本文關(guān)鍵詞：冷自體血心臟停搏液對離體兔心肌缺血再灌注損傷心肌細胞凋亡的影響

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【摘要】：目的本研究通過建立離體兔心肌缺血再灌注損傷模型，對比觀察冷自體血心臟停搏液、HTK液和STH液對離體兔心肌缺血再灌注損傷細胞凋亡的影響，探討冷自體血心臟停搏液對心肌缺血再灌注損傷的心肌保護作用機制。 方法選擇健康普通實驗級大白兔45只，體重在（2000-2600g），雌雄不拘。隨機分為3組：冷自體血心臟停搏液A組（CABC組，n=15）、康斯特液B組（HTK組，n=15）及改良托馬斯心臟停搏液C組（STH液組，n=15）。HTK液組和STH液組經(jīng)開胸后直接于主動脈及肺動脈根部切斷取出心臟；CABC組需開胸后于主動脈根部先快速抽血（按晶體母液與血液1∶4比例配置CABC停跳液），抽血完成后立即浸入備好的冰屑中備用。各組兔心臟取出后均以4℃左右的K-H液連接于主動脈根部沖洗（以減少對后期心臟停跳與復(fù)跳的影響），然后迅速連接于自制的Langendorff灌注裝置，灌注15min左右以達平衡狀態(tài)為宜；然后各組分別灌注4℃（15ml/kg）的CABC、HTK及STH停搏液使心臟停搏，心臟停搏120min，灌注K-H液使心臟復(fù)跳后再灌注30min使其達到平衡狀態(tài)。實驗結(jié)束后，快速從灌注裝置上取下心臟，剪取心尖部心肌組織（約2×3×3cm大�。┖�，立即放入4%多聚甲醛固定液中固定48H后，于石蠟包埋切片后行免疫組織化學法和原位缺口末端標記法（TUNEL法）對比觀察各組心肌組織細胞的細胞凋亡（細胞核染色后成棕黃色）的變化；應(yīng)用免疫組織化學法測定心肌細胞凋亡（caspase-3、bax及bcl-2）數(shù)及TUNEL法觀察凋亡細胞的數(shù)量和比例。 結(jié)果離體兔心臟經(jīng)三組不同心臟停搏液灌注后：1、各組Bcl-2蛋白表達百分率組間比較：CABC組與HTK組比較，無明顯差異(P0.05)；CABC組與STH組比較，較后者明顯增加，具有顯著統(tǒng)計學意義(P0.001)；HTK組與STH組比較也有明顯增加，具有明顯統(tǒng)計學意義(P0.01)。2、各組Bax蛋白表達百分率組間比較：CABC組與HTK組比較，較后者減少不明顯，無統(tǒng)計學意義(P0.05)；CABC組與STH組比較，較后者有增加，具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；HTK組與STH組比較無明顯差異(P0.05)。各組caspase-3蛋白表達百分率組間比較：CABC組與HTK組比較，有統(tǒng)計學意義(P0.05)；CABC組與STH組比較，具有統(tǒng)計學意義(P0.05)；HTK組與STH組比較無明顯統(tǒng)計學意義(P0.05)。4、各組凋亡指數(shù)（AI值）表達百分率組間比較：CABC組與HTK組比較，無明顯差異(P0.05)；CABC組與STH組比較，，CABC組有明顯減少，具有明顯統(tǒng)計學意義(P0.01)；HTK組與STH組比較，HTK組有明顯較少，具有明顯統(tǒng)計學意義(P0.01)。 結(jié)論1、離體兔心臟缺血再灌注后心肌細胞存在細胞凋亡現(xiàn)象。2、使用冷自體血心臟停搏液與HTK液進行心肌灌注，心肌細胞凋亡明顯輕于使用St.Thomas心臟停搏液。3、冷自體血心臟停搏液的心肌保護作用與抑制心肌缺血再灌注期間心肌細胞凋亡有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：冷自體血心臟停跳液 心肌缺血/再灌注損傷 細胞凋亡 缺血預(yù)處理
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R726.5
【目錄】：

• 中英文縮略表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-14
• 標本采集、制備與檢測14-15
• 統(tǒng)計學處理15-16
• 結(jié)果16-22
• 討論22-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻31-35
• 綜述35-44
• 參考文獻41-44
• 答謝44-45
• 作者簡介45

【參考文獻】

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本文編號：984892