【摘要】：背景:基質(zhì)細胞衍生因子1是心肌梗死區(qū)域微環(huán)境中效力最強的趨化因子,在趨化干細胞修復梗死心肌以及在促進血管新生方面起到重要的作用。微泡和聲學活性物質(zhì)攜帶靶向配基,可制備成超聲成像靶向?qū)Ρ葎┎⑴c活體細胞結(jié)合,用于分子成像,超聲分子成像的關鍵是尋找"成像靶點",并成功制備能與"成像靶點"特異、高效結(jié)合的靶向超聲對比劑。目的:實驗制備和評價攜基質(zhì)細胞衍生因子1單克隆抗體的靶向微泡超聲對比劑。方法:采用"生物素-親和素"橋接法構(gòu)建攜基質(zhì)細胞衍生因子1單克隆抗體的靶向微泡超聲對比劑,并從外觀、p H值、粒徑測定、光鏡及熒光顯微鏡下觀、流式細胞儀檢測等多個方面對靶向?qū)Ρ葎┻M行評價。4頭中華小型豬均結(jié)扎左冠狀動脈前降支第一對角支制備心肌梗死模型,2頭開胸但不結(jié)扎左冠狀動脈前降支第一對角支,均注入靶向超聲對比劑,心肌組織冰凍切片后采用免疫熒光法檢測靶向微泡的體內(nèi)穩(wěn)定性。結(jié)果與結(jié)論:通過生物素-親和素橋接法可將基質(zhì)細胞衍生因子1抗體和超聲微泡兩者結(jié)合。體外實驗中對比劑外觀:表現(xiàn)為半透明的淡黃或綠色,靜置后分層。非靶向?qū)Ρ葎﹑ H值為7.02±0.12,靶向微泡對比劑的pH值為6.10±0.19。熒光顯微鏡下觀察靶向微泡明亮且呈指環(huán)狀綠色熒光環(huán)繞外殼周邊,劇烈震蕩后表面熒光無明顯改變。靶向?qū)Ρ葎┰跀y帶基質(zhì)細胞衍生因子1抗體之后微泡粒徑大小為(2 422.62±238.82)nm。流式細胞儀檢測顯示,靶向?qū)Ρ葎┰诓煌瑫r間段的基質(zhì)細胞衍生因子1攜帶率穩(wěn)定,靜置1 h后攜帶率穩(wěn)定且劇烈震蕩前后差異無顯著性意義。在體內(nèi)實驗中可見靶向微泡在心梗部位血管內(nèi)皮細胞處聚集。結(jié)果證實,經(jīng)生物素-親和素橋接法制備的攜基質(zhì)細胞衍生因子1單克隆抗體靶向微泡超聲對比劑體內(nèi)可與血管內(nèi)皮細胞結(jié)合,在體外結(jié)合率高而且結(jié)合穩(wěn)定。
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院心臟超聲診斷科;
【基金】：國家自然科學基金(81271590)~~
【分類號】：R542.22;R445.1

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本文編號：2547098