本文關(guān)鍵詞：冷自體血心臟停搏液對離體兔心肌缺血再灌注損傷心肌細(xì)胞凋亡的影響

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【摘要】：目的本研究通過建立離體兔心肌缺血再灌注損傷模型，對比觀察冷自體血心臟停搏液、HTK液和STH液對離體兔心肌缺血再灌注損傷細(xì)胞凋亡的影響，探討冷自體血心臟停搏液對心肌缺血再灌注損傷的心肌保護(hù)作用機(jī)制。 方法選擇健康普通實(shí)驗(yàn)級大白兔45只，體重在（2000-2600g），雌雄不拘。隨機(jī)分為3組：冷自體血心臟停搏液A組（CABC組，n=15）、康斯特液B組（HTK組，n=15）及改良托馬斯心臟停搏液C組（STH液組，n=15）。HTK液組和STH液組經(jīng)開胸后直接于主動(dòng)脈及肺動(dòng)脈根部切斷取出心臟；CABC組需開胸后于主動(dòng)脈根部先快速抽血（按晶體母液與血液1∶4比例配置CABC停跳液），抽血完成后立即浸入備好的冰屑中備用。各組兔心臟取出后均以4℃左右的K-H液連接于主動(dòng)脈根部沖洗（以減少對后期心臟停跳與復(fù)跳的影響），然后迅速連接于自制的Langendorff灌注裝置，灌注15min左右以達(dá)平衡狀態(tài)為宜；然后各組分別灌注4℃（15ml/kg）的CABC、HTK及STH停搏液使心臟停搏，心臟停搏120min，灌注K-H液使心臟復(fù)跳后再灌注30min使其達(dá)到平衡狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，快速從灌注裝置上取下心臟，剪取心尖部心肌組織（約2×3×3cm大�。┖�，立即放入4%多聚甲醛固定液中固定48H后，于石蠟包埋切片后行免疫組織化學(xué)法和原位缺口末端標(biāo)記法（TUNEL法）對比觀察各組心肌組織細(xì)胞的細(xì)胞凋亡（細(xì)胞核染色后成棕黃色）的變化；應(yīng)用免疫組織化學(xué)法測定心肌細(xì)胞凋亡（caspase-3、bax及bcl-2）數(shù)及TUNEL法觀察凋亡細(xì)胞的數(shù)量和比例。 結(jié)果離體兔心臟經(jīng)三組不同心臟停搏液灌注后：1、各組Bcl-2蛋白表達(dá)百分率組間比較：CABC組與HTK組比較，無明顯差異(P0.05)；CABC組與STH組比較，較后者明顯增加，具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)；HTK組與STH組比較也有明顯增加，具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。2、各組Bax蛋白表達(dá)百分率組間比較：CABC組與HTK組比較，較后者減少不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；CABC組與STH組比較，較后者有增加，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；HTK組與STH組比較無明顯差異(P0.05)。各組caspase-3蛋白表達(dá)百分率組間比較：CABC組與HTK組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；CABC組與STH組比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；HTK組與STH組比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4、各組凋亡指數(shù)（AI值）表達(dá)百分率組間比較：CABC組與HTK組比較，無明顯差異(P0.05)；CABC組與STH組比較，，CABC組有明顯減少，具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；HTK組與STH組比較，HTK組有明顯較少，具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論1、離體兔心臟缺血再灌注后心肌細(xì)胞存在細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。2、使用冷自體血心臟停搏液與HTK液進(jìn)行心肌灌注，心肌細(xì)胞凋亡明顯輕于使用St.Thomas心臟停搏液。3、冷自體血心臟停搏液的心肌保護(hù)作用與抑制心肌缺血再灌注期間心肌細(xì)胞凋亡有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：冷自體血心臟停跳液 心肌缺血/再灌注損傷 細(xì)胞凋亡 缺血預(yù)處理
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R726.5
【目錄】：

• 中英文縮略表4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-14
• 標(biāo)本采集、制備與檢測14-15
• 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理15-16
• 結(jié)果16-22
• 討論22-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 綜述35-44
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 答謝44-45
• 作者簡介45

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：984892