本文關(guān)鍵詞：低強(qiáng)度脈沖超聲對(duì)老年鼠損傷骨骼肌纖維化的影響及機(jī)制

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【摘要】：背景骨骼肌損傷與修復(fù)是創(chuàng)傷康復(fù)研究的熱點(diǎn)與難點(diǎn)問(wèn)題之一。在前期的大鼠動(dòng)物研究實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明低強(qiáng)度脈沖超聲(以下簡(jiǎn)稱LIPUS)可促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞再生,明顯改善骨骼肌的損傷修復(fù),體外研究發(fā)現(xiàn)LIPUS可促進(jìn)骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖,而抑制其分化。骨骼肌損傷修復(fù)過(guò)程中往往相并發(fā)生纖維化,LIPUS在促進(jìn)肌纖維再生的同時(shí),是否對(duì)骨骼肌損傷修復(fù)的纖維化也產(chǎn)生影響,為此我們需要進(jìn)一步的研究。目的探討低強(qiáng)度脈沖超聲治療對(duì)老年鼠損傷骨骼肌纖維化的抑制作用及其機(jī)制,為臨床應(yīng)用低強(qiáng)度脈沖超聲防治骨骼肌損傷后的纖維化提供理論依據(jù)。方法采用手術(shù)切割的方法,將30只老年雄性昆明小鼠的雙側(cè)腓腸肌造成局部損傷,并隨機(jī)分為超聲組和對(duì)照組。超聲組從傷后3天開始在損傷局部給予頻率1MHz、平均強(qiáng)度40mW/cm2、占空比20%的低強(qiáng)度脈沖超聲波進(jìn)行治療,每次10min,1次/日,連續(xù)治療10天;對(duì)照組未做治療,自然愈合。分別在傷后第3天、第7天、第14天、第21天和第28天取雙側(cè)損傷腓腸肌標(biāo)本進(jìn)行冰凍切片染色。采用HE染色和Masson染色進(jìn)行組織學(xué)觀察,免疫組化法觀察I型膠原(CollagenⅠ)和α-平滑肌肌球蛋白(α-SMA)表達(dá),并結(jié)合圖像分析軟件進(jìn)行定量分析。結(jié)果1.HE染色觀察:傷后3天,超聲組與對(duì)照組損傷部位均見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn);傷后7天、14天,2組局部均可見(jiàn)新生肌纖維形成,對(duì)照組間質(zhì)細(xì)胞較多,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較明顯,以及肌纖維萎縮,超聲組多核肌纖維數(shù)量較多且排列較為整齊;傷后21天、28天,對(duì)照組多核肌纖維排列方向比較紊亂,膠原纖維較多,間質(zhì)纖維化明顯,部分融合成片狀,邊界不清;超聲組肌纖維排列較均勻,成肌細(xì)胞和肌管也較前增多,細(xì)胞外間質(zhì)纖維化較少。2.Masson染色觀察:傷后3天,2組均可見(jiàn)有少量膠原纖維存在于損傷區(qū)間質(zhì)內(nèi),平均光密度值為(6.05±1.02)%和(5.71±0.76)%,兩組相比無(wú)顯著差異;傷后7天、14天、21天,兩組均有膠原纖維增生形成,并逐漸明顯、集中收縮,于傷后21天平均光密度值達(dá)高峰,分別為(13.40±1.30)%和(21.32±2.83)%,且超聲組膠原纖維明顯少于對(duì)照組,2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);傷后28天,兩組膠原纖維開始吸收、收縮、重塑,超聲組明顯少于同期對(duì)照組(P0.01)。3.Ⅰ型膠原表達(dá):傷后3天、7天,對(duì)照組和超聲組I型膠原蛋白表達(dá)的平均光密度值為[(5.37±0.54)%、(6.59±0.76)%和(5.13±0.64)%、(7.23±1.65)%],2組對(duì)比無(wú)顯著差異(P0.05);傷后3天至21天,兩組Ⅰ型膠原表達(dá)均逐漸增加,傷后21天達(dá)高峰(平均光密度值分別為15.83±2.13%和11.72±1.31%);傷后14天、21天和28天,超聲組I型膠原表達(dá)均小于同時(shí)段對(duì)照組(P0.01)。4.α-SMA表達(dá):傷后3天,超聲組和對(duì)照組α-SMA表達(dá)的平均光密度值為(6.30±0.57)%和(6.30±0.57)%,2組對(duì)比無(wú)顯著性差異(P0.05)。傷后3天、7天至14天,兩組α-SMA表達(dá)均逐漸增加,傷后14天達(dá)高峰,平均光密度值分別為(9.17±2.20)%和(11.39±1.92)%,傷后21天、28天逐漸降低。組內(nèi)比較,超聲組傷后14d與傷后7d相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),傷后21與傷后14d相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;對(duì)照組傷后21d與傷后14d比無(wú)差異,與傷后28d比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。組間比較,傷后7、28d,超聲組α-SMA表達(dá)小于同時(shí)段對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);傷后14、21d,超聲組α-SMA表達(dá)也低于同時(shí)段對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論1.采用手術(shù)切割的方法,造成老年鼠腓腸肌缺損性損傷,可制造動(dòng)物損傷骨骼肌纖維化實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?.采用頻率1MHz、平均強(qiáng)度40m W/cm2、占空比20%的脈沖超聲波治療可抑制老年鼠骨骼肌損傷后的纖維化。3.低強(qiáng)度脈沖超聲對(duì)損傷骨骼肌纖維化的抑制作用與其降低I型膠原和α-SMA表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R445.1;R685

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王樹臣;離心運(yùn)動(dòng)后大鼠骨骼肌中巨噬細(xì)胞的時(shí)相變化[D];上海體育學(xué)院;2014年

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本文編號(hào)：1255867