【摘要】：研究背景 良性前列腺增生癥(Benignprostatichyperplasia，，BPH)是中老年男性的常見病、多發(fā)病，以進行性排尿困難為主要特點。增生的前列腺組織可壓迫尿道，是引起膀胱出口梗阻的原因之一，可繼發(fā)尿潴留、腎盂積水，產(chǎn)生明顯的尿路梗阻癥狀，最終可能導(dǎo)致膀胱及腎臟功能的損害，對患者的生活質(zhì)量造成嚴重的影響。 BPH的治療方式主要包括藥物治療、手術(shù)治療以及微創(chuàng)治療等。隨著近年來新興的超聲治療技術(shù)的快速發(fā)展，利用超聲治療技術(shù)消融BPH的研究也越來越多，主要包括高強度聚焦超聲(Highintensityfocusedultrasound，HIFU)和組織毀損術(shù)(Histotripsy)。 超聲空化效應(yīng)是超聲波的三大主要生物學(xué)效應(yīng)之一。國內(nèi)外多項研究發(fā)現(xiàn)，微泡增強的超聲空化效應(yīng)可以產(chǎn)生沖擊波、微射流等機械能量，造成微血管壁機械性損傷，出血和血腫形成。多種影像學(xué)檢查顯示，增生的前列腺內(nèi)腺大多血供異常豐富，微血管密度較高，有利于發(fā)揮微泡增強的超聲空化對微血管的破壞消融作用。另外，增生組織的新生血管一般具有生長迅速、管壁薄弱、結(jié)構(gòu)不完整等特點，使其容易成為超聲空化的作用靶點。因此空化效應(yīng)可能成為BPH消融治療的新技術(shù)。前期研究雖然證實，治療超聲聯(lián)合微泡對前列腺微血管造成機械性損傷，但對前列腺整體微循環(huán)的影響以及該方法對消融前列腺的有效性尚未做出評價。 研究目的 1.探討脈沖式治療超聲聯(lián)合微泡對前列腺微血管的破壞，對微循環(huán)血流灌注的影響及其病理機制； 2.探討脈沖式治療超聲聯(lián)合微泡消融前列腺的病理轉(zhuǎn)歸。 材料與方法 1.實驗材料： 實驗動物：成年雄性家犬41只，犬齡3～12年，體質(zhì)量12.0～21.0kg，由第三軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心及廣州市第一人民醫(yī)院動物室提供。 主要儀器：CZ-960型脈沖式超聲空化治療儀，治療頭頻率831kHz，峰值聲壓為4.6MPa，采取工作6s間歇6s的交替治療模式，平均聲強(ISPTA)為1.39W/cm~2。Siemens公司AcusonS2000超聲診斷儀，配備9L4高頻線陣探頭，Philips公司iU22超聲診斷儀，配備L12-5高頻線陣探頭，兩臺超聲診斷儀均配有低機械指數(shù)超聲造影功能及超聲造影聲學(xué)定量分析軟件。 主要試劑：脂氟顯脂質(zhì)微泡，以全氟丙烷為核心氣體，粒徑范圍2～10μm，其中98％在8μm以下，濃度為(4～9)×10~9/ml，用于超聲治療及超聲造影。2%伊文思藍(EB)溶液。Roche公司TUNEL原位細胞凋亡檢測試劑盒。 2.實驗方法： (1)脈沖式治療超聲聯(lián)合微泡對犬前列腺微循環(huán)的影響及其病理機制研究：隨機選取3只實驗動物，麻醉后開腹暴露前列腺。以前列腺表面縱行的中央淺溝為界，將超聲空化治療儀的治療頭垂直覆蓋前列腺一側(cè)，使該側(cè)得到超聲輻照，而對側(cè)無超聲輻照，形成自身對照。開啟治療儀治療10min，同時經(jīng)靜脈通道緩慢、勻速推注0.1ml/kg的微泡(稀釋至10ml生理鹽水)約8min，繼續(xù)緩慢推注生理鹽水2min。隨后經(jīng)靜脈注射2%的EB溶液，約半小時后處死動物后獲取標本，觀察前列腺切面表現(xiàn)，對比觀察超聲輻照區(qū)域與無超聲輻照區(qū)域的染色情況。將20只實驗動物隨機分為超聲聯(lián)合微泡組，單純超聲組，單純微泡組。超聲聯(lián)合微泡組將0.1ml/kg的微泡稀釋至10ml生理鹽水中，經(jīng)靜脈勻速、緩慢推注，持續(xù)約8min，隨后推注生理鹽水2min；同時超聲垂直輻照整個前列腺10min。單純超聲組采取相同的超聲輻照方式，但無微泡的注入，以等量生理鹽水替代。單純微泡組則僅注射相同的微泡。各組治療前后采用超聲造影的方法評價前列腺的血流灌注狀態(tài)，分析超聲造影時間-強度曲線。 上述三組實驗完畢后即刻處死實驗動物，獲取前列腺標本，觀察大體表現(xiàn)，光鏡下及透射電鏡下進行病理學(xué)檢查。 (2)脈沖式治療超聲聯(lián)合微泡消融前列腺的有效性研究：按前述方法將18只實驗動物分為三組，按照相同的治療方案實施治療，每組分為3個時間點(治療后即刻、治療后2天，治療后4天)分批處死動物，光鏡、透射電鏡下進行病理學(xué)檢查，并用TUNEL法對治療后即刻的前列腺細胞凋亡情況進行檢測。 結(jié)果 1.脈沖式治療超聲聯(lián)合微泡作用于前列腺后，EB示蹤法顯示前列腺經(jīng)過超聲輻照的一側(cè)呈紅色，幾乎無EB灌注，無超聲輻照的一側(cè)呈藍色，EB灌注較為均勻，提示輻照側(cè)EB整體灌注量明顯減少。超聲造影結(jié)果顯示：超聲聯(lián)合微泡組治療后時間-強度曲線的上升支、下降支較治療前更為陡直，平臺期消失或不明顯，造影劑的達峰時間由治療前的28.55±10.88s縮短至治療后的14.81±5.15s(P＜0.05)，曲線下面積由2083.87±596.22dB·s減小至1635.63±524.65dB·s(P＜0.05)，而峰值強度治療前后無明顯差異(P＞0.05)。單純超聲組及單純微泡組治療前后的時間強度-曲線形態(tài)及定量分析均無明顯差異。病理檢查可見前列腺微血管壁破裂，血栓形成，間質(zhì)及腺腔充滿紅細胞。單純超聲組及單純微泡組則無上述陽性發(fā)現(xiàn)。 2.超聲聯(lián)合微泡治療后即刻前列腺微血管破裂、毀損，血栓形成，細胞凋亡，治療后2天細胞壞死，炎性細胞浸潤，4天后局部可見徹底壞死區(qū)；單純超聲組治療后即刻細胞胞漿可見空泡，2天及4天后逐步趨于正常。單純微泡治療后無異常表現(xiàn)。治療后即刻單純超聲組前列腺細胞凋亡指數(shù)為(22.54±5.86)%，高于單純微泡組的(5.18±1.19)%(P＜0.05)，而超聲聯(lián)合微泡組則高達(52.72±6.29)%，高于MB組和US組(P＜0.05)。 結(jié)論 1.治療超聲聯(lián)合微泡能夠造成前列腺微血管破壞，血栓形成，使前列腺微循環(huán)血流灌注量顯著下降。 2.單純治療超聲可以誘導(dǎo)促進前列腺細胞凋亡，微泡增強的超聲空化效應(yīng)對細胞凋亡的作用顯著增強。 3.治療超聲聯(lián)合微泡可以使前列腺局部組織壞死，具有消融BPH的潛在應(yīng)用價值。
【圖文】：

第三 軍 醫(yī)大 學(xué) 碩士 學(xué) 位論 文 表 2- 1 治療 后 即刻 各組 犬 前列 腺 細胞 凋 亡指 數(shù) 比較 ( x ± s) MB US US + MB 治療 后即 刻 5. 1 8± 1. 1 9 22 . 54 ± 5 . 86 5 2. 72 ± 6. 29 ： 三 個分 組的 總 體比 較 及兩 組 間比 較 ， P 值 均 ＜0 . 05 。 B ：單 純 微泡 組 ；U S ：單 純 超聲 組； U S + MB ：超 聲 聯(lián)合 微 泡組 。凋 亡 指數(shù) （A I ）單

圖 1- 1 超 聲 治療 示意 圖 圖 1- 2 超 聲 造影 時 間強 度 曲線 分析 RO I 取樣 框示意 圖( iU 2 2 界面 )圖 1- 3 超 聲 造影 時 間強 度 曲線 分 析 RO I 取樣 框示意 圖 ( S 2 00 0 界面 )圖 1 - 4 EB 示蹤 法， 左 側(cè)無 超 聲輻 照 ，右 側(cè) 為超聲 輻 照區(qū) 域
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R445.1

【參考文獻】

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1 李婕;劉政;張嬋;方針強;趙洋;周仁杰;葉鋼;;超聲空化致犬前列腺損傷的形態(tài)學(xué)觀察[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2009年23期

2 徐文峰;張海濱;林哲;楊明;劉建華;葉珊;陳勇;于月儀;;經(jīng)直腸高能聚焦超聲治療良性前列腺增生:附262例報告[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2010年08期

3 孫楓;陳立新;張玉娟;焦陽;;經(jīng)直腸超聲造影在前列腺穿刺活檢中的應(yīng)用[J];廣東醫(yī)學(xué);2009年10期

4 劉德英;劉政;李秋穎;李澎;左松;譚開彬;劉平;付赤學(xué);高云華;;超聲造影顯像模式對實驗兔心肌血管通透性的影響[J];臨床超聲醫(yī)學(xué)雜志;2006年10期

5 張霞;卓忠雄;王曉燕;王祥衛(wèi);宋陽;;經(jīng)直腸超聲引導(dǎo)穿刺注射無水乙醇治療良性前列腺增生的價值[J];臨床超聲醫(yī)學(xué)雜志;2008年09期

6 唐杰;王知力;李俊來;羅渝昆;汪偉;徐建宏;石懷銀;;良性前列腺增生超聲造影的初步研究[J];中華男科學(xué)雜志;2007年07期

7 俞斌;王忠;;良性前列腺增生微創(chuàng)治療進展[J];中華男科學(xué)雜志;2007年08期

8 沈強;俞彰;法京;劉懿;高鴻建;鐘慈聲;;電鏡下幾種凋亡細胞的形態(tài)特征[J];復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年03期

9 莫潤陽;林書玉;王成會;;超聲空化的研究方法及進展[J];應(yīng)用聲學(xué);2009年05期

10 張華斌,劉杰,白喜玲,王金銳,賈建文;經(jīng)直腸超聲引導(dǎo)下注射無水乙醇治療良性前列腺增生[J];中國超聲醫(yī)學(xué)雜志;2005年11期

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