本文關(guān)鍵詞：脂多糖體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷的機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 脂多糖 星形膠質(zhì)細(xì)胞 超氧化物歧化酶 丙二醛 茶多酚

【摘要】：腦白質(zhì)損傷是早產(chǎn)兒腦損傷的主要類型。其病理特點(diǎn)主要是反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)化、小膠質(zhì)細(xì)胞浸潤、少突膠質(zhì)細(xì)胞損傷和髓鞘損害及軸突損傷等。流行病學(xué)研究表明,宮內(nèi)感染在早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷的發(fā)生機(jī)制中起了重要的作用。宮內(nèi)感染導(dǎo)致腦白質(zhì)損傷,其不僅僅是少突膠質(zhì)細(xì)胞損傷的過程,星形膠質(zhì)細(xì)胞在疾病的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮了重要的作用。星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷在腦白質(zhì)損傷的發(fā)生機(jī)制中可能有重要作用,但感染／炎癥是否導(dǎo)致未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的氧化損傷及其機(jī)制尚不清楚。因此,本研究通過星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng),研究脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的氧化損傷影響,以及星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液細(xì)胞因子巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)是否參與這一過程。而且予茶多酚(TP-EGCG)干預(yù),探討TP-EGCG對LPS體外刺激后未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用；以及星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液細(xì)胞因子MIP-1β是否參與這一過程,為將來腦白質(zhì)損傷的防治提供理論依據(jù)。 目的： 研究LPS體外刺激后未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的總超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量及細(xì)胞因子MIP-1β水平的變化,探討LPS體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的氧化損傷作用,以及這一作用是否有細(xì)胞因子MIP-1β參與；另外通過予TP-EGCG干預(yù)后檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞總SOD活力、MDA含量、凋亡細(xì)胞數(shù)與總細(xì)胞數(shù)的百分比及細(xì)胞因子MIP-1β等水平的變化,探討TP-EGCG是否對LPS體外刺激后星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷有保護(hù)作用。 方法： 1.星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)：不同濃度LPS (5μg/mL、10μg/mL)分別刺激不同時(shí)間(1天、3天、7天)后,比色法檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液總SOD活力和MDA含量變化,觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷情況。ELISA法檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液細(xì)胞因子MIP-1β的濃度變化。 2. TP-EGCG干預(yù)：以LPS (5μg/mL)刺激3天,同時(shí)予TP-EGCG干預(yù)后,比色法檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液總SOD活力和MDA含量變化,觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷情況；以LPS (5μg/mL)刺激1天、3天,通過TUNEL法檢測凋亡細(xì)胞數(shù)與總細(xì)胞數(shù)百分比的變化,觀察細(xì)胞凋亡情況；ELISA法檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液細(xì)胞因子MIP-1β的濃度變化。 結(jié)果： 1. LPS (5μg/mL,分別刺激1天、3天、7天時(shí)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液總SOD活力較對照組差異均無顯著意義(P0.05)。LPS(5μg/mL)刺激3天時(shí)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液MDA含量較對照組明顯增加(p0.05); LPS(10mg/mL)刺激1天、3天、7天及LPS (5μg/mL)刺激1天、7天時(shí)MDA含量較對照組差異均無顯著意義(P0.05)。LPS (5μg/mL)刺激1天和7天、LPS (10μg/mL)刺激1天和3天星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液MIP-1β濃度明顯降低(P0.05); LPS (5μg/mL)刺激3天、LPS (10μg/mL)刺激7天星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液MIP-1β濃度較對照組差異無顯著意義(P0.05)。 2.予TP-EGCG干預(yù)后刺激3天星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液總SOD活力與LPS組及對照組比較明顯減少,差異具有顯著意義(P0.05)。予TP-EGCG干預(yù)后刺激3天星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液MDA含量較LPS組比較明顯減少(P0.05),但與對照組比較差異不明顯(P0.05)。刺激1天時(shí)LPS組、LPS+EGCG組與TP-EGCG組之間相比較,星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)百分比差異無顯著意義(P0.05),其與對照組比較差異也無顯著意義(P0.05); LPS刺激3天時(shí)星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)百分比較對照組明顯增加,差異具有顯著意義(P0.05),且予TP-EGCG干預(yù)后星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)百分比較LPS組明顯減少,差異具有顯著意義(P0.05),TP-EGCG刺激3天與對照組比較,星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)百分比明顯減少,差異具有顯著意義(P0.05)。予TP-EGCG干預(yù)后刺激3天及單用TP-EGCG刺激3天星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)液MEP-1β濃度較LPS刺激組及對照組降低均無顯著意義。 結(jié)論： 1.不同濃度的LPS體外刺激對星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷的影響程度可能是不同的。 2. TP-EGCG對星形膠質(zhì)細(xì)胞及LPS體外刺激條件下的星形膠質(zhì)細(xì)胞可能有抗氧化、抗凋亡作用,表明TP-EGCG對LPS體外刺激引起的星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷可能有保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：脂多糖 星形膠質(zhì)細(xì)胞 超氧化物歧化酶 丙二醛 茶多酚
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R722.6;R742
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-12
• 目次12-14
• 引言14-16
• 第一部分 脂多糖體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的氧化損傷機(jī)制研究16-31
• 1 前言16-17
• 2 實(shí)驗(yàn)材料和方法17-22
• 2.1 材料17-18
• 2.2 方法18-22
• 3 結(jié)果22-28
• 3.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞的純化培養(yǎng)22-23
• 3.2 LPS體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞的氧化作用23-24
• 3.3 LPS體外刺激對未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷的影響24-26
• 3.4 ELISA結(jié)果26-28
• 4 討論28-30
• 5 結(jié)論30-31
• 第二部分 TP-EGCG對LPS體外刺激時(shí)未成熟星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用機(jī)制研究31-51
• 1 前言31-33
• 2 實(shí)驗(yàn)材料和方法33-40
• 2.1 材料33-34
• 2.2 方法34-40
• 3 結(jié)果40-48
• 3.1 TP-EGCG對LPS體外刺激條件下星形膠質(zhì)細(xì)胞的氧化作用40-41
• 3.2 TP-EGCG對LPS體外刺激條件下星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用41-42
• 3.3 LPS刺激和TP-EGCG干預(yù)不同時(shí)間后星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的變化42-46
• 3.4 TP-EGCG對LPS體外刺激條件下星形膠質(zhì)細(xì)胞MIP-1β濃度的變化46-48
• 4 討論48-50
• 5 結(jié)論50-51
• 全文結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-55
• 綜述55-62
• 參考文獻(xiàn)60-62
• 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果62

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 陳惠金;魏克倫;姚裕家;楊于嘉;周叢樂;范秀芳;高喜容;江蓮;劉曉紅;錢繼紅;王莉;吳本清;吳高強(qiáng);張青梅;張小蘭;周曉玉;;我國早產(chǎn)兒腦室周圍白質(zhì)軟化發(fā)生率的多中心調(diào)查報(bào)告[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2008年06期

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本文編號(hào)：943806