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攜帶cRGD肽的靶向納米粒超聲造影劑的制備以及體外尋靶實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時間:2018-06-12 06:31

  本文選題:靶向 + 納米粒; 參考:《中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù)》2017年06期


【摘要】:目的制備攜帶精-甘-天冬氨酸(cRGD)肽的聚乳酸/羥基乙酸(PLGA)納米粒超聲造影劑,觀察其在體外對大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC)的靶向能力。方法以PLGA-COOH和全氟新溴烷(PFOB)為原料,采用雙步乳化法制備PLGAPFOB納米粒,采用光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡以及透射電鏡觀察其表面以及內(nèi)部結(jié)構(gòu);采用馬爾文粒徑分析儀測量其粒徑大小、分布以及表面電位;通過碳二亞胺法連接cRGD肽制備靶向納米粒超聲造影劑(cRGD-NPs),用激光共聚焦顯微鏡以及流式細(xì)胞儀檢測PLGA-PFOB納米粒造影劑與cRGD肽的連接情況;在大鼠HSC中驗(yàn)證該造影劑的靶向性能。結(jié)果所得樣品為乳白色混懸液,納米粒大小均勻,粒徑分布較窄,平均粒徑(255.3±66.8)nm,多分散指數(shù)為0.025,Zeta電位為(-16.4±5.1)mV;掃描電鏡示納米粒表面光滑規(guī)則、透射電鏡示PLGA外殼里包裹液氮氟碳PFOB;共聚焦顯微鏡觀察到連接FITC-cRGD顯示為綠色,與顯示紅色的納米粒共同融合成橙色,靶向納米粒超聲造影劑大量向大鼠HSC聚集并被其吞噬,紅色熒光強(qiáng)度明顯多于普通非靶向造影劑。結(jié)論成功制備的攜帶cRGD肽的納米粒超聲造影劑,在體外實(shí)驗(yàn)中對大鼠HSC有較強(qiáng)的特異性親和力。
[Abstract]:Objective to prepare polylactic acid / hydroxyacetic acid (PLGA) nanoparticle ultrasound contrast agent carrying cRGD peptide and observe its targeting ability to rat hepatic stellate cells (HSC) in vitro. Methods using PLGA-COOH and perfluoroalkanane (PFOB) as raw materials, PLGAPFOB nanoparticles were prepared by double step emulsion method, and optical microscopy and scanning electron microscopy were used. The size, distribution and surface potential of the particle size, distribution and surface potential were measured by the Malvin particle size analyzer. The target nanoparticle ultrasound contrast agent (cRGD-NPs) was prepared by connecting cRGD peptide with the carbon two imide method. The PLGA-PFOB nanoparticle contrast agent and cRGD were detected by laser confocal microscope and flow cytometry. The targeting performance of the peptide was verified in the rat HSC. The results obtained were milky white suspension, the size of the nanoparticles was uniform, the particle size was narrow, the average particle size (255.3 + 66.8) nm, the polydispersity index was 0.025, the Zeta potential was (-16.4 + 5.1) mV; the scanning electron microscope showed the smooth rule of the nanoparticles surface, and the transmission electron microscope showed the PLGA shell. The fluorocarbon PFOB was encapsulated in liquid nitrogen; confocal microscopy showed that the connection FITC-cRGD was green and fused with the red nanoparticles into orange color. The target nanorage ultrasound contrast agents were aggregated and phagocytic in a large number of rat HSC, and the red fluorescence intensity was more than that of the ordinary non target contrast agent. The ultrasound contrast agent has a strong affinity for rat HSC in vitro.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院超聲分子影像學(xué)重慶市重點(diǎn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院超聲科;上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院超聲科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院超聲科;南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院超聲科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年基金(81501482、81401427);國家自然科學(xué)基金(81227801) 國家杰出青年科學(xué)基金(81425014)
【分類號】:R445.1

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本文編號:2008722

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