本文關(guān)鍵詞：常山酮抑制放療導(dǎo)致Lewis肺癌細(xì)胞小鼠移植瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β SB431542 放射治療 常山酮 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化

【摘要】：目的:探討應(yīng)用常山酮阻斷轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)信號(hào)傳導(dǎo)通路,并觀察其與腫瘤的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的相關(guān)性。方法:建立腫瘤移植瘤動(dòng)物模型,挑選80只腫瘤負(fù)荷相近的小鼠隨機(jī)分為五組,分別為空白對(duì)照組(NC)、常山酮組、放射治療組(RT)、常山酮聯(lián)合放射治療組,以及放射治療聯(lián)合TGF-β抑制劑組,每組16只。當(dāng)移植瘤最大徑長(zhǎng)至0.8cm時(shí),作為實(shí)驗(yàn)的第1天。對(duì)照組不做處理;常山酮組予常山酮灌胃給藥,每只鼠30μg/0.2ml/d,連續(xù)一個(gè)月或至處死;放射治療組于第3天、4天給予移植瘤6MV-X線照射,放射治療劑量為10Gy×2;放射治療聯(lián)合常山酮組給藥處理同常山酮組,放射治療的時(shí)間及劑量同放射治療組;放射治療聯(lián)合抑制劑組于第1天開始予TGF-β抑制劑(SB431542終濃度1μM)灌胃給藥,每只小鼠0.1ml/d,連續(xù)一個(gè)月或至處死,放射治療處理同放射治療組。分別應(yīng)用ELISA、Western Blot、免疫組化及免疫熒光等技術(shù),研究各組Lewis肺癌(LLC)細(xì)胞系TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)通路的變化及其對(duì)EMT生物指標(biāo)的影響。結(jié)果:ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,放射治療后小鼠移植瘤LLC細(xì)胞中TGF-β水平較放射治療前升高,且放療后10天、14天時(shí)TGF-β所出現(xiàn)的變化和進(jìn)行治療之前對(duì)比而言,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:單純放射治療組腫瘤組織中可見大量黃色染色區(qū)域,TGF-β呈陽(yáng)性表達(dá)。單純放射治療組TGF-β水平較空白對(duì)照組明顯升高(P0.05),而放射治療聯(lián)合常山酮組TGF-β水平明顯低于單純放射治療組(P0.05),放射治療聯(lián)合常山酮組及放射治療聯(lián)合TGF-β抑制劑組TGF-β水平無(wú)統(tǒng)學(xué)差異(P0.05)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究確立了照射及常山酮對(duì)TGF-β信號(hào)通路的影響。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),在單純放射治療組中,小鼠的移植瘤中出現(xiàn)的P-Smad2蛋白表達(dá)水平和空白對(duì)照組進(jìn)行比較來(lái)看,有很明顯的上升,而Smad6、7的蛋白表達(dá)情況則出現(xiàn)下降;此外,兩聯(lián)合組小鼠移植瘤內(nèi)的P-Smad2蛋白表達(dá)較單純照射組明顯降低,Smad6、7蛋白表達(dá)較空白對(duì)照組明顯升高。移植瘤Western Blot顯示:RT組E-cadherin表達(dá)降低、N-cadherin、Vimentin表達(dá)升高;兩聯(lián)合組較RT組E-cadherin表達(dá)升高,N-cadherin、Vimentin表達(dá)降低。小鼠移植瘤免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:單純照射組較空白對(duì)照組E-cadherin表達(dá)降低、N-cadherin表達(dá)升高;兩聯(lián)合組較單純照射組E-cadherin表達(dá)均升高,N-cadherin表達(dá)均呈陰性。放射治療結(jié)束后第12天(實(shí)驗(yàn)第15天),兩聯(lián)合組腫瘤體積開始小于放射治療組(P值均小于0.05)。結(jié)論:放射治療極有可能是啟動(dòng)了TGF-β信號(hào)通路,從而導(dǎo)致上皮間質(zhì)化被誘導(dǎo)出現(xiàn);常山酮所能起到的作用是能夠抑制放療所導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞移植瘤EMT,也就是說(shuō),其作用機(jī)制可能與TGF-β信號(hào)通路的激活或阻斷存在聯(lián)系。
【關(guān)鍵詞】：轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β SB431542 放射治療 常山酮 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R734.2;R730.55
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 對(duì)象與方法13-25
• 1.1 材料和儀器13-15
• 1.1.1 細(xì)胞系和動(dòng)物13
• 1.1.2 試劑13-14
• 1.1.3 耗材14
• 1.1.4 照射裝備和參數(shù)14
• 1.1.5 儀器設(shè)備14-15
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法15-25
• 1.2.1 試劑的配制15-16
• 1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)16-17
• 1.2.3 動(dòng)物的飼養(yǎng)管理17
• 1.2.4 移植瘤模型的建立17
• 1.2.5 小鼠分組及治療方法17-18
• 1.2.6 小鼠腫瘤組織中蛋白含量的測(cè)定18
• 1.2.7 Western Blot法測(cè)定smad蛋白水平18-19
• 1.2.8 免疫印跡19-22
• 1.2.9 Elisa法檢測(cè)小鼠腫瘤組織TGF-β 水平22-23
• 1.2.10 非生物素免疫組化二步法檢測(cè)腫瘤組織EMT相關(guān)蛋白及TGF-β表達(dá)情況23-24
• 1.2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法24-25
• 結(jié)果25-31
• 2.1 TGF-β 水平的測(cè)定25-26
• 2.1.1 免疫組織化學(xué)結(jié)果25
• 2.1.2 不同時(shí)間段TGF-β 的表達(dá)情況25-26
• 2.1.3 各組TGF-β 水平的變化26
• 2.2 EMT相關(guān)標(biāo)志物變化26-29
• 2.2.1 細(xì)胞免疫熒光顯示EMT相關(guān)標(biāo)志物變化26-27
• 2.2.2 小鼠移植瘤免疫組化顯示27-28
• 2.2.3 移植瘤Western Blot顯示28-29
• 2.3 TGF-β/smad通路變化29-30
• 2.4 TGF-β 抑制劑對(duì)小鼠腫瘤細(xì)胞的抑制作用30-31
• 討論31-40
• 3.1 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移31-33
• 3.2 EMT與腫瘤放化療抵抗的關(guān)系33-35
• 3.3 放射治療可以導(dǎo)致上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化35-36
• 3.4 TGF-β信號(hào)通路與EMT36-37
• 3.5 放射治療會(huì)導(dǎo)致TGF-β 的升高37-38
• 3.6 常山酮阻斷TGF-β 通路38-40
• 結(jié)論40-41
• 論文創(chuàng)新點(diǎn)41-42
• 參考文獻(xiàn)42-54
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明54-55
• 綜述 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化網(wǎng)絡(luò)是腫瘤治療抵抗的新靶點(diǎn)55-89
• 綜述參考文獻(xiàn)68-89
• 致謝89-90
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷90

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;抗球蟲劑——常山酮[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 侯海玲;常山酮抑制放療導(dǎo)致Lewis肺癌細(xì)胞小鼠移植瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王鵬;常山酮聯(lián)合放射治療對(duì)小鼠移植瘤免疫微環(huán)境影響及機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

2 蔡偉;常山堿與類似物常山酮合成研究[D];華東理工大學(xué);2011年

3 顧艷艷;抗球蟲藥常山酮的合成方法研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2010年

4 金麗瓊;“常山酮”合成路線及其堿的毒理學(xué)研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

5 呂迅;生物堿常山酮和抗血栓藥奧扎格雷的合成[D];山東大學(xué);2007年

6 馮永斌;非甾體抗炎藥達(dá)布飛龍和生物堿常山酮的合成[D];山東大學(xué);2006年

7 王嚴(yán)飛;常山酮中間體合成工藝及其中試研究[D];南昌大學(xué);2014年

8 侯亞莉;氫溴酸常山酮對(duì)鱘魚的急性毒性及其殘留檢測(cè)方法的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

9 伊帥;常山酮增強(qiáng)Lewis肺癌放療效果研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

10 吳寧鵬;雞組織中常山酮?dú)埩舻腅LISA檢測(cè)方法和HPLC檢測(cè)方法研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

，

本文編號(hào)：1085864