價(jià)梗阻性腎病的血流灌注提供理論依據(jù)。 材料和方法實(shí)驗(yàn)對(duì)象為天津醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心育種的健康SD大鼠10只,所有大鼠行麻醉下手術(shù)結(jié)扎左側(cè)輸尿管建立單側(cè)輸尿管梗阻模型,每只大鼠分別于建模前和建模后7天進(jìn)行CEUS檢查。 CEUS檢查于七氟烷吸入式麻醉狀態(tài)下進(jìn)行,使用彩色超聲診斷儀(IU22型,荷蘭飛利浦公司),L9-3線陣探頭,探頭使用頻率3～9MHz,將儀器調(diào)制到諧波狀態(tài),幀頻15～20fps,機(jī)械指數(shù)設(shè)置到0.06,圖像深度約4.0cm,時(shí)間增益補(bǔ)償(time gain compentation,TGC)曲線控制滑板全部至于中間位置,聚焦點(diǎn)設(shè)置在腎臟感興趣區(qū)(region of interest, ROI)中部,沿左腎長軸超聲探查。于鼠尾靜脈穿刺插管團(tuán)注注射用六氟化硫微泡(Sonovue, Bracco公司,瑞士)混懸液0.2m1,隨即推注生理鹽水1ml沖管。注射造影劑同時(shí)啟動(dòng)圖像采集以實(shí)時(shí)觀察左腎血流灌注造影動(dòng)態(tài)過程,連續(xù)采集6分鐘。15分鐘后如前所述順序再次注射造影劑行大鼠右側(cè)腎臟CEUS檢查。UUO術(shù)后7天CEUS檢查結(jié)束后立即處死大鼠取雙腎標(biāo)本,利用1%福爾馬林固定后,行石蠟包埋切片和常規(guī)HE染色。 CEUS結(jié)束后,使用QLAB軟件(版本號(hào)8.1,荷蘭飛利浦公司)進(jìn)行腎血流灌注定量分析。將ROI分別設(shè)置于與聲束垂直的腎皮質(zhì)和腎髓質(zhì),描繪腎臟血流灌注時(shí)間-強(qiáng)度曲線(TIC),再由TIC獲取相關(guān)參數(shù),包括曲線上升支斜率(slope rate of ascending curve, A);峰值強(qiáng)度(peak intensity,PI);達(dá)峰時(shí)間(time to peak,TTP);曲線下面積(area under curve,AUC)。 使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理所得數(shù)據(jù),各測量值用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。統(tǒng)計(jì)方法采用兩獨(dú)立樣本資料的t檢驗(yàn),P0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 1.CEUS結(jié)果：10只大鼠除1只大鼠死于麻醉意外,其余9例完成UUO模型術(shù)前和術(shù)后檢查。9只大鼠UUO術(shù)前與術(shù)后梗阻側(cè)及健側(cè)腎臟超聲造影劑顯影順序相同,首先腎動(dòng)脈顯影,繼而腎皮質(zhì)顯影,最后腎髓質(zhì)顯影；廓清順序則與增強(qiáng)順序相反。UUO造模術(shù)后7天梗阻側(cè)腎皮質(zhì)較術(shù)前灌注速度明顯減慢,增強(qiáng)程度減低、造影劑廓清時(shí)間延長；腎髓質(zhì)較術(shù)前灌注速度減慢,造影劑廓清時(shí)間延長,但增強(qiáng)程度變化不大；健側(cè)腎皮質(zhì)較術(shù)前血流灌注速度、增強(qiáng)程度變化不大,但造影劑廓清時(shí)間延長；健側(cè)髓質(zhì)較術(shù)前血流灌注速度、強(qiáng)度及造影劑廓清時(shí)間變化不大。 2.超聲定量分析結(jié)果：UUO術(shù)后梗阻側(cè)腎皮質(zhì)血流灌注曲線較術(shù)前上升及下降均緩慢,TTP顯著延長(術(shù)前21.27±4.08s,術(shù)后27.42±6.17s,)(P0.05),A(術(shù)前1.81+0.45dB/s,術(shù)后0.88+0.79dB/s,)(P0.05)及PI(術(shù)前16.50±1.36dB,術(shù)后13.60±2.64dB)(P0.05)較術(shù)前均明顯減低,AUC(術(shù)前1309.40±306.93dB.s,術(shù)后1508.43±481.56dB.s)(P0.05)較術(shù)前明顯增高；梗阻側(cè)腎髓質(zhì)血流灌注曲線較術(shù)前上升及下降均緩慢,TTP(術(shù)前25.59±3.92s,術(shù)后28.48±4.67s)(P0.05),TTP較術(shù)前明顯增高,但A、PI和AUC較術(shù)前無明顯變化(P0.05)；健側(cè)腎皮質(zhì)血流灌注曲線與術(shù)前30s之內(nèi)相似,30s后曲線下降緩慢,AUC(術(shù)前1209.94±298.41dB.s,術(shù)后1311.50±406.14dB.s)(P0.05)較術(shù)前明顯增高,A、PI和TTP較術(shù)前無明顯變化(P0.05)；健側(cè)腎髓質(zhì)血流灌注曲線較術(shù)前無明顯變化,A、PI、TTP和AUC較術(shù)前無明顯變化(P0.05)。 3.病理檢查結(jié)果UUO術(shù)后7天CEUS檢查結(jié)束后立即處死大鼠取雙腎標(biāo)本,置于1%福爾馬林溶液固定后,行石蠟包埋切片和常規(guī)HE染色。所有9只梗阻側(cè)腎臟均較健側(cè)腎臟體積明顯增大,梗阻側(cè)腎呈缺血狀顏色改變,腎盂腎盞擴(kuò)張,腎乳頭變平乃至消失,腎實(shí)質(zhì)變薄,皮髓質(zhì)分界欠清晰；鏡下,梗阻側(cè)腎臟近曲小管及遠(yuǎn)曲小管均出現(xiàn)不同程度的擴(kuò)張,腎間質(zhì)均出現(xiàn)單核巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞的浸潤,腎間質(zhì)水腫增寬,其中2例腎小管萎縮(22.2%,)提示早中期腎纖維化形成。健側(cè)腎臟大體及鏡下檢查較正常狀態(tài)改變不大。 結(jié)論CEUS及定量分析方法能反映UUO大鼠術(shù)后血流灌注狀態(tài)的改變,為臨床無創(chuàng)定量評(píng)價(jià)梗阻性腎病的血流灌注提供理論依據(jù)。
【學(xué)位單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類】：R445.1;R692

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2813864